一、单精子卵细胞浆内注射术治疗男性不育症的新进展(论文文献综述)
杨雪梅[1](2020)在《强精片对弱精子症大鼠精子线粒体功能影响的实验研究》文中指出目的:通过观察强精片对奥硝唑所致的弱精子症SD大鼠精子线粒体膜蛋白PHB表达、膜电位MMP水平和精子早期凋亡率的影响,深入探讨强精片对精子线粒体功能的影响及改善弱精子症大鼠精子活力的作用机制,为进一步揭示强精片的作用原理提供科学依据。方法:取50只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为强精片高剂量组、强精片中剂量组、强精片低剂量组、模型组和空白组,每组10只。各实验组分别给予0.02g/ml浓度的奥硝唑混悬液1ml/(100g·d)灌胃,空白组给予1%羧甲基纤维素钠溶液1ml/(100g·d)灌胃,连续3周灌胃构建大鼠弱精子症模型。第4周开始,强精片高、中、低剂量组在灌胃奥硝唑混悬液前分别予以浓度为0.67g/ml、0.33g/ml、0.17g/ml的强精片混悬液1ml/(100g·d)灌胃,连续3周。整个实验过程中大鼠无死亡情况发生。于末次灌胃24h后,用25%乌拉坦腹腔注射麻醉成功后,打开腹腔,快速剥离双侧大鼠睾丸、附睾,留取附睾后断头处死大鼠。采用计算机精子质量检测系统进行精液常规分析(精子活力、密度);Westem blot免疫印迹实验检测附睾精子线粒体膜蛋白PHB相对表达量;JC-1单标法检测精子线粒体膜电位MMP水平;流式细胞术检测精子的早期凋亡率。结果:(1)与空白组对比,模型组的A级、B级精子百分比、精子活力(A+B级精子百分比)以及精子密度较空白组表现出明显下降,有统计学差异(P<0.05);与模型组对比,强精片低剂量组的B级精子百分比、精子活力和强精片中、高剂量组的A级、B级精子百分比及精子活力较模型组显着改善,有统计学差异(P<0.05),但强精片低、中、高剂量组的精子密度改善程度无统计学差异(P>0.05)。(2)与空白组对比,模型组的PHB表达量明显减少,有统计学差异(P<0.05);与模型组对比,强精片低、中、高剂量组PHB表达显着增加,有统计学差异(P<0.05),并随着强精片剂量增加,PHB表达量越高。(3)与空白组对比,模型组MMP水平显着下降,有统计学差异(P<0.01);与模型组比较,强精片中、高剂量组的MMP明显恢复,有统计学差异(P<0.05),而强精片低剂量组的M MP未见明显恢复,无统计学差异(P>0.05)。(4)与空白组对比,模型组精子早期凋亡率明显降低,有统计学差异(P<0.01);与模型组对比,强精片中、高剂量组的精子早期凋亡率明显降低,有统计学差异(P<0.05),而强精片低剂量组的精子早期凋亡率未见明显降低,无统计学差异(P>0.05)。结论:强精片能明显改善奥硝唑所致的弱精子症大鼠的精子活力,其分子生物学机制可能是通过提高精子线粒体膜蛋白PHB表达量,稳定线粒体膜电位M MP水平、减少精子早期凋亡率,进而改善精子线粒体功能,恢复精子运动能力,达到治疗弱精子症的目的。
余文华[2](2020)在《Y染色体上DBY基因在无精子症患者睾丸组织中的缺失研究》文中认为目的Y染色体上无精子因子(AZF)微缺失约占男性不育症病因的10%,是导致男性不育的主要原因之一。AZF是男性具备生精功能的主要条件;其缺失会导致生精功能障碍,临床上主要表现为少精子症和无精子症。AZFa出现微缺失的概率较AZFb、AZFc小,其一旦出现缺失则会造成后果严重。DBY基因是Y染色体上AZFa区域中主要候选基因之一。本研究通过PCR方法检测Y染色体上DBY基因在无精子症患者睾丸组织中的缺失情况,探讨Y染色体微缺失与男性不育症临床表现的关系,为男性不育症的临床诊断和治疗提供理论基础。方法收集2017年12月至2019年10月就诊于甘肃省第二人民医院及甘肃省人民医院无精子症患者无精子症患者41例(后经检测发现6例染色体核型异常,其中2例为克氏综合征)为实验组;34例少精子症患者为阳性对照组。正常生育力的就诊于甘肃省第二人民医院及甘肃省人民医院的睾丸外伤患者25例为阴性对照组。实验通过伦理委员会和患者的同意。实验组和对照组在局麻下用穿刺活检针穿刺两侧睾丸约5mm大小的组织,将组织分为2mm和3mm两块;2mm的睾丸组织作常规病理检查;3mm睾丸组织提取DNA用于PCR扩增。以性别决定基因(SRY基因)引物为内控对照,采用PCR法扩增DBY基因。实验结果采用四格表的Fisher确切概率法进行统计学分析。结果实验组及对照组的睾丸组织标本均可以扩增出SRY条带,这表明睾丸组织提取的DNA模板与实验要求相符。25例对照组所有基因位点均可见扩增条带,说明没有DBY基因的缺失。35例无精子症患者中5例未发现DBY基因扩增条带,表明有DBY基因的缺失,占无精子症患者的14.3%(5/35)。无精子症患者和阴性对照组DBY基因缺失统计学分析P<0.05(P=0.048),表明DBY基因在无精子症患者和阴性对照组中的缺失具有统计学意义。5例微缺失患者睾丸组织活检病理均表现为Ⅰ型唯支持细胞综合征(SCOSⅠ);符合DBY基因微缺失的睾丸病理学上改变,这表明DBY基因和精子生成关系紧密,进一步证实DBY基因和睾丸精子发生可能相关。结论1.研究发现DBY基因在无精子症患者中出现缺失,而阳性对照组和阴性对照组中无缺失,说明DBY基因与无精子症关系密切,DBY基因可能在精子发生过程中具有重要作用,其缺失可能会导致无精子症,进而引起男性不育。本研究中34例少精子症患者中没有检测到DBY基因缺失,可能与标本数量、位点选择、种族和地区差异等有关。2.DBY基因微缺失引起的无精子症患者在患者自愿情况下可以进行供精人工授精助孕实;或者从根本上找出病因对相关基因敲除或导入。3.对男性不育患者,可以对患者进行Y染色体的检测的同时行睾丸活组织检查来明确不育症的病因,可以避免一些不必要的治疗,减轻患者精神上的压力和经济上的负担。
