一、In vitro study of influence of raloxifene on the growth of human ovarian cancer cell line Skov 3（论文文献综述）
张琼文,张叁保,杨丽丽,高小童,刘笑笑,陈婷,江明生[1]（2021）在《COX-2在动物卵泡发育过程中的研究进展》文中研究指明雌性动物卵泡发育是一个动态的、受众多激素及调控因子直接或间接参与的复杂生物学过程,其中卵巢颗粒细胞的增值和分化能调节卵泡的生长和成熟,颗粒细胞的凋亡,影响卵泡闭锁。环氧合酶-2（cyclooxygenase 2,COX-2）在卵巢中主要在颗粒细胞中表达,可通过对下游代谢产物的调节,以不同的方式抑制颗粒细胞凋亡,参与PI3K/AKT/NOTCH/Wnt信号通路的调节,从而作为排卵诱导因子诱导排卵。
邱玲[2]（2021）在《miRNAs调控抵抗素所致卵巢癌细胞顺铂耐药的机制研究》文中研究表明研究背景:卵巢癌是所有妇科生殖肿瘤中最致命的,其死亡率逐年上升的一个主要原因是起病隐匿发现时已是疾病晚期阶段。我们迫切需要找到新的调控因子,来控制卵巢癌的聚集性,这些因子或许可以作为靶向治疗的靶点,应用于卵巢癌的治疗。人抵抗素是一种多肽类激素,富含丝氨酸和半胱氨酸残基。人抵抗素基因位于第19对染色体短臂13.2位点,包含4个外显子,全长476个碱基对,由108个氨基酸残基组成,相对分子质量为12.5k Da,以二硫键连接起来的同型二聚体形式存在。抵抗素是一种巨噬细胞衍生的细胞因子,可能是肥胖和胰岛素抵抗之间的重要链接。在许多人类癌症中,抵抗素水平与高级别癌症和/或无复发生存期有关,例如乳腺癌、软骨肉瘤、结直肠癌、子宫内膜癌、胃食管癌、肺癌、多发性骨髓瘤、前列腺癌和肾癌等。抵抗素不仅与高级别的肿瘤患者生存相关,近年来研究提高了其在化疗中发挥作用的可能性。据文献报道高剂量的抵抗素与多种癌症化疗敏感性降低相关。此外,目前卵巢癌患者面临的主要临床挑战是对化疗的获得性耐药,抵抗素在不同肿瘤的生长、增殖、血管生成、转移和治疗耐药中发挥重要作用。然而,抵抗素的这种作用在卵巢癌中从未被评估过,具有重要的研究价值,或能成为一种新的卵巢癌治疗手段。越来越多的相关研究证明,miRNAs在肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移等恶性行为中起着至关重要的作用,miRNAs在EMT的调控中起着关键作用,同时一些miRNAs会影响癌症的干细胞干性和耐药性。因此了解一些miRNAs与EMT和CSCs干性及耐药性之间的关系,有利于基础研究和指导临床治疗。实验目的:基于抵抗素在不同癌症中的作用,特别是它在获得性耐药中的作用,我们推测抵抗素可能在卵巢癌细胞中起到促癌和耐药的作用。本研究通过探讨抵抗素在卵巢癌细胞的生长、克隆性、侵袭性和顺铂耐药性中的作用,并阐明抵抗素介导的这些作用的机制,为抵抗素对卵巢癌细胞顺铂耐药的作用及机制提供依据。实验方法:1.在抵抗素缺失和存在（10ng/mL和25ng/mL两种剂量）的情况下,将A2780、SK-OV-3和顺铂耐药A2780Cis细胞用不同剂量顺铂处理72h,然后进行MTT实验,观察细胞生长指数并计算不同卵巢癌细胞系耐顺铂的IC50值。2.用ELISA法定量检测抵抗素处理过的A2780细胞、A2780Cis细胞及SK-OV-3细胞血管生成标志物VEGF和MMP2的分泌情况。Western blotting和实时定量PCR（quantitative real time qPCR）检测VEGF和MMP2蛋白表达和mRNA水平。3.不同剂量的抵抗素（0、5、10、15、20和25 ng/mL）处理两种卵巢癌细胞系A2780和SK-OV-3,采用MTT细胞增殖实验、集落形成实验和细胞侵袭实验观察细胞的生长及侵袭情况。4.qRT-PCR和Western blotting检测经25 ng/mL抵抗素处理的A2780和SK-OV-3细胞的EMT标志物E-cadherin、vimentin和Zeb1水平及肿瘤干细胞干性标志物sox2、oct4和nanog mRNA水平和蛋白表达。5.pre-let-7a、pre-miR-200c和pre-miR-186转染A2780和SK-OV-3细胞,qRT-PCR检测转染后A2780和SK-OV-3卵巢癌细胞中miRNAs（let-7a、miR-200c和miR-186）水平。6.选择A2780细胞系建立NOD/SCID荷瘤小鼠模型,随机分成2组,待3w肿瘤形成后,用抵抗素或对照组药物（PBS）处理小鼠,定量qRT-PCR检测EMT标志物E-cadherin、vimentin、Zeb1及肿瘤干细胞干性标志物sox2、oct4和nanog和蛋白表达水平。实验结果:1.A2780、SK-OV-3和A2780Cis细胞在抵抗素缺失和存在（10 ng/mL和25ng/mL）的情况下,较低剂量抵抗素组（10 ng/mL）明显增加了对顺铂的耐药性,较高剂量抵抗素组（25 ng/mL）进一步增加了耐药性,说明抵抗素对顺铂产生耐药性具有剂量依赖性。抵抗素处理组细胞的IC50值较对照组明显升高。2.25 ng/mL的抵抗素增加了A2780、A2780Cis和SK-OV-3卵巢癌细胞中VEGF和MMP2的分泌,且顺铂耐药的A2780Cis细胞比亲代A2780细胞分泌更多的VEGF和MMP2。3.抵抗素可显着刺激A2780和SK-OV-3卵巢癌细胞的生长,细胞生长随着抵抗素剂量增加及暴露时间延长而增长,说明抵抗素对卵巢癌细胞的生长、侵袭具有剂量和时间依赖性。4.在A2780和SK-OV-3细胞中,抵抗素使上皮标志物E-cadherin的表达降低约2倍（p<0.01）,在A2780细胞中,vimentin增加约4倍（p<0.01）,ZEB1增加约3倍（p<0.01）,SK-OV-3细胞中vimentin和ZEB1增加约2倍（p<0.01）。同时抵抗素可以提高干细胞干性标志物:sox2、oct4和nanog的mRNA转录水平。这些结果充分支持了抵抗素对EMT和干细胞干性的诱导。5.我们证实miRNAs参与了抵抗素诱导顺铂耐药:25 ng/mL抵抗素组与对照组比较,miRNAs（let-7a,miR-200c,miR-186）的表达水平被抵抗素持续下调,结合pre-let-7a、pre-miR-200c和pre-miR-186转染A2780和SK-OV-3细胞,pre-miRNAs水平的升高破坏了抵抗素介导的侵袭性。6.动物实验显示:与对照组相比,抵抗素治疗组小鼠肿瘤中miRNAs:let-7a、miR-200c和miR-186水平下调;肿瘤残体中:EMT（E-cadherin降低,vimentin/ZEB升高）和肿瘤干细胞干性（sox2,oct4和nanog升高）。此外,给予抵抗素的小鼠肿瘤体积显着增大（p<0.05）。结论:1.相同剂量抵抗素处理A2780细胞和A2780Cis细胞后,A2780Cis细胞的IC50值更高,同时,抵抗素可诱导顺铂耐药细胞中血管生成标志物MMP2和VEGF表达增加,说明了抵抗素可能导致卵巢癌细胞顺铂耐药。2.抵抗素可促进卵巢癌细胞的生长和侵袭,且具有时间、剂量依赖性,可能是导致卵巢癌细胞顺铂耐药的原因之一。3.抵抗素可促进卵巢癌细胞的E-cadherin降低、vimentin和Zeb1上调,促进上皮-间质转化而导致顺铂耐药。4.抵抗素可促进卵巢癌细胞细胞的Sox2、oct4和nanog表达上调,显示出肿瘤干细胞特性而导致顺铂耐药。5.体外和体内实验证实,let-7a,miR-200c and miR-186的过度表达显着逆转抵抗素介导的卵巢癌生长、侵袭、EMT和肿瘤干细胞干性,说明miRNAs可通过以上机制调控卵巢癌的顺铂耐药。