孙松[3](2018)在《左归丸治疗肾阴不足型男性不育少弱精子症的临床和实验研究》文中研究表明目的:男性不育症的发病率逐年升高,其中以少弱精子症居多。西医治疗本病存在一定的局限性,疗效欠佳,中医药在男性不育的防治方面经验丰富。前期研究发现,左归丸可明显抑制生精细胞凋亡、促进生精细胞增殖。本研究旨在进一步评价左归丸治疗肾阴不足型少弱精子症的临床疗效并深入探讨其抗凋亡、促增殖分化的机制。方法:临床研究:采用无病例对照研究,纳入符合标准的肾阴不足型男性不育少弱精子症患者,记录患者的一般资料、症状、体征、治疗史及合并疾病等情况,进行中医证候评分并记录。44例患者均予以左归丸配方颗粒口服,治疗周期为90天,治疗30天后、治疗60天后以及治疗90天后,分别记录每个患者的中医证候评分,详细记录患者在用药期间的各种不良反应。治疗前及治疗90天后分别检测精子质量(一周内连续检测2次,选择精子总数较多的结果进行记录)。观察左归丸治疗肾阴不足型少弱精子症的临床疗效,以及其对患者精液量、精子浓度、精子总数、前向运动精子百分率、精子总活力的影响和对中医证候总评分、肾阴不足相关症状评分的改善情况。实验研究:1.60只雄性SD大鼠,随机分为空白对照组20只,造模组40只。空白对照组采用去离子水干预4周,造模组采用40mg/(Kg·d)的雷公藤多苷(GTW)干预4周,每组随机抽取4只大鼠进行模型验证。造模成功后空白对照组大鼠中随机选取12只,做为空白对照组,GTW造模组中随机选取24只,按随机数字表法分为GTW模型组和左归丸组,每组12只。空白对照组和GTW模型组采用去离子水灌胃,左归丸组采用6g/(Kg·d)的左归丸进行灌胃干预,干预4周;2.观察左归丸对生精障碍大鼠模型的精子质量、性激素水平、睾丸病理形态学、睾丸组织超微结构的影响;3.采用Western blot以及Real-Time PCR技术,对大鼠睾丸组织进行c-kit、Oct4蛋白及mRNA表达检测。结果:临床研究:经左归丸治疗后,44例患者的精液量与治疗前相比明显增多,有统计学差异(P<0.05),精子总活动力、前向运动精子百分率、精子浓度、精子总数等指标与治疗前比较均有显着提高(P<0.01);中医证候总评分、肾阴不足相关症状评分随治疗时间的增加呈下降趋势,治疗前后差异均有统计学意义。临床总有效率高达93.18%。所有患者在研究过程中均未见不良反应。实验研究:1.左归丸组与GTW模型组比较,大鼠一般状态明显好转,睾丸组织脏器系数提高,差异有统计学意义,P<0.05,左归丸组附睾组织脏器系数与GTW模型组比较差异显着,P<0.01;左归丸组精子浓度、总活率、前向运动精子百分率均高于GTW模型组,差异有统计学意义,P<0.01;左归丸组病理组织损伤情况较GTW模型组有所改善,管腔明显扩大,内含精子增多,部分生精管恢复正常。左归丸组睾丸生精上皮超微结构损伤明显恢复,与空白对照组近似,生精细胞形态、结构完整,可见少量变性的细胞器,线粒体增多,可见精子及高尔基体。2.左归丸组FSH、E2、LH含量显着高于GTW模型组,P<0.01,与空白对照组比较无差异,P>0.05;左归丸组PRL水平明显高于其余两组,且均有显着差异,P<0.01。左归丸组T含量较GTW模型组有改善,有统计学差异,P<0.05,但较空白对照组无统计学差异,P>0.05。3.Westernblot检测中,各组大鼠睾丸组织c-kit、Oct4蛋白表达结果相互比较,均未见明显差异(P>0.05),但均呈左归丸组>空白对照组>GTW模型组的表达强弱趋势。4.Real-TimePCR检测中,左归丸组、GTW模型组与空白对照组相比,c-kitmRNA的表达量均明显降低,P<0.05;左归丸组表达水平明显高于GTW模型组,P<0.01,有统计学意义;GTW模型组Oct4 mRNA的表达明显低于空白对照组,P<0.01;左归丸组与GTW模型组相比,Oct4 mRNA的表达量显着提高(P<0.01),但与空白对照组表达水平无差异(P>0.05)。结论:1.左归丸能安全有效的提高肾阴不足型不育少精子症患者的精子质量,改善中医证候评分。2.左归丸可显着改善模型大鼠一般状态,显着提高睾丸、附睾脏器系数,提高精子质量,改善性激素水平及睾丸组织结构及超微结构损伤情况。3.左归丸具有抑制生精障碍模型大鼠生精细胞凋亡,并促进其增殖的作用,具体机制可能与通过调控生精细胞上干细胞因子受体c-kit蛋白及mRNA的表达,一定程度上增加Oct4蛋白及mRNA的表达有关。综上所述,左归丸治疗肾阴不足型不育少弱精子症临床疗效确切,其具体作用机制可能是通过调控c-kit、Oct4蛋白及mRNA的表达,从而抑制凋亡,促进增殖。
王丽伟[4](2017)在《针灸干预男性不育症研究的共词聚类分析》文中研究指明目的:利用共词分析法探究针灸干预男性不育症研究现状及热点领域。方法:按策略检索中国知网(CNKI)、万方医学数据库(WanFangData)、中文期刊数据库(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)自建库至2017年2月15日的针灸干预男性不育症文献,运用NoteExp.ress剔除无关文献,采用书目共线分析系统(Biocmb)统计关键词频次,根据g指数确定高频关键词数量,使用Bibexcel构建共词矩阵,导入SPSS22.0进行因子分析、多维尺度分析和聚类分析。结果:共纳入文献140篇,涉及关键词146个、使用703次,选取高频关键词24个。因子分析显示抽取6个公因子比较合适。即公因子1主要为男性不育症、精液常规参数、少弱精子症、针刺等;公因子2主要为性激素、精浆超氧化物歧化酶、针挑等;公因子3主要为抗精子抗体、免疫性不育症等;公因子4主要为不射精症、肾虚等;公因子5主要为肾阳虚、穴位注射、中医临床症状;公因子6主要为精液异常、精索静脉曲张等。聚类分析分为6类。即第1类:"免疫性不育症"、"抗精子抗体";第2类:"针灸"、"文献综述";第3类:"男性不育症"、"精液常规参数"、"少弱精子症"、"针刺"、"中药";第4类:"性激素"、"精浆超氧化物歧化酶"、"针挑"、"精索静脉曲张";第5类:"穴位注射"、"肾阳虚"、"中医临床症状";第6类可聚成3小类,"精液异常"、"电针"、"雄性大鼠"聚成1小类,"五子衍宗丸"、"临床研究"聚成1小类,"不射精症"、"辨证论治"、"肾虚"聚成1小类。结论:1.针灸干预男性不育症研究已形成精液异常、精索静脉曲张、性功能障碍3个热点领域;2.针灸干预男性不育症研究呈现少弱精子症研究备受关注、热点有限多元、研究不够深入等学科特征;3.针灸干预男性不育症研究尚有免疫性不育、生殖道感染性不育、不育症动物实验研究等潜力领域值得探讨。
何泳志[5](2016)在《左卡尼汀对梗阻性无精子症患者经PESA取精行ICSI的临床研究》文中研究指明目的:本研究探讨左卡尼汀在临床上对梗阻性无精子症(obstructive azoospermia,OA)患者进行干预后行卵胞浆内单精子注射术(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)助孕的结局影响。方法:回顾性分析2015年1月-2015年11月来我院生殖中心就诊的136例梗阻性无精子症患者,其中应用左卡尼汀口服液(东维力,东北制药,1.0g,po.bid)治疗的OA患者71例(试验组),不口服任何药物OA患者65例(对照组)。三个月后所有入选患者在女方采卵当天均行经皮附睾精子抽吸术(percutaneus epididymal sperm aspiration,PESA)取精,并行ICSI助孕。检测并比较两组OA患者的精子DNA完整率、精子顶体完整率及精子自发顶体反应率;最终观察两组患者ICSI周期的受精率、卵裂率、优胚率及妊娠率为结局指标。结果:(1)两组OA患者年龄、睾酮量、FSH值、不育年限、睾丸体积及女方年龄、采卵数等一般情况无显着差异(P>0.05)。(2)试验组患者精子DNA完整率及精子顶体完整率高于对照组,试验组患者精子顶体自发反应率显着低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)试验组患者治疗后精子DNA完整率及精子顶体完整率显着高于治疗前,试验组患者治疗后精子顶体自发反应率低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)对照组患者3个月前后精子DNA完整率、精子顶体完整率及精子顶体自发反应率无显着差异(P>0.05)。(5)试验组患者ICSI周期中受精率及优胚率显着高于对照组患者,差异有统计学意义(P<0.05);卵裂率及妊娠率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)左卡尼汀可以有效提高梗阻性无精子症患者精子功能质量包括精子DNA完整率、精子顶体完整率,并降低精子顶体自发反应率。(2)左卡尼汀有利于梗阻性无精子症患者ICSI周期的受精率、优胚率,将有利于ICSI周期的最终结局。
李忠远[6](2013)在《高压氧对精索静脉曲张大鼠睾丸组织NOS和NO的实验研究》文中认为第一部分两种精索静脉曲张大鼠模型建立方法的比较目的探讨两种大鼠精索静脉曲张(VC)模型的制备方法,进行优良比较,以选择更为合适的造模方法。方法青春期SD大鼠90只,随机分为3组。经典法(A组,30只)部分结扎左肾静脉;改进法(B组,30只)部分结扎左肾静脉后,加扎左侧精索静脉与左髂总静脉之间的交通支;假手术对照(C组,30只)只分离左肾静脉不结扎。比较3组动物建模的手术时间,术后4周、8周的精索静脉直径及成功率。结果B组每只大鼠手术时间为(22.5±3.4)min,较A组(9.2±2.3)min、C组(7.5±1.2)min明显增加(P<0.05); A组4周左侧精索静脉直径为(0.86±0.12)mm、8周为(0.91±0.11)mm,与B组4周(0.85±0.12)mm、8周(0.92±0.12)mm比较无统计学差异(P>0.01),比C组有明显扩张(P<0.01);A组4周组成功率为70.59%,较B组4周组(成功率90.91%)低(P<0.05)。结论两种方法均能成功建立VC大鼠模型;改进法前期手术过程复杂,术后短期内建模成功率较高。第二部分高压氧对精索静脉曲张大鼠睾丸组织NOS和NO的实验研究目的探讨精索静脉曲张(VC)大鼠睾丸组织NOS(一氧化氮合酶)和NO(一氧化氮)含量变化及高压氧(HBO)的干预效果。方法50只7周龄雄性SD大鼠,随机抽取10只为假手术对照组(A),其余40只部分结扎左肾静脉建立VC模型,8周后,再将40只大鼠随机分为VC模型组(B)和HBO干预的VC模型组(C),C组用HBO对VC大鼠进行干预。实验结束后分别测定3组大鼠睾丸组织NOS及NO的含量。结果B组左侧睾丸NOS、NO含量分别显着高于A和C组(P<0.01);3组右侧睾丸NOS、NO含量比较无统计学意义(P>0.05)。结论VC时睾丸NOS和NO的变化,是造成睾丸损伤、生精障碍的原因之一,高压氧可能通过调节NOS、NO的表达来改善VC所致的生精功能障碍。