张蒙蒙[3]（2020）在《植物雌激素毛蕊异黄酮对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的肝脏保护作用及机制》文中认为肝纤维化（liver fibrosis）是一种常见的病理生理过程,是由各种病因引起的肝脏结缔组织异常增生,是肝癌和肝硬化发展的关键步骤。临床研究发现,女性患肝纤维化和肝硬化的风险要比男性低,表明雌激素对肝脏具有保护作用,但雌激素治疗肝纤维化会带来许多副作用,植物雌激素具有潜在的类似雌激素的作用,并且相对于雌激素更加安全。植物雌激素毛蕊异黄酮（Calycosin）已被证明具有抗氧化应激、抗肠纤维化、抗肝损伤和抑制非酒精性脂肪肝炎等药理活性。在我们之前的研究中也发现,毛蕊异黄酮对肝星状细胞（HSC）的活化、增殖和迁移有抑制作用。因此,毛蕊异黄酮在肝纤维化方面的作用具有探讨价值。本研究将在体内实验中,探讨毛蕊异黄酮在肝纤维化模型中发挥的作用,并进一步阐明药物防治肝纤维化的可能作用机制。目的:本研究旨在探讨毛蕊异黄酮对四氯化碳（CCl4）诱导的肝纤维化小鼠的肝脏保护作用及可能机制。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为6个实验组,分别是:对照组（n=9）,模型组（n=12）,毛蕊异黄酮不同剂量组（20、40和80 mg/kg,每组n=12）和秋水仙碱组（0.1 mg/kg,n=12）。向雄性小鼠腹膜内注射1m L/kg CCl4橄榄油溶液,每周2次,持续8周建立肝纤维化模型;从造模之日起,通过灌胃法向小鼠施用毛蕊异黄酮和秋水仙碱,每天1次,持续8周。通过HE和Masson染色法评估肝组织病理学变化和胶原纤维表达情况;通过肝脏与体重之比计算肝脏指数;通过生化法测定血清ALT和AST活性,肝组织SOD活性,肝组织Hyp和MDA水平;通过q RT-PCR法测定α-SMA,Collagen I,JAK2和STAT3 m RNA表达;通过western blotting检测α-SMA,Collagen I,ERα,ERβ,TIMP-1,MMP-1,JAK2,p-JAK2,STAT3和p-STAT3的蛋白表达;通过免疫组织化学法测定肝组织α-SMA和ERβ水平。结果:1.HE和Masson染色结果表明,模型组小鼠肝组织中有大量脂肪变性,细胞坏死和炎性浸润,小叶结构破坏明显,胶原蛋白沉积过多,提示肝纤维化模型造模成功;毛蕊异黄酮（40 mg/kg和80 mg/kg）组和秋水仙碱组较模型组肝脏损伤和胶原蛋白沉积相对减少,肝脏组织学更接近正常组织学。2.毛蕊异黄酮显着降低了肝脏指数、血清ALT和AST活性、肝组织MDA、Hyp水平,并增加了肝脏SOD活性。毛蕊异黄酮组的α-SMA、Collagen I m RNA和蛋白表达均明显低于模型组。3.在机制研究部分,毛蕊异黄酮增加MMP-1并抑制TIMP-1的表达,从而改善了MMP-1/TIMP-1的比率;毛蕊异黄酮显着增加肝组织ERβ蛋白的表达,而ERα则没有显着性变化;毛蕊异黄酮显着增加JAK2和STAT3 m RNA表达、p-JAK2和p-STAT3的蛋白表达,以及p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3的相对蛋白表达,但是对总JAK2和总STAT3蛋白表达保持相对不变。结论:毛蕊异黄酮显着抑制CCl4诱导的小鼠肝纤维化,机制可能涉及:（1）毛蕊异黄酮具有抑制氧化应激作用;（2）毛蕊异黄酮通过平衡MMP-1/TIMP-1系统而抑制胶原蛋白合成;（3）毛蕊异黄酮增加肝组织ERβ的表达并激活JAK2-STAT3通路,二者可能具有关联性,尚有待进一步证明。
徐晶,丁宁,冯健,谢倩,焦思蒙,王世辉,刘晓平,胡春[4]（2020）在《呋喃并[3,2-g]色满类化合物的合成及抗肿瘤活性研究》文中研究指明为了发现新型选择性雌激素受体调节剂,以雷洛昔芬为先导化合物,利用生物电子等排原理以及拼合原理,将雷洛昔芬结构中的苯并噻吩环替换成呋喃并[3,2-g]色满骨架,并进行结构优化,考虑到目标化合物合成的可行性等因素,设计出2-芳酰基-3-芳基呋喃并[3,2-g]色满类化合物作为目标化合物。以7-羟基色满为原料,经过酯化反应和Fries重排后得到6-（4-甲氧基苯甲酰基）-7-羟基色满,进而与取代的α-卤代苯乙酮缩合得关键中间体2-芳甲酰基-3-（4-甲氧基苯基）呋喃并[3,2-g]色满,脱甲基后再与不同氯乙基胺类化合物进行Williamson反应得到目标化合物。所有的10个目标化合物均未见文献报道,其结构经ESI-MS和1H NMR确证。采用MTT法对目标化合物体外抗肿瘤活性进行初步筛选,结果表明,目标化合物7d对人乳腺癌细胞MCF-7、人骨肉瘤细胞U2OS-EGFP-4A12G和人卵巢癌细胞SKOV3具有显着的抑制活性,具有进一步研究价值。
周桃[5]（2019）在《大豆苷元磷脂复合物之固体分散体的制备及评价》文中指出目的:大豆苷元（7,4’-二酚羟基异黄酮,daidzein,DD）又名大豆黄素、黄豆苷元,是大豆异黄酮（soybean isoflavones,SIF）的主要组成成分,具有类雌激素样作用。然而DD的水溶性和脂溶性均较差,影响了其在肠道中的吸收,导致口服生物利用度低。磷脂复合物（phospholipid complex,PLC）是药物与磷脂分子通过电荷迁移作用形成的较为稳定的分子间络合物。难溶性药物与磷脂复合有利于改善药物与细胞膜的亲和力,从而可提高药物的生物利用度,但PLC具有较强的疏水性,水中分散性差,故而利用固体分散技术将PLC制备成固体分散体（solid dispersion,SD）可有效提高PLC的亲水性,由此可进一步提高难溶性药物的口服生物利用度。本课题以DD为模型药物,通过构建其磷脂复合物之固体分散体（PLC-SD）,拟达到提高DD口服生物利用度的目的,以期为磷脂复合与固体分散联用技术应用于大豆异黄酮和其他黄酮类药物的可行性提供研究依据。方法:1.以复合率为评价指标采用正交设计法优化大豆苷元磷脂复合物（DD-PLC）的处方及制备工艺,再以溶出度为评价指标进行大豆苷元磷脂复合物之固体分散体（DD-PLC-SD）的处方筛选;通过差示扫描量热分析（DSC）、红外光谱（IR）、X射线衍射（XRD）及扫描电镜（SEM）等表征方法进行物相鉴定。2.建立高效液相色谱法（HPLC）测定DD含量的方法,通过表观溶解度、油水分配系数及溶出度的测定,考察DD-PLC和DD-PLC-SD的溶解性及体外溶出性能。3.建立大鼠离体外翻肠囊模型,以累积吸收量（Q）、吸收速率常数（Ka）和药物吸收率（V）为评价指标,考察DD、DD-PLC和DD-PLC-SD在空肠、回肠、结肠的吸收特性。4.建立HPLC法测定大鼠血浆中DD含量的分析方法,以原料药作为参比,对DD-PLC和DD-PLC-SD灌胃给药后在大鼠体内的药动学及生物利用度进行评价。结果:1.通过正交设计得出的DD-PLC的最佳制备工艺为:四氢呋喃为反应溶剂,DD反应浓度2.5mg/ml,DD与磷脂的投料比1:3.5,反应温度55℃,反应时间1h,在该条件下DD与磷脂的复合率达到94.18±0.91%。筛选出的DD-PLC-SD的处方为:聚维酮K30（PVP K30）为载体,DD-PLC与PVP K30的质量比为1:3。