王旭初[7](2012)在《男性不育与精核蛋白的关系及中西医治疗进展》文中进行了进一步梳理据世界卫生组织预测,21世纪不孕不育将成为仅次于肿瘤和心脑血管病的第三大疾病。男性不育问题是不孕不育症治疗中的难题,其诊治成为一个迫切需要规范化和深入研究的问题[1]。近年来,采用细胞遗传学、免疫学、生殖内分泌学、精液细胞学、分子生物学
胡鹏[8](2012)在《影响ICSI妊娠结局的相关因素研究》文中提出背景当今社会,加快的生活节奏、经济增长带来的环境污染、不良的生活习惯、工作生活的巨大压力给男性的生殖健康造成了很大的威胁。调查研究显示,现在男性的生殖能力在逐年下降,男性不育的发病率也较以前明显增高。男性不育不仅会引起家庭的不和睦,而且也会引起社会的不和谐。无精子症及少弱畸精子症是男性不育的主要原因。针对于男性不育,药物治疗不但效果不佳,而且会延误病情,使患者错过最好的治疗时机。随着1978年世界首例试管婴儿的诞生,标志着第一代试管婴儿技术—体外受精-胚胎移植(IVF)的成熟,是人类对于生殖生理认识的一个大的飞跃。这给男性不育患者带来了成为生物学父亲的希望。然而常规的IVF对于女性的不孕效果显着,但对于无精子症以及严重少弱精子症的患者效果不佳。随着辅助生殖技术的发展,1992年Plermo等报道了使用显微注射技术将精子注入卵子使之受精的首例试管婴儿诞生,使得第二代试管婴儿技术—卵胞浆内单精子注射术(ICSI)应运而生。ICSI技术的关键在于通过显微操作使得一条活的精子直接进入成熟卵细胞中,因为没有卵子的自然选择作用,所以对于密度低、活动力较差的活的精子都有机会与卵子结合成为受精卵。ICSI主要适用于梗阻性无精子症、严重少弱精子症、非梗阻性无精子症、取精障碍、IVF失败的患者。ICSI所需的精子主要来源于体外射精、睾丸精子、附睾精子。目前针对三种不同来源的精子、不同的精子参数对ICSI妊娠结局的影响,国内外有许多学者进行了大量的研究,但是仍未有一个明确的定论。针对取精障碍的研究,虽然国内外也有一些学者进行研究,但是都是个案病例报告,未进行过统计学意义上的研究分析。目的分析辅助生殖治疗过程中不同来源的精子、不同的精子参数以及取卵日手淫取精失败改行手术取精(PESA/TESA)对于行卵泡浆内单精子注射术(ICSI)妊娠结局的影响。资料和方法根据卫生部规定的进行ICSI治疗的条件以及纳入标准和排除标准选取自2007年1月至2010年7月因男性不育在我院生殖辅助中心进行ICSI的患者1125对。根据不同的精子来源将1125对患者分为两组:手术取精(PESA/TESA)组294对;非手术取精组831对。在非手术取精组中,根据不同的精子参数分为两组:轻、中度少弱精子组,共265对;重度少弱精子组,共132对。在手术取精组,根据不同病因分为:取卵日手淫取精失败组,共25对;梗阻性无精子症组,共215对。比较不同分组之间的ICSI妊娠的结局:受精率、卵裂率、优胚率、种植率、临床妊娠率、流产率、早产率、活产率、畸形率等。结果采用统计学分析,计量资料采用均数±标准差来表示,两组间计量资料的比较使用两独立样本t检验,两组间计数资料(构成比)比较使用卡方检验或Fisher精确概率检验。P﹤0.05认为差异具有统计学意义。结果1、手术取精组与非手术取精组:两组的患者的基本资料:女方年龄、不孕年限,Gn的天数、Gn的总量差无统计学意义(P>0.05)。两组的妊娠结局:卵裂率、优胚率、种植率、临床妊娠率、单胎率、双胎率、流产率、早产率、出生男胎率、低体重胎儿发生率两组相比差异无统计学意义(P>0.05)。而两组的卵裂率相比差异有明显统计学意义(P=0.009<0.05)。两组的畸形率分别为0和0.96%,在体外射精组总共有3例畸形儿出生,1例为先天性心脏病、唐氏综合症,1例为21-三体综合症,1例为先天性心脏病。2、轻中度少弱精子组与重度少弱精子组两组的患者的基本资料:女方年龄、不孕年限、Gn的总量以及Gn的天数两组之间相比差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者的妊娠情况:受精率、卵裂率、优胚率、种植率、临床妊娠率、流产率、早产率、活产率两组相比差异无统计学意义。两组的畸形率分别为2.8%和0,在轻中度少精子组的出生胎儿中有3例畸形胎儿,1例为先天性心脏病、唐氏综合症,1例为21-三体综合症,1例为先天性心脏病。3、各种因素手淫取精失败而行手术取精组与梗阻性无精子症(OA)行手术取精组两组患者的基本情况:女方年龄、不孕年限、Gn的总量以及Gn的天数两组之间相比差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者的妊娠情况:受精率、卵裂率、种植率、临床妊娠率、流产率、活产率两组之间相比差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者的优胚率相比差异有明显统计学意义(P=0.032<0.05)。两组的畸形率都为0。结论(1)、附睾/睾丸精子、体外射精的精子ICSI的助孕结局相似;说明精子的成熟度对于ICSI的妊娠结局影响不大。(2)、不同参数的射出精子对ICSI的妊娠结局无明显影响;(3)、取卵日因各种因素导致手淫取精失败而改行手术取精(ICSI)进行ICSI与梗阻性无精子症组行手术取精进行ICSI妊娠结局相似。说明取卵日手淫取精失败进行PESA/TESA及时干预是一种有效的方法,可以避免错失治疗的最佳时机。(4)、精神心理因素对于ICSI的妊娠结局有一定的影响,它会造成受精率、卵裂率、优胚率、种植率以及临床妊娠率降低。
段恒[9](2010)在《补肾中药对卵细胞体外成熟的影响》文中认为目的探讨含补肾中药鼠血清对小鼠卵细胞体外成熟的影响及其机制。方法未成熟卵细胞来自孕马血清促性腺激素(PMSG)刺激后的90只ICR小鼠的卵巢。将收集的小鼠卵丘细胞-卵母细胞复合体(COCs)245个随机分为含补肾中药鼠血清1#、2#、3#组、空白鼠血清组、空白组,分别置入添加了2%含补肾中药鼠血清1#、2#、3#、2%空白鼠血清及未添加鼠血清的M199培养液中,采用微滴法培养24h,体视显微镜和倒置显微镜观察并计算小鼠卵细胞体外第一极体(PB1)排出率即成熟率。将COCs约238个随机分为含药鼠血清1#组、卵泡刺激素(FSH)组、空白鼠血清组、空白组,分别置入添加了2%含药鼠血清1#、100IU/L FSH、2%空白鼠血清及未添加鼠血清的M199培养液中,显微镜观察并计算小鼠卵细胞体外成熟率、受精率及卵裂率,实验重复3次。将COCs随机分为含药鼠血清1#组、卵泡刺激素(FSH)组、空白鼠血清组、空白组,免疫荧光标记法结合反射荧光显微镜观察细胞骨架指标(纺锤体、染色体),及成熟促进因子(MPF)调节亚基周期蛋白B(CyclinB)的表达;荧光检测仪定量分析Cyclin B1的表达强度。将COCs随机分为含药鼠血清1#组、空白鼠血清组,半定量RT-PCR检测卯母细胞MPF调节亚基Cyclin Bl mRNA的表达。采用酶联免疫法测定含药鼠血清1#、2#、3#与空白鼠血清FSH和雌二醇(E2)水平。结果1.含药鼠血清1#、2#组均较空白组卵细胞成熟率明显增高(42.31%、36.17% vs 16.67%,分别P<0.01、P<0.05);含药鼠血清1#组较空白鼠血清组卵细胞成熟率明显增高(42.31% vs 22.92%,P<0.05);含药鼠血清1#组较空白组生发泡破裂和第一极体(GVBD+PBl)出现率明显增高(84.62% vs 66.67%,P<0.05);含药鼠血清各组之间GVBD+PBl和成熟率比较,无显着性差异。2.FSH组、含药鼠血清1#组均较空白组卵细胞成熟率明显增高(33.69%、40.98% vs 17.71%,P<0.01):FSH组、含药鼠血清1#组均较空白鼠血清组卵细胞成熟率明显增高(33.69%、40.98% vs 22.81%,分别P<0.05、P<0.01);FSH组、含药鼠血清1#组均较空白组GVBD+PBl明显增高(80.75%、83.61% vs 64.00%,P<0.01):FSH组、含药鼠血清1#组均较空白鼠血清组GVBD+PBl明显增高(80.75%、83.61% vs 71.35%,分别P<0.05、P<0.01);FSH组与含药鼠血清1#组GVBD+PBl和成熟率比较,无显着性差异;各组之间受精率及卵裂率总体上无明显差异。3次重复实验分次结果显示基本一致。FSH组、含药鼠血清1#组均较空白组卵细胞成熟率明显增高,分别P<0.05、P<0.05或P<0.01;含药鼠血清1#组均较空白血清组卵细胞成熟率明显增高,P<0.05;FSH组、含药鼠血清1#组均较空白组GVBD+PBl明显增高,分别P<0.05、P<0.05或P<0.01;FSH与含药鼠血清1#组GVBD+PBl和成熟率比较,无显着性差异。3.FSH、含药鼠血清1#组CyclinBl的荧光强度较空白组、空白鼠血清组明显增强(15069.00±3908.88、17936.50±4717.42 vs 5029.50±1656.61、6625.33±1777.41,P<0.01);FSH与含药鼠血清1#组比较,无显着性差异。含药鼠血清1#组Cyclin Bl mRNA的表达(Cyclin Bl/GAPDH=2.78)较空白鼠血清组(Cyclin Bl/GAPDH=2)增强。空白组、空白鼠血清组、FSH组、含药鼠血清1#组卵子骨架各组之间比较,无显着性差异。含药鼠血清1#、2#、3#组血清FSH和E2水平均较空白鼠血清组高,无显着性差异。结论含补肾中药鼠血.清1#体外可以促进小鼠未成熟卵细胞生长发育,主要是促进卵细胞核成熟,并且不增加成熟卵细胞细胞骨架的异常几率。其机制与增强卵细胞成熟促进因子调节亚基Cvclin Bl的表达有关。
刘建国[10](2010)在《补肾调周法在辅助生殖技术中的作用及临床干预研究》文中进行了进一步梳理目的:研究补肾调周法对拟行辅助生殖技术周期患者治疗的可行性和有效性。通过研究补肾调周法对于拟行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)或单精子卵泡浆注射(ICSI)与冻胚移植(FET)患者干预的疗效分析,评价补肾调周法对于拟行IVF/ICSI-ET或FET的患者临床干预的价值。探讨补肾调周法在辅助生殖各个环节的作用机理,并研究中药保胎的可能机制。从中医角度为拟行IVF/ICSI-ET或FET患者提供可行性建议,增加IVF/ICSI-ET或FET的成功率,给本病的诊治提供新的方法,为临床治疗本病提供帮助。