DSC、IR、XRD和SEM的表征结果表明DD-PLC与DD-PLC-SD制备成功。2.DD-PLC-SD在水中和正辛醇中的溶解度分别为原料药的19.3倍和6.7倍,油水分配系数为原料药的8.4倍;体外溶出实验结果表明,在3种pH条件下DD-PLC-SD的溶出度均较原料药有显着提高,在pH=6.8的PBS缓冲液中DD-PLC-SD在1h内的累积溶出率达到75%以上,而原料药在同条件下3h内的累积溶出率不足20%。与原料药相比,DD-PLC的溶解度、油水分配系数和溶出度亦均有所提高,但提高程度不如DD-PLC-SD显着。3.DD-PLC-SD在各肠段的Ka显着高于原料药（P<0.05）,DD-PLC在空肠和回肠的Ka显着高于原料药（P<0.05）;DD-PLC-SD在结肠的Ka显着高于DD-PLC（P<0.05）。各时间点的Q和V的数据表明,在不同肠段DD-PLC与DD-PLC-SD的吸收效果均优于原料药,而DD-PLC和DD-PLC-SD在空肠和回肠的吸收效果无明显差别。4.所建立的HPLC法测定大鼠血浆中DD含量的分析方法,血浆内源性物质无干扰,方法学考察结果符合生物样品检测要求。药动学研究结果表明,DD、DD-PLC和DD-PLC-SD在大鼠体内的药动学过程均符合一室模型,三者的达峰时间(tmax)分别为（116.67±15.16）min、（43.39±11.28）min和（36.67±9.10）min,峰浓度(cmax)分别为（0.17±0.09）μg/ml、（0.39±0.06）μg/ml和（0.68±0.04）μg/ml,DD-PLC的相对生物利用度（Fr）为476.6%,DD-PLC-SD的Fr为925.5%。可见,将DD制成PLC或PLC-SD后,在大鼠体内的吸收速度明显加快,生物利用度显着提高,而DD-PLC-SD较之DD-PLC具有更高的生物利用度。结论:本课题成功构建并评价了DD-PLC-SD。将DD制成PLC-SD可显着提高其溶出性和肠壁透过性,从而可大幅提高口服生物利用度。研究结果表明,在磷脂复合物的基础上再制成固体分散体有助于进一步提高DD的口服生物利用度。本课题对磷脂复合与固体分散联用技术应用于大豆异黄酮和其他黄酮类药物的可行性提供了研究依据。
王成双,佐满珍[6]（2018）在《顺铂联合他莫昔芬对卵巢癌A2780细胞增殖及凋亡的影响》文中研究表明目的研究顺铂联合他莫昔芬对卵巢癌A2780细胞周期、细胞凋亡的影响,以期能为临床卵巢癌患者提供新的辅助治疗方案理论依据。方法采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）检测IC50和细胞生长抑制率,采用流式细胞术检测细胞周期,Hoechst染色检测细胞凋亡。结果 （1）顺铂及他莫昔芬能抑制细胞增殖,顺铂IC50为:2.8μg/mL;他莫昔芬IC50为:12.69μg/mL;（2）顺铂和他莫昔芬对卵巢癌A2780细胞表现出凋亡作用（P <0.01）;（3）顺铂及他莫昔芬均使人卵巢癌A2780细胞周期停滞于G0/G1期（P <0.05,P <0.01）。结论顺铂联合他莫昔芬可诱导A2780细胞周期阻滞和细胞凋亡,从而抑制A2780细胞生长。
马乾章[7]（2018）在《小白菊内酯及大黄素抑制肠腺癌细胞增殖作用机制的实验研究》文中研究表明目的:近年来,新兴的化学生物学学科发展非常迅猛。该学科利用现有的数量庞大而且化学结构多样的小分子化合物库,针对研究者所需要的化合物的生物活性进行筛选,并以此为依据进行相关的作用机制研究。本研究所选药物为小白菊内酯和大黄素,二者是从天然植物中提取的小分子化合物。其生物活性均具有明显的抗癌作用,尤其是肠腺癌,近年来的研究逐渐增多。因此,延续我们前期对小白菊内酯和大黄素抗肠腺癌生物活性的研究,本课题采用体外实验的方式,对小白菊内酯诱导HCT-8/VCR细胞凋亡和耐药逆转作用机制靶点,以及大黄素诱导CACO-2细胞凋亡和调控PI3K/AKT信号通路的作用机制靶点进行了相关研究。通过对小白菊内酯和大黄素抗癌活性及作用机制的研究,为天然植物药物来源的小分子化合物抗癌作用提供基础,为天然植物药物用于临床肿瘤的治疗开拓市场。后续,我们将针对前期的研究成果,对两种小分子化合物的生物活性与其结构的相关性进行分析,对于不理想的结构进行修饰,为新的抗癌小分子药物的研发做出贡献。研究方法:一、小白菊内酯诱导HCT-8/VCR细胞凋亡和耐药逆转作用研究1、MTT法检测PTL对HCT-8、HCT-8/VCR细胞的增殖抑制作用培养结肠癌细胞株HCT-8、HCT-8/VCR细胞株,加入96孔板,实验组加入不同浓度的PTL,对照组则加等量不含药物的培养液,处理12、24、48小时后,MTT法检测各孔吸光度（OD）值,计算细胞增殖抑制率。2、流式细胞仪（Annexin V-FITC/PI染色）检测PTL对HCT-8、HCT-8/VCR细胞凋亡的影响。消化收集对照组、PTL5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L处理24h的HCT-8、HCT-8/VCR细胞,AnnexinV/FITC染色后,流式细胞仪检测,分析细胞凋亡百分比。3、吖啶橙（AO）/溴化乙锭（EB）荧光染色检测PTL对HCT-8、HCT-8/VCR细胞凋亡的影响。取对数生长期HCT-8、HCT-8/VCR细胞,每孔1×104个/ml、2ml接种于6孔板中,孔内放入盖玻片。设小白菊内酯浓度5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、及对照组共4组,每组3个复孔,每组给药24h后,取出盖玻片,固定、AO/EB染色、、封片,荧光显微镜观察,每组分别计数,每次计数细胞300个,计算凋亡率。4、Western-blot法检测PTL对HCT-8、HCT-8/VCR细胞Bax、Bcl-2、蛋白表达的影响。收集对照组、PTL5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L处理24h的HCT-8、HCT-8/VCR细胞蛋白,用western blot方法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达。5、MTT法检测PTL对HCT-8/VCR的耐药逆转作用（1）取对数生长期HCT-8、HCT-8/VCR细胞,加入96孔板,分别加入不同浓度的VCR,处理24小时后,MTT法检测HCT-8、HCT-8/VCR细胞VCR的半数抑制浓度,及HCT-8/VCR对VCR的耐药指数。（2）取对数生长期HCT-8/VCR细胞,加入96孔板,分别设对照组、PTL5μmol/L、VCR（0.25、0.5、1、2、4、6、10μg/ml）、PTL5μmol/L+VCR各浓度组,处理24小时后,MTT法检测PTL对HCT-8/VCR的耐药逆转作用。6、流式细胞仪（Annexin V-FITC/PI染色）检测PTL对HCT-8/VCR的耐药逆转作用。消化收集对照组、PTL5μmol/L、VCR2μg/ml、PTL5μmol/L+VCR2μg/ml处理24h的HCT-8/VCR细胞,AnnexinV/FITC染色后,流式细胞仪检测,分析细胞凋亡百分比。7、Western-blot法检测PTL对HCT-8/VCR细胞P-gp、MRP、GST-π蛋白表达的影响。收集HCT-8对照组、HCT-8/VCR对照组、PTL5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L处理24h的HCT-8/VCR细胞蛋白,用western blot方法检测P-gp、MRP、GST-π蛋白的表达。