方法:将拟行辅助生殖技术的患者,根据其选择辅助生殖技术的方式分为两个大组,一大组为拟行鲜胚移植周期的患者,另一大组为拟行冻胚移植周期的患者。鲜胚移植周期组:将160例拟行IVF/ICSI-ET的患者随机分为干预组(80例)和对照组(80例),对照组采用江苏省人民医院生殖中心常规的进IVF/ICSI-ET周期方案,干预组在对照组的治疗基础上运用补肾调周法对其进行中药治疗,观察两组患者子宫内膜厚度、计算取卵数、观察受精率、计算优质胚胎率、生化妊娠率和临床妊娠率。冻胚移植周期组:将160例拟行冻胚移植周期(FET)的患者随机分为干预组(80例)和对照组(80例),对照组采用江苏省人民医院生殖中心常规进FET周期方案,干预组在对照组的治疗基础上运用补肾调周法对其进行中药治疗,观察两组患者子宫内膜厚度,统计生化妊娠率和临床妊娠率。结果:干预组患者在子宫内膜厚度、取卵数、受精率、优质胚胎率、生化妊娠率和临床妊娠率均有显着性统计学差异,其中鲜胚移植周期组:干预组可以极显着提高患者子宫内膜的厚度(P<0.01);而且在提高取卵数、受精率、优质胚胎率及最终提高临床妊娠率方面均优于对照组(P<0.05)。冻胚移植周期组:治疗组可以极显着提高患者子宫内膜的厚度(P<0.01);而且在提高患者生化妊娠率及最终提高临床妊娠率方面均优于对照组(P<0.05)。结论:补肾调周法可以促进患者排卵数、增加子宫内膜内膜厚度、提高受精率及优质胚胎率、辅助胚胎着床,进行安胎,提高其临床妊娠率。因此补肾调周法配合辅助生殖技术进周期方案,可明显提高患者的辅助生殖妊娠率,具有良好的经济和社会价值。
二、单精子卵细胞浆内注射术治疗男性不育症的新进展(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、单精子卵细胞浆内注射术治疗男性不育症的新进展(论文提纲范文)
(1)强精片对弱精子症大鼠精子线粒体功能影响的实验研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
中英文缩略词 |
前言 |
1.实验部分 |
1.1 实验材料 |
1.2 实验方法 |
1.3 统计学处理 |
1.4 实验结果 |
2.讨论部分 |
2.1 弱精子症的西医认识 |
2.2 弱精子症的中医认识 |
2.3 .线粒体功能与精子质量 |
2.4 强精片组方分析和前期研究基础 |
2.5 补肾活血法治疗弱精子症的理论依据 |
2.6 奥硝唑构建弱精子症大鼠模型分析 |
2.7 强精片对弱精子症大鼠精子线粒体功能的作用分析 |
结语 |
1.结论 |
2.创新点 |
3.问题与展望 |
致谢 |
参考文献 |
附录 |
附录一 :综述 线粒体对精子活力影响的研究进展 |
参考文献 |
附录二 :随机数字表 |
在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
(2)Y染色体上DBY基因在无精子症患者睾丸组织中的缺失研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
中英文缩略词表 |
前言 |
第一章 资料与方法 |
1.1 研究资料 |
1.1.1 研究对象 |
1.1.2 纳入标准 |
1.1.3 排除标准 |
1.2 实验仪器和实验试剂 |
1.2.1 主要实验仪器 |
1.2.2 主要实验试剂 |
1.2.3 主要实验试剂的配制 |
1.3 G显带染色体分析 |
1.4 睾丸组织Y染色体基因检测 |
1.4.1 睾丸穿刺及病理检查 |
1.4.2 睾丸组织DNA的提取(酚-氯仿法) |
1.4.3 紫外分光光度计测定DNA浓度 |
1.4.4 单独扩增PCR反应体系 |
1.4.5 多重PCR扩增反应体系 |
1.4.6 琼脂糖凝胶电泳法检测PCR扩增产物 |
1.5 PCR扩增结果判断 |
1.6 统计学方法 |
第二章 结果 |
第三章 讨论 |
第四章 结论 |
附表及附图 |
参考文献 |
综述 |
综述参考文献 |
附录 |
致谢 |
(3)左归丸治疗肾阴不足型男性不育少弱精子症的临床和实验研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
英文缩略词 |
第一部分 文献综述 |
综述一 男性不育症中医药研究进展 |
参考文献 |
综述二 男性不育西医研究进展 |
参考文献 |
第二部分 临床研究 左归丸治疗肾阴不足型男性不育少弱精子症的临床观察 |
前言 |
对象与方法 |
结果 |
讨论 |
参考文献 |
第三部分 实验研究 |
实验一 左归丸对生精障碍型大鼠模型的药效学研究 |
前言 |
材料与方法 |
结果 |
讨论 |
参考文献 |
实验二 左归丸对生精障碍大鼠模型促增殖分化蛋白c-kit、Oct4表达的影响 |
前言 |
材料与方法 |
结果 |
讨论 |
参考文献 |
结语 |
创新与不足 |
致谢 |
在学期间主要研究成果 |
(4)针灸干预男性不育症研究的共词聚类分析(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
引言 |
第一章 理论研究 |
1.1 西医学对男性不育症的认识 |
1.1.1 影响因素 |
1.1.2 疾病分类 |
1.1.3 治疗 |
1.2 中医学对男性不育症的认识 |
1.2.1 病名 |
1.2.2 历代论述 |
1.2.3 病因病机 |
1.2.4 不育症与体质 |
1.2.5 现代中医对男性不育症的治疗概况 |