二、大黄素诱导CACO-2细胞凋亡及对PI3K/AKT信号通路的调控作用研究1、MTT法检测大黄素对CACO-2细胞增殖抑制的影响对数生长期的CACO-2细胞,加入96孔板,实验组加入不同浓度的PTL,对照组则加等量不含药物的培养液,处理24小时后,MTT法检测各孔吸光度（OD）值,计算细胞增殖抑制率。2、流式细胞术检测大黄素对CACO-2细胞凋亡的影响。消化收集对数生长期的CACO-2细胞,以大黄素处理CACO-2细胞24h,终浓度分别为0μmol/L、15μmol/L、30μmol/L和60μmol/L,然后以AnnexinV/FITC染色,流式细胞仪检测,分析细胞凋亡百分比。3、DAPI染色检测大黄素对CACO-2细胞凋亡的影响取对数生长期CACO-2细胞,每孔1×104个/ml、2ml接种于6孔板中,孔内放入盖玻片。设大黄素浓度15μmol/L、30μmol/L和60μmol/L、及对照组共4组,每组3个复孔,,每组给药24h后,取出盖玻片,固定、DAPI染色、碳酸盐缓冲甘油封片,荧光显微镜观察,激发波长为359 nm。观察细胞凋亡情况。4、流式细胞术检测大黄素对CACO-2细胞周期的影响取对数生长期的CACO-2细胞,用RPMI-1640完全培养基制成2×104个/m1的单细胞悬液,接种于6孔培养板中,每孔2ml,37℃培养12小时,更换培养液,加入药物。大黄素物终浓度分别为0μmol/L、15μmol/L、30μmol/L和60μmol/L;对照组为加入完全培养基组,空白对照为只加入完全培养基,置培养箱中培养24h后,用胰酶消化细胞,调整细胞浓度为1x106个/ml,取0.25ml细胞,PBS清洗,1000rpm,4℃离心5分钟,弃上清（重复两次）;将细胞重悬于0.25ml结合缓冲液中,取0.1ml细胞悬液置于5ml流式管中,加入PI 20ul至终浓度50ug/ml,锡箔纸包住,避光4度染色30min,24h内上机检测。用流式细胞仪进行细胞周期检测,重复实验3次。5、Western-blot法检测大黄素对CACO-2细胞Bax、Bcl-2、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达的影响收集对照组、15μmol/L、30μmol/L和60μmol/L大黄素处理24h的CACO-2细胞蛋白,用western blot方法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:1、PTL对HCT-8、HCT-8/VCR细胞的增殖抑制作用小白菊内酯对结肠癌HCT-8、HCT-8/VCR细胞株有增殖抑制作用,并呈浓度及时间依赖关系,PTL12h半数抑制浓度IC50分别为20.21±2.63μmol/L,21.52±3.25μmol/L。PTL24h半数抑制浓度IC50分别为15.46±1.22μmol/L,17.05±2.78μmol/L。PTL48h半数抑制浓度IC50分别为11.44±1.65μmol/L,10.85±2.02μmol/L。2、PTL对HCT-8、HCT-8/VCR细胞凋亡的影响。对照组HCT-8细胞凋亡率4.23%±0.75%,与对照组比较,经5、10、20μmol/L的PTL处理24h后,HCT-8细胞的凋亡率显着增加（p<0.05）,分别为8.23%±1.45%,22.46%±2.75%,38.16%±3.25%。对照组HCT-8/VCR细胞凋亡率4.42%±1.16%,与对照组比较,经5、10、20μmol/L的PTL处理24h后,HCT-8/VCR细胞的凋亡率显着增加（p<0.05）,分别为8.43%±0.95%,21.67%±3.53%,39.16%±3.51%。上述结果表明PTL以浓度依赖方式诱导HCT-8、HCT-8/VCR细胞凋亡。3、荧光染色检测PTL对HCT-8、HCT-8/VCR细胞凋亡的影响荧光染色结果显示,PTL以浓度依赖方式诱导HCT-8、HCT-8/VCR细胞凋亡。对照组HCT-8细胞凋亡细胞比率为10.33%±2.05%,与对照组比较,经5、10、20μmol/L的PTL处理24h后,HCT-8细胞的凋亡率显着增加（p<0.05）,分别为20.55%±3.55%,32.46%±3.76%,46.8%±4.28%。对照组HCT-8/VCR细胞凋亡细胞比率9.42%±1.25%,与对照组比较,经5、10、20μmol/L的PTL处理24h后,HCT-8/VCR细胞的凋亡率显着增加（p<0.05）,分别为18.66%±2.15%,30.65%±2.87%,45.44%±3.81%。4、Western-blot法检测PTL对HCT-8、HCT-8/VCR细胞Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。对照组HCT-8、HCT-8/VCR细胞可见Bax低表达,与对照组比较,PTL 5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L组Bax表达显着增加（p<0.05）。对照组HCT-8、HCT-8/VCR细胞可见Bcl-2高表达,与对照组比较,PTL 5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L组Bax表达显着减少（p<0.05）。上述结果表明,PTL通过以浓度依赖方式增加HCT-8、HCT-8/VCR细胞Bax的表达,降低Bcl-2的表达,诱导HCT-8、HCT-8/VCR细胞凋亡。5、MTT法检测PTL对HCT-8/VCR的耐药逆转作用（1）VCR对结肠癌HCT-8、HCT-8/VCR细胞株有增殖抑制作用（p<0.05）,并呈浓度依赖关系（p<0.05）,VCR半数抑制浓度IC50分别为2.21±0.24μg/ml、38.9±3.04μg/ml,HCT-8/VCR对VCR的耐药指数为17.6倍。（2）VCR0.25、0.5、1、2、4μg/ml对HCT-8/VCR细胞无显着增殖抑制作用（p>0.05）,VCR 6、10μg/ml对HCT-8/VCR细胞有轻度增殖抑制作用（p<0.05）,PTL5μmol/L与VCR（0.25、0.5、1、2、4、6、10μg/ml）联用可显着增加VCR对HCT-8/VCR细胞的增殖抑制作用（p<0.05）。联用后VCR IC50为3.01±0.45μg/ml,与VCR单独应用时比较,IC50显着降低（p<0.05）,PTL可显着降低HCT-8/VCR对VCR的耐药指数（p<0.05）。上诉结果说明,PTL可显着增加显着增加VCR对HCT-8/VCR细胞的增殖抑制作用,逆转HCT-8/VCR的耐药。6、流式细胞仪（Annexin V-FITC/PI染色）检测PTL对HCT-8/VCR的耐药逆转作用。Annexin V-FITC/PI染色检测凋亡结果显示,对照组细胞凋亡率5.01%±0.47%,经VCR2μg/ml处理24h后,HCT-8/VCR细胞的凋亡率为6.93%±1.45%,与对照组比较,无显着差异（p>0.05）,经PTL5μmol/L处理24h后,HCT-8/VCR细胞的凋亡率为10.02%±0.86%,与对照组比较,凋亡率显着增加（p<0.05）,PTL5μmol/L+VCR2μg/ml处理24h的HCT-8/VCR细胞凋亡率为34.7%±2.33%,与VCR2μg/ml组及PTL5μmol/L组比较,凋亡率均显着性增加（p<0.05）。结果表明,PTL可显着增加VCR诱导HCT-8/VCR细胞凋亡能力,逆转HCT-8/VCR细胞对VCR的耐药。7、Western-blot法检测PTL对HCT-8/VCR细胞P-gp、MRP、GST-π蛋白表达的影响。western blot方法检测结果显示,HCT-8对照组可见P-gp、MRP、GST-π蛋白的低表达;与HCT-8对照组比较,HCT-8/VCR对照组P-gp、MRP、GST-π蛋白表达显着增加（p<0.05）;与HCT-8对照组比较,HCT-8/VCR对照组PTL5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L处理HCT-8/VCR细胞24h后,P-gp、MRP、GST-π蛋白表达显着减少（p<0.05）,且PTL浓度越大蛋白表达越低。8、随着大黄素浓度的逐渐提高,CACO-2细胞生存率逐渐降低,至200μmol/L,细胞生存率几乎接近0。而大黄素对CACO-2细胞培养24h的IC 50值为30μmol/L。9、随着大黄素浓度的逐渐升高,CACO-2细胞凋亡率也随之升高,从对照组的1.85%,升至60μmol/L大黄素组的42.66%。大黄素对CACO-2细胞诱导凋亡的作用呈剂量依赖趋势。10、30μmol/L和60μmol/L的大黄素干预后,细胞核明显浓缩,染色加深,偶见核染色质呈新月形聚集于核膜一边。尤其是60μmol/L的大黄素干预后,凋亡细胞核碎裂成大小不等的圆形小体,并被细胞膜所包绕,疑似凋亡小体。11、对照组细胞大部分处于G0/G1期,为62.3%,处于S期33.7%,处于G2/M期4.0%;大黄素干预后,细胞周期在G2/M期明显发生停滞,该期细胞数显着增多。并且随着大黄素浓度的提高,停滞于G2/M期的细胞也逐渐增多。以60μmol/L的大黄素组G2/M细胞周期阻滞最为明显。12、对照组细胞Bax呈低水平表达,而随着大黄素浓度的增高,表达水平逐渐上调;Bcl-2表达水平与Bax正好相反,对照组细胞Bcl-2、p-PI3K和p-AKT呈高水平表达,随着大黄素浓度的增高,表达水平逐渐下调。而非磷酸化PI3K、AKT表达水平各组间无明显差异。结论:1、小白菊内酯对HCT-8、HCT-8/VCR细胞具有抑制增殖及诱导凋亡作用,小白菊内酯对结肠癌细胞增殖抑制及诱导凋亡作用不受HCT-8/VCR细胞耐药性的影响,小白菊内酯可通过增加Bax的表达,降低Bcl-2的表达来诱导结肠癌细胞凋亡。2、小白菊内酯可显着增加VCR对HCT-8/VCR细胞的增殖抑制能力及凋亡诱导能力,小白菊内酯对HCT-8/VCR细胞具有耐药逆转作用。其机制主要是通过PTL降低HCT-8/VCR细胞P-gp、MRP、GST-π蛋白的表达,逆转HCT-8/VCR细胞的耐药性。3、大黄素对CACO-2结肠癌细胞的生长具有明显的抑制作用。其抗癌作用主要是由于诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞。此外,它还能抑制CACO-2细胞的PI3/AKT信号级联,提示大黄素在结肠癌治疗中的潜在应用。
蓝宝珍,吴华[8]（2018）在《卵巢癌雌激素治疗的研究进展》文中进行了进一步梳理卵巢癌是妇科三大恶性肿瘤之一,因其早期诊断困难、易转移、易耐药、易复发等特点,使其死亡率最高,5年总生存率不足40%,且晚期卵巢癌的患者长期生存率不足20%。雌激素一直被认为是卵巢癌的危险因素,卵巢组织长期暴露在高水平的类固醇激素中,提示雌激素在卵巢癌中可能具有重要作用。笔者就雌激素及其受体与卵巢癌的关系作一综述。
何欢[9]（2014）在《化学制剂分次给药对卵巢癌细胞种群恢复的影响及其在铂类耐药型复发卵巢癌患者中的疗效观察》文中提出目的：比较顺铂（Cisplatin，CDDP）与紫杉醇（Paclitaxel，PTX）不同的给药方案（单次或分次给药）对卵巢癌细胞SKOV3种群恢复的影响，并观察该两种细胞毒制剂分次给药对复发性铂类耐药及难治性卵巢癌患者的疗效。方法：1.倒置显微镜观察CDDP和/或PTX单次或分次给药后对SKOV3细胞凋亡与种群恢复的影响；并用CCK-8法分别测定各处理组在第7天（D7）及D21的吸光度值（Optical density，OD）。2.对20例复发性铂类耐药和难治性卵巢癌患者进行CDDP90mg/m2分为D1, D2, D3+PTX175mg/m2分为D1, D8方案化疗，通过分析治疗前后患者症状、体征、影像学检查及CA125的变化情况，评估这部分患者对该方案的化疗反应性，探讨该方案的临床应用价值。结果：11.1CDDP单次或分次给药对SKOV3的凋亡与种群恢复的影响无明显差异（F=70.421，p=0.970）；1.2单用PTX分次给药及CDDP联合PTX分次给药均较单次给药明显抑制SKOV3细胞的种群恢复（F=1872.275，p=0.000；F=1633.565，p=0.000），且其抑制作用在联合用药组中更明显（F=2500.464，p=0.000）。22.1观察20例复发性铂类耐药和难治性卵巢癌患者对CDDP90mg/m2分为D1, D2, D3+PTX175mg/m2分为D1, D8化疗方案的反应性，结果提示反应率为75%（15/20）,其中完全缓解率为25%（5/20）；2.2该方案主要的不良反应为骨髓抑制和胃肠道反应，积极对症处理的后，患者对此方案耐受性良好。结论：细胞学实验结果提示CDDP联合PTX分次给药可明显抑制卵巢癌SKOV3细胞的种群恢复。临床中，对于复发性铂类耐药和难治性卵巢癌患者，联合该两种药物分次给药获得较好反应性，但具体机理及对临床患者生存的改善需要进一步探讨和观察。
蒋心惠[10]（2011）在《汉防已碱的药代动力学和抗肿瘤特性研究》文中认为目的研究家兔和大鼠体内汉防己碱（Tet）的代谢动力学特征以及Tet的抗肿瘤特性,以期评价Tet用于治疗肿瘤性疾病的合理性。方法采用RP-HPLC法,以静脉及灌胃给药的方式给予家兔及SD大鼠一定量的Tet,收集并测定血浆、尿液和粪便中Tet及其代谢物含量;用DAS软件计算药代动力学参数。以形态学、MTT法、流式细胞术、Western-blot等方法和技术研究Tet单用或合用其他抗肿瘤药物时,对肝癌Hep3b、白血病K562、人成骨样肉瘤MG63和卵巢癌SKOV3非耐药和耐药细胞的作用。结果1. Tet经静脉或灌胃给予家兔后,其体内过程均符合二室模型;静脉注射（5 mg/kg体重）后的血药峰浓度(Cmax)、药时曲线下面积(AUC0→∞)、清除率（Cl0→∞）、表观分布容积（Vd）和消除半衰期（t1/2β）分别为388.81±160.04 ng/mL、59861.149±26962.196μg/L*min、0.503±0.173 L/min/kg、179±76.185 L/kg和283.808±162.937 min。灌胃（10 mg/kg体重）后的血药峰浓度(Cmax)、药时曲线下面积(AUC0→∞)、清除率（Cl0→∞）、表观分布容积（Vd）和消除半衰期（t1/2β）分别为92.448±23.795 ng/mL、18986.217±7462.308μg/L*min、0.805±0.267 L/min/kg、110.284±94.176 L/kg和732.919±847.32 min。2.家兔连续三次静脉注射Tet后120 h内,经尿排泄总量约占给药总量的23.4%,其中原型药约占4.05%。尿液中代谢物主要有3种形式。经粪排泄总量约占总给药量23.1%,其中原型药约占7.81%。