1.3 共词分析法的应用 |
1.3.1 共词分析法概述 |
1.3.2 国外共词分析法研究现状 |
1.3.3 国内共词分析法研究现状 |
第二章 数据准备 |
2.1 文献收集 |
2.1.1 文献来源 |
2.1.2 检索策略 |
2.1.3 纳入标准 |
2.1.4 排除标准 |
2.2 数据处理 |
第三章 针灸干预男性不育症的共词聚类分析 |
3.1 研究方法及工具 |
3.2 研究过程 |
3.2.1 关键词的获取和规范 |
3.2.2 确定高频关键词 |
3.2.3 构建关键词相关矩阵 |
3.2.4 数据结果及分析 |
3.3 分析与讨论 |
3.3.1 针灸干预精索静脉曲张性不育研究 |
3.3.2 针灸干预精液异常性不育研究 |
3.3.3 针灸干预免疫性不育研究 |
3.3.4 针灸干预性功能障碍性不育研究 |
3.3.5 针灸干预生殖道感染性不育研究 |
3.3.6 针灸干预男性不育症动物实验研究 |
结语 |
参考文献 |
在校期间发表论文情况 |
统计学审核证明 |
致谢 |
(5)左卡尼汀对梗阻性无精子症患者经PESA取精行ICSI的临床研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
ABSTRACT |
引言 |
第一部分 材料与方法 |
1 材料与方法 |
1.1 研究对象及分组 |
1.2 主要试剂及仪器 |
1.3 实验步骤及方法 |
1.4 统计学分析 |
第二部分 结果 |
2.1 试验组和对照组患者一般情况比较 |
2.2 试验组和对照组患者精子 DNA 完整性与精子顶体完整性的比较 |
2.3 试验组与对照组患者行卵泡浆内单精子注射术助孕情况比较 |
第三部分 讨论 |
3.1 梗阻性无精子症现状分析 |
3.2 左卡尼汀对男性精液质量的治疗现状 |
3.3 卵泡浆内单精子注射在不孕不育患者中的应用 |
3.4 精子DNA完整率对辅助生殖技术的相关影响 |
3.5 精子顶体完整率对辅助生殖技术的相关影响 |
3.6 精子顶体反应率对男性生殖能力的相关影响 |
3.7 精子各项功能指标对不孕不育患者治疗措施选择的指导价值 |
3.8 左卡尼汀对辅助生殖技术的相关影响 |
3.9 存在的问题与展望 |
第四部分 结论 |
参考文献 |
中英文缩写索引 |
综述 |
参考文献 |
致谢 |
个人 简历及攻读学位期间获得的科研成果 |
(6)高压氧对精索静脉曲张大鼠睾丸组织NOS和NO的实验研究(论文提纲范文)
本文创新点 |
中文摘要 |
Abstract |
主要中英文缩略词一览表 |
引言 |
第一部分 两种精索静脉曲张大鼠模型建立方法的比较 |
前言 |
材料与方法 |
结果 |
讨论 |
参考文献 |
第二部分 高压氧对精索静脉曲张大鼠睾丸组织NOS和NO的实验研究 |
前言 |
材料与方法 |
结果 |
讨论 |
参考文献 |
综述一 精索静脉显微结扎术的应用进展 |
参考文献 |
综述二 外科治疗精索静脉曲张不育症的研究进展 |
参考文献 |
小结 |
攻博期间科研成果目录 |
致谢 |
(7)男性不育与精核蛋白的关系及中西医治疗进展(论文提纲范文)
1 精核蛋白与男性不育的关系 |
1.1 精核蛋白的定义 |
1.2 精核蛋白的作用 |
1.3 精核蛋白异常的原因 |
1.4 精核蛋白与男性不育 |
2 男性不育症的治疗进展 |
2.1 西药治疗 |
2.2 中医辨证治疗 |
2.3 中成药治疗 |
2.4 辅助生殖技术 (ART) |
(8)影响ICSI妊娠结局的相关因素研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
英文缩略词简表 |
前言 |
资料与方法 |
结果 |
附图 |
讨论 |
结论 |
参考文献 |
综述 |
参考文献 |
攻读硕士学位期间的研究成果 |
致谢 |
(9)补肾中药对卵细胞体外成熟的影响(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
缩略词表 |
照片清单 |
引言 |
含补肾中药鼠血清对小鼠卵细胞体外成熟的影响 |
1 材料与方法 |
1.1 实验材料 |
1.1.1 实验动物 |
1.1.2 实验药物 |
1.1.3 主要试剂 |
1.1.4 主要仪器设备与耗材 |
1.1.5 溶液的配制与吸卵针的制作 |
1.2 实验方法 |
1.2.1 小鼠卵细胞的采集 |
1.2.2 实验分组及观测指标 |
1.2.3 卵细胞成熟率的测定 |
1.2.4 小鼠精子的采集及处理 |
1.2.5 免疫荧光标记法 |
1.2.6 荧光定量分析MPF调节蛋白Cyclin B1的表达强度 |
1.2.7 卵母细胞细胞骨架的观察方法 |
1.2.8 卵细胞总RNA的提取 |
1.2.9 RT-PCR检测卵母细胞MPF调节亚基Cyclin B1 mRNA的表达 |
1.2.10 血清FSH、E_2的测定 |
1.3 统计学处理 |
2 结果 |
2.1 不同含药鼠血清对卵细胞体外成熟的影响 |
2.2 含药鼠血清对卵细胞体外成熟的影响 |
2.2.1 含药鼠血清对卵细胞体外成熟的影响1 |
2.2.2 含药鼠血清对卵细胞体外成熟的影响2 |
2.2.3 含药鼠血清对卵细胞体外成熟的影响3 |
2.2.4 含药鼠血清对卵细胞体外成熟的影响(A) |
2.2.5 含药鼠血清对卵细胞体外成熟的影响(B) |
2.3 含药鼠血清对体外培养卵细胞MPF调节蛋白Cyclin B1的表达强度的影响 |