粪便中代谢物也有3种形式。大鼠经单次静脉注射Tet后70 h内,经尿排泄总量约占给药量的65.1%,其中原形药约占14.2%。尿液中排泄物主要有2种形式。,经粪便排泄总量占所给药物量的24.1%,其中原形药约占7.0%;代谢物有3种形式。3.建立了Hep3b/5-Fu、K562/ADM、MG63/cDDP和SKOV3/cDDP耐药细胞模型,发现耐药Hep3b/5-Fu和K562/ADM细胞基础量P-gp和MRP1蛋白表达低于非耐药株。Tet（0.33-1.0μg/mL）对耐药蛋白表达呈双向调节作用,但不同细胞所需调节浓度不同:0.33μg/mL上调Hep3b、Hep3b/5-Fu、K562和K562/ADM细胞P-gp表达,也上调K562和K562/ADM细胞MRP1表达;0.5μg/mL下调K562和K562/ADM细胞MRP1表达,但1.0μg/mL上调Hep3b/5-Fu细胞MRP1表达。Hep3b和K562非耐药株和耐药株的LRP基础表达无明显差异,Tet对LRP表达几无影响。4.研究了Tet对两类肿瘤细胞生长曲线、细胞周期和细胞存活率的影响,以及对ADM、5-Fu和cDDP抑制两类肿瘤细胞IC50的影响。发现0.33μg/mLTet加快进入指数生长期的肿瘤细胞凋亡,而对细胞周期无明显影响;0.33-1.0μg/mLTet单用对上述四种非耐药肿瘤细胞生长的抑制作用非常弱,对耐药细胞几无影响,甚至提高存活率。Tet对ADM、5-Fu、cDDP抑制肿瘤细胞的IC50影响呈双向性:0.33μg/mL明显提升ADM和cDDP对K562,cDDP对Hep3b/5-Fu及MG63/cDDP,以及cDDP和5-Fu对SKOV3细胞抑制的IC50;0.5μg/mL明显降低cDDP对K562、Hep3b/5-Fu和MG63/cDDP细胞抑制的IC50;1.0μg/mL明显降低cDDP对K562、Hep3b/5-Fu、SKOV3和MG63/cDDP,以及5-Fu对Hep3b/5-Fu、SKOV3细胞抑制的IC50。结论1. Tet静脉和灌胃给予家兔后,在家兔体内的过程均符合二室模型;灌胃给药后吸收少,排泄慢。2. Tet在家兔和大鼠体内的代谢慢,代谢产物至少有三种;代谢消除是汉防己碱在体内的主要消除方式。与大鼠相比,Tet在家兔体内的代谢及排泄较慢;主要经过肾脏和胆汁排泄。3.与P-gp和MRP1相比,Hep3b/5-Fu和K562/ADM细胞耐药性与LRP蛋白表达无明显关系。4.采用在家兔血液中能够达到的安全Tet浓度单用对肿瘤细胞的抑制作用很弱,与其他抗肿瘤药物合用时对非耐药和耐药肿瘤株的呈双向作用:低浓度倾向于诱导细胞耐药发展,高浓度有逆转肿瘤耐药作用。5.考虑到多数已报道的Tet抗肿瘤作用和逆转肿瘤耐药浓度远高于体内能够达到的Tet安全浓度,将Tet作为抗肿瘤药或肿瘤逆转剂的设想或企图值得商榷。
二、In vitro study of influence of raloxifene on the growth of human ovarian cancer cell line Skov 3（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、In vitro study of influence of raloxifene on the growth of human ovarian cancer cell line Skov 3（论文提纲范文）
（1）COX-2在动物卵泡发育过程中的研究进展（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 影响卵泡发育的因素 |
| 1.1 卵巢颗粒细胞的增殖分化与卵泡发育 |
| 1.2 颗粒细胞凋亡、氧化应激与卵泡闭锁 |
| 2 环氧合酶-2(COX-2)基因在卵泡发育中的作用 |
| 2.1 环氧合酶-2(COX-2)通过抑制细胞凋亡缓解卵泡闭锁 |
| 2.2 环氧合酶-2(COX-2)缓解ROS升高引起的细胞凋亡 |
| 2.3 环氧合酶-2(COX-2)在PI3K/AKT/NOTCH/Wnt通路上的研究 |
| 3 结语 |
（2）miRNAs调控抵抗素所致卵巢癌细胞顺铂耐药的机制研究（论文提纲范文）
| 前言 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 卵巢癌的综合治疗 |
| 1.1.1 卵巢癌的手术治疗 |
| 1.1.2 卵巢癌的化学治疗 |
| 1.1.3 卵巢癌的靶向治疗 |
| 1.1.4 卵巢癌的免疫治疗 |
| 1.1.5 卵巢癌的放射治疗 |
| 1.1.6 卵巢癌的激素治疗 |
| 1.2 卵巢癌细胞铂类耐药性产生的机制 |
| 1.2.1 DNA自我修复活性增强 |
| 1.2.2 细胞解毒功能增强 |
| 1.2.3 化疗药物在细胞内蓄积减少 |
| 1.2.4 细胞信号相关通路及因子异常 |
| 1.2.5 肿瘤微环境改变 |
| 1.3 抵抗素与肿瘤关系的研究进展 |
| 1.3.1 抵抗素的生物学性特性 |
| 1.3.2 抵抗素与肥胖 |
| 1.3.3 肥胖与肿瘤 |
| 1.3.4 抵抗素与肿瘤 |
| 1.4 miRNAs、EMT、肿瘤干细胞及耐药性的关系 |
| 1.4.1 肿瘤干细胞与EMT |
| 1.4.2 与EMT和CSCs相关的miRNAs |
| 1.4.3 EMT、CSCs与卵巢癌耐药性 |
| 1.5 立题依据 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验细胞 |
| 2.2 实验动物 |
| 2.3 实验仪器与设备 |
| 2.4 实验试剂 |
| 2.5 主要试剂的配制 |
| 2.6 实验方法 |
| 2.6.1 细胞复苏、传代与冻存 |
| 2.6.2 MTT细胞增殖实验 |
| 2.6.3 集落形成实验 |
| 2.6.4 细胞侵袭实验 |
| 2.6.5 ELISA检测表皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白本酶(MMP2) |
| 2.6.6 实时qRT-PCR(荧光定量)检测mRNA |
| 2.6.7 实时qRT-PCR检测miRNA |
| 2.6.8 细胞成球实验 |
| 2.6.9 转染 |
| 2.6.10 细胞总蛋白提取与定量 |
| 2.6.11 蛋白免疫印迹(Western blot) |
| 2.6.12 建立NOD/SCID卵巢癌荷瘤小鼠模型 |
| 2.7 统计学方法 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 抵抗素对卵巢癌细胞顺铂耐药的影响 |
| 3.1.1 抵抗素诱导卵巢癌细胞顺铂耐药 |
| 3.1.2 抵抗素诱导血管生成标记物VEGF和MMP2的分泌 |
| 3.2 抵抗素导致卵巢癌细胞耐药的作用 |
| 3.2.1 抵抗素可以剂量依赖的方式促进卵巢癌细胞生长 |
| 3.2.2 抵抗素可以时间依赖的方式促进卵巢癌细胞生长 |
| 3.2.3 抵抗素可促进卵巢癌细胞集落形成 |
| 3.2.4 抵抗素对卵巢癌细胞侵袭的影响 |
| 3.3 抵抗素诱导EMT标志物E-cadherin下调、vimentin和Zeb1上调 |
| 3.4 抵抗素诱导干性标记物sox2、oct4和nanog的mRNA转录增加 |
| 3.5 抵抗素导致卵巢癌细胞耐药的作用机制 |
| 3.5.1 体外实验探讨miRNAs调控抵抗素所致细胞生长和侵袭的作用 |
| 3.5.2 体内实验探讨miRNAs调控抵抗素诱导卵巢癌细胞增殖、侵袭的作用 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 攻读博士期间科研成果 |
| 致谢 |
（3）植物雌激素毛蕊异黄酮对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的肝脏保护作用及机制（论文提纲范文）
| 英文缩略词一览表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 2 实验材料 |
| 3 方法 |
| 3.1 动物的造模及给药方法 |
| 3.2 肝脏指数(%)测定 |
| 3.3 肝脏生化指标的检测 |
| 3.4 肝组织HE染色 |
| 3.5 肝组织Masson染色 |
| 3.6 免疫组化法检测肝组织中α-SMA及 ERβ的蛋白表达量 |
| 3.7 Quantitative real-time PCR测定肝组织中相关基因mRNA的表达 |
| 3.8 Western blot法检测肝组织中相关蛋白的表达 |
| 4 统计学分析 |
| 5 实验结果 |
| 5.1 毛蕊异黄酮对CCl4诱导的肝纤维化小鼠的一般情况和肝脏指数的影响 |
| 5.2 毛蕊异黄酮对CCl4诱导的肝纤维化小鼠生化指标的影响 |
| 5.3 小鼠肝脏病理学检测和病理评分 |
| 5.4 毛蕊异黄酮抑制CCl4诱导的肝纤维化小鼠肝脏α-SMA的表达 |
| 5.5 毛蕊异黄酮抑制CCl4诱导的肝纤维化小鼠肝脏胶原蛋白的表达 |
| 5.6 毛蕊异黄酮调节CCl4 诱导的肝纤维化小鼠肝组织MMP-1和TIMP-1的表达 |
| 5.7 毛蕊异黄酮调节CCl4诱导的肝纤维化小鼠肝组织雌激素受体的表达 |
| 5.8 毛蕊异黄酮激活CCl4诱导的肝纤维化小鼠肝组织JAK2-STAT3信号通路的表达 |
| 6 讨论 |
| 7 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 个人简历 |
| 致谢 |
| 综述 毛蕊异黄酮抗肿瘤作用及机制的研究进展 |
| 参考文献 |
（4）呋喃并[3,2-g]色满类化合物的合成及抗肿瘤活性研究（论文提纲范文）
| 1 前言 |
| 2 实验部分 |
| 2.1 合成路线 |
| 2.2 仪器和试剂 |
| 2.3 实验步骤 |
| 2.3.1 7-(4-甲氧基苯甲酰基氧基）色满（3）的合成 |
| 2.3.2 6-(4-甲氧基苯甲酰基）-7-羟基色满（4）的合成 |
| 2.3.3 2-苯甲酰基-3-(4-甲氧基苯基）呋喃并[3,2-g]色满（5a～5d）的合成 |
| 2.3.4 2-芳甲酰基-3-(4-羟基苯基）呋喃并[3,2-g]色满类化合物（6a～6d）的合成 |
| 2.3.5(2-(4-氯苯甲酰基）-3-{4-[2-（取代氨基）乙氧基]苯基}呋喃并[3,2-g]色满类化合物（7a～7f）的合成 |
| 3 体外抗肿瘤活性评价 |
| 4 结论 |
（5）大豆苷元磷脂复合物之固体分散体的制备及评价（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 DD-PLC的制备及表征 |
| 1 仪器与试药 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 DD-PLC的制备工艺及评价方法 |
| 2.2 DD-PLC的制备工艺研究 |
| 2.3 DD-PLC的物相鉴定 |
| 2.4 DD-PLC中 DD含量测定方法的建立 |
| 2.5 表观溶解度及油水分配系数的测定 |
| 2.6 体外溶出度的测定 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 第二章 DD-PLC-SD的制备及表征 |
| 1 仪器与试药 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 供试样品的制备 |
| 2.2 DD-PLC-SD中 DD含量测定方法的建立 |
| 2.3 DD-PLC-SD的处方筛选 |
| 2.4 DD-PLC-SD的物相鉴定 |
| 2.5 表观溶解度及油水分配系数的测定 |
| 2.6 体外溶出度的测定 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 第三章 外翻肠囊法研究DD-PLC-SD的肠吸收特性 |
| 1 仪器、试药及动物 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 溶液的制备 |
| 2.2 大鼠肠外翻模型的建立 |
| 2.3 肠吸收液中DD含量测定方法的建立 |
| 2.4 肠吸收试验及数据处理方法 |
| 2.5 各肠段的吸收速率常数Ka |
| 2.6 各肠段累积吸收量随时间的变化曲线 |
| 2.7 不同时间点的药物吸收率 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 第四章 DD-PLC-SD的药动学研究 |
| 1 仪器、试药及动物 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 血浆样品中DD含量测定方法的建立 |
| 2.2 药动学试验 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 全文结论 |
| 缩略语表 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章及科研情况 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（6）顺铂联合他莫昔芬对卵巢癌A2780细胞增殖及凋亡的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 研究对象 |
| 1.1.2 主要药品、试剂 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 MTT法检测DDP及TAM对人卵巢癌细胞株A2780抑制率 |
| 1.2.2 Hoechst染色检测A2780细胞凋亡 |
| 1.2.3 流式细胞术 (FCM) 检测细胞周期 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 不同药物浓度、不同作用时间时卵巢癌A2780细胞抑制率 |
| 2.1.1 不同药物浓度DDP对A2780细胞的抑制率 |
| 2.1.2 不同药物浓度TAM对A2780细胞的抑制率 |
| 2.2 DDP联合TAM对A2780细胞凋亡的形态学观察 (Hoechst染色×200) |
| 2.3 流式细胞术检测各组处理对A2780细胞周期的影响 |
| 3 讨论 |
（7）小白菊内酯及大黄素抑制肠腺癌细胞增殖作用机制的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 第一部分 小白菊内酯对HCT-8、HCT-8/VCR细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 统计学处埋 |