2.4 含药鼠血清对体外成熟卵母细胞细胞骨架的影响 |
2.5 含药鼠血清对体外成熟卵母细胞MPF调节亚基Cyclin B1 mRNA表达的影响 |
2.6 不同补肾中药对大鼠血清FSH和E_2水平的影响 |
讨论 |
1 补肾中药对卵细胞体外成熟的影响研究有助于拓展ART的应用空间 |
2 含补肾中药鼠血清可以促进小鼠卵细胞体外成熟 |
2.1 卵母细胞是一种很特殊的细胞 |
2.2 含补肾中药鼠血清可以提高小鼠卵细胞体外成熟率 |
2.3 含补肾中药鼠血清可以增强体外小鼠卵母细胞Cyclin B1的表达 |
3 含药鼠血清不增加体外成熟卵母细胞细胞骨架的异常机率 |
3.1 观察卵子骨架对于评价卵母细胞的质量和受精发育潜能是可靠的 |
3.2 卵子骨架的观察中温度及固定等影响因素的控制是十分重要的 |
3.3 含补肾中药鼠血清不增加小鼠体外成熟卵细胞细胞骨架的异常几率 |
4 补肾法是促进卵细胞体外成熟的有效手段 |
4.1 补肾中药可以促进卵细胞生长发育 |
4.2 补肾法是卵细胞体外成熟安全有效的促进手段 |
结论 |
致谢 |
参考文献 |
附图 |
在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
附录 |
综述 |
参考文献 |
(10)补肾调周法在辅助生殖技术中的作用及临床干预研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
前言 |
第一部分 理论研究 |
一 中医学对不孕不育的认识及研究 |
(一) 中医学对不育症的的认识及研究 |
(二) 中医学对不孕症的认识及临床研究 |
(三) 中医生殖医学的发展及研究现状 |
二 补肾调周法的理论渊源及应用研究 |
(一) 补肾调周法的理论渊源 |
(二) 补肾调周法的主要内容 |
(三) 补肾调周法的具体分期及各期用药特点 |
(四) 补肾调周法在不孕症的应用研究 |
三 现代辅助生殖技术的发展 |
(一) 辅助生殖技术概述 |
(二) 体外授精-胚胎移植 |
(三) 辅助生殖技术的衍生技术 |
(四) 现代辅助生殖技术的临床应用 |
四 中医药在辅助生殖技术中的应用概况 |
(一) 在卵巢反应性低下患者中的运用 |
(二) 在子宫内膜的容受性低下患者中的运用 |
(三) 对胚胎质量的影响 |
(四) 降低辅助生殖的流产率 |
(五) 在不明原因IVF失败者中的运用 |
第二部分 临床研究 |
一 鲜胚移植周期临床研究 |
(一) 临床资料 |
1. 病例来源 |
2. 诊断标准 |
3. 病例选择标准 |
4. 一般资料 |
(二) 研究内容与方法 |
1. 观察指标 |
2. 治疗方案 |
3. 注意事项 |
4. 疗效判定标准 |
5. 统计方法 |
(三) 治疗结果 |
1. 两组患者在子宫内膜厚度、卵子数、受精率、优质胚胎率方面的比较 |
2. 两组患者生化妊娠率、临床妊娠率比较 |
3. 干预组患者治疗前后自身伴随症状观察 |
二 冻胚移植周期临床研究 |
(一) 临床资料 |
1. 病例来源 |
2. 病例选择标准 |
3. 一般资料 |
(二) 研究内容与方法 |
1. 观察指标 |
2. 治疗方案 |
3. 注意事项 |
4. 疗效判定标准 |
5. 统计方法 |
(三) 治疗结果 |
1. 两组患者在子宫内膜厚度比较 |
2. 两组患者生化妊娠率、临床妊娠率比较 |
3. 干预组患者治疗前后伴随症状观察 |
三 讨论 |
(一) 补肾调周法对患者卵巢功能的影响 |
(二) 补肾调周法对患者胚胎质量的影响 |
(三) 补肾调周法对患者子宫内膜厚度与胚胎着床的影响 |
(四) 补肾调周法提高辅助生殖患者临床妊娠率之立法论治与机理探讨 |
(五) 补肾调周法对拟辅助生殖患者致自然妊娠的机理探讨 |
(六) 中医药对患者安胎的作用机制探讨 |
(七) 补肾调周法与辅助生殖技术相配合的探讨 |
第三部分 结语 |
参考文献 |
附录 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 |
致谢 |
作者简介 |
四、单精子卵细胞浆内注射术治疗男性不育症的新进展(论文参考文献)
- [1]强精片对弱精子症大鼠精子线粒体功能影响的实验研究[D]. 杨雪梅. 成都中医药大学, 2020(02)
- [2]Y染色体上DBY基因在无精子症患者睾丸组织中的缺失研究[D]. 余文华. 西北民族大学, 2020(08)
- [3]左归丸治疗肾阴不足型男性不育少弱精子症的临床和实验研究[D]. 孙松. 北京中医药大学, 2018(08)
- [4]针灸干预男性不育症研究的共词聚类分析[D]. 王丽伟. 广州中医药大学, 2017(01)
- [5]左卡尼汀对梗阻性无精子症患者经PESA取精行ICSI的临床研究[D]. 何泳志. 广西中医药大学, 2016(05)
- [6]高压氧对精索静脉曲张大鼠睾丸组织NOS和NO的实验研究[D]. 李忠远. 武汉大学, 2013(02)
- [7]男性不育与精核蛋白的关系及中西医治疗进展[J]. 王旭初. 光明中医, 2012(12)
- [8]影响ICSI妊娠结局的相关因素研究[D]. 胡鹏. 广州医学院, 2012(08)
- [9]补肾中药对卵细胞体外成熟的影响[D]. 段恒. 成都中医药大学, 2010(08)
- [10]补肾调周法在辅助生殖技术中的作用及临床干预研究[D]. 刘建国. 南京中医药大学, 2010(12)