| 3 结果 |
| 3.1 PTL对HCT-8、HCT-8/VCR细胞的增殖抑制作用 |
| 3.2 PTL对HCT-8、HCT-8/VCR细胞凋亡的影响。 |
| 3.3 荧光染色检测PTL对HCT-8、HCT-8/VCR细胞凋亡的影响 |
| 3.4 Western-blot法检测PTL对HCT-8、HCT-8/VCR细胞Bax、Bcl-2蛋白表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二部分 小白菊内酯对HCT-8/VCR细胞耐药逆转作用及机制研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 统计学处埋 |
| 3 结果 |
| 3.1 MTT法检测PTL对HCT-8/VCR的耐药逆转作用 |
| 3.2 流式细胞仪(Annexin V-FITC/PI染色)检测PTL对HCT-8/VCR的耐药逆转作用 |
| 3.3 Western-blot法检测PTL对HCT-8/VCR细胞P-gp、MRP、GST-π蛋白表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三部分 大黄素通过调控PI3K/AKT信号通路诱导CACO-2凋亡的实验研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 统计学处埋 |
| 3 结果 |
| 3.1 大黄素对CACO-2细胞的增殖抑制作用 |
| 3.2 大黄素对CACO-2细胞凋亡的影响。 |
| 3.3 DAPI染色检测大黄素对CACO-2细胞凋亡的影响 |
| 3.4 流式细胞术检测大黄素对CACO-2细胞周期的影响 |
| 3.5 Western-blot法检测大黄素对CACO-2细胞Bax、Bcl-2、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 总结 |
| 本研究自我创新性评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 第一篇 结肠癌研究现状 |
| 1.1 结肠癌的流行病学研究现状 |
| 1.2 结肠癌的致病因素 |
| 1.3 结肠癌相关基因的研究进展 |
| 1.4 结肠癌的治疗 |
| 第二篇 肿瘤多药耐药逆转剂研究进展 |
| 2.1 化学药物逆转剂 |
| 2.2 基因治疗逆转剂 |
| 2.3 免疫逆转剂 |
| 2.4 中药逆转剂型 |
| 2.5 其它 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）卵巢癌雌激素治疗的研究进展（论文提纲范文）
| 1 雌激素与卵巢癌 |
| 2 雌激素受体与卵巢癌 |
| 3 抗雌激素药物与卵巢癌 |
| 4 总结与展望 |
（9）化学制剂分次给药对卵巢癌细胞种群恢复的影响及其在铂类耐药型复发卵巢癌患者中的疗效观察（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 顺铂联合紫杉醇分次给药抑制卵巢癌细胞 SKOV3 的种群恢复 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二部分 化疗制剂分次给药对复发性铂类耐药、难治性卵巢癌的疗效观察 |
| 1 资料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间的研究成果及发表的学术论文目录 |
（10）汉防已碱的药代动力学和抗肿瘤特性研究（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 汉防己碱的药代动力学研究 |
| 第一章 汉防己碱在家兔体内的代谢研究 |
| 1 实验材料 |
| 2. 方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 第二章 Tet 在大鼠体内的代谢研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 Tet 的抗肿瘤特性研究 |
| 第一章 Tet 对肝癌 Hep3b 细胞的作用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验内容 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第二章 Tet 对白血病K562 细胞的作用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验内容 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第三章 Tet 对人成骨肉瘤MG63 细胞的作用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验内容 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第四章 Tet 对卵巢癌SKOV3 细胞的作用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验内容 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 附图 |
| 文献综述 汉防己碱的药理作用及抗肿瘤活性研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
四、In vitro study of influence of raloxifene on the growth of human ovarian cancer cell line Skov 3（论文参考文献）
- [1]COX-2在动物卵泡发育过程中的研究进展[J]. 张琼文,张叁保,杨丽丽,高小童,刘笑笑,陈婷,江明生. 畜禽业, 2021(06)
- [2]miRNAs调控抵抗素所致卵巢癌细胞顺铂耐药的机制研究[D]. 邱玲. 吉林大学, 2021(01)
- [3]植物雌激素毛蕊异黄酮对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的肝脏保护作用及机制[D]. 张蒙蒙. 安徽医科大学, 2020(02)
- [4]呋喃并[3,2-g]色满类化合物的合成及抗肿瘤活性研究[J]. 徐晶,丁宁,冯健,谢倩,焦思蒙,王世辉,刘晓平,胡春. 精细化工中间体, 2020(01)
- [5]大豆苷元磷脂复合物之固体分散体的制备及评价[D]. 周桃. 内蒙古医科大学, 2019(03)
- [6]顺铂联合他莫昔芬对卵巢癌A2780细胞增殖及凋亡的影响[J]. 王成双,佐满珍. 实用医学杂志, 2018(19)
- [7]小白菊内酯及大黄素抑制肠腺癌细胞增殖作用机制的实验研究[D]. 马乾章. 中国医科大学, 2018(03)
- [8]卵巢癌雌激素治疗的研究进展[J]. 蓝宝珍,吴华. 深圳中西医结合杂志, 2018(07)
- [9]化学制剂分次给药对卵巢癌细胞种群恢复的影响及其在铂类耐药型复发卵巢癌患者中的疗效观察[D]. 何欢. 重庆医科大学, 2014(03)
- [10]汉防已碱的药代动力学和抗肿瘤特性研究[D]. 蒋心惠. 重庆医科大学, 2011(11)