一、应用金胺O法在37℃下检测抗酸杆菌（论文文献综述）
刘婷[1]（2019）在《GeneXpert MTB/RIF在系统性自身免疫病合并肺结核患者中的应用》文中研究指明目的探讨结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测体系（Gene Xpert MTB/RIF）诊断系统性自身免疫病（Systemic Autoimmune Diseases,SAD）合并肺结核（Pulmonary Tuberculosis,PTB）患者中的应用价值,为SAD合并PTB的临床诊断提供参考。方法选取2017年1月-2018年3月枣庄市立医院和山东省胸科医院收治的SAD合并PTB的350例患者作为观察组,选取同期患有SAD的非结核的50例患者作为对照组。采集所有入选者的痰液标本,每份标本分成3份,分别采用抗酸染色法、BACTECTMMGITTM960全自动快速分枝杆菌培养鉴定药敏仪（MGIT960液体培养）和GeneXpert MTB/RIF技术检测3份痰液标本;另外采集所有入选者全血5ml,采用T细胞斑点试验（T-cell dot test,T-SPOT）进行检测。以临床诊断和影像学检查作为系统性自身免疫病合并肺结核诊断的金标准,计算GeneXpert MTB/RIF、MGIT960液体培养、T-SPOT法和抗酸染色法对不同系统性自身免疫病中肺结核的检出率,并比较GeneXpert MTB/RIF与MGIT960液体培养、T-SPOT法和抗酸染色法的灵敏度和特异度;以结核杆菌液体药敏试验作为金标准,分析GeneXpert MTB/RIF在检测利福平耐药性中的价值;比较GeneXpert MTB/RIF系统半定量结果与MGIT960液体培养、T-SPOT法、抗酸染色法细菌计数。结果（1）在系统性血管炎中,与MGIT960液体培养和抗酸染色法的结核病检出率相比,GeneXpert MTB/RIF的检出率明显增高,差异具有统计学意义（P<0.05）;在系统性红斑狼疮、皮肌炎、混合性结缔组织病中,与MGIT960液体培养和抗酸染色法的结核病检出率相比,GeneXpert MTB/RIF的检出率明显增高,差异具有统计学意义（P<0.05）;在硬皮病、干燥综合征中,与抗酸染色法的结核病检出率相比,GeneXpert MTB/RIF的检出率明显增高,差异有统计学意义（P<0.05）;在类风湿性关节炎中,与T-SPOT法和抗酸染色法的结核病检出率相比,GeneXpert MTB/RIF的检出率明显增高,差异均有统计学意义（P<0.05）。（2）GeneXpert MTB/RIF、MGIT960液体培养、T-SPOT法和抗酸染色法在检测SAD合并肺结核方面的灵敏度分别为95.14%、84.00%、89.71%和56.86%,GeneXpert MTB/RIF检测的灵敏度与MGIT960液体培养、T-SPOT法有较好的一致性（χ2=1.73、1.39,P>0.05）,明显高于抗酸染色法（χ2=36.60,P<0.05）;GeneXpert MTB/RIF检测的特异度与MGIT960液体培养、抗酸染色法有较好的一致性（χ2=1.42、0.15,P>0.05）,明显高于T-SPOT法（χ2=17.53,P<0.05）。（3）GeneXpert MTB/RIF对350例患者中的156例进行利福平耐药性检测,结果显示,GeneXpert MTB/RIF检出利福平耐药53例,灵敏度为86.00%,特异度为90.56%。（4）GeneXpert MTB/RIF系统检测结核菌的结果分为未检出、极低、低、中和高5个量级。在未检出量级中,与MGIT960液体培养、T-SPOT法的结核菌检出率相比,GeneXpert MTB/RIF系统的检出率明显降低,差异有统计学意义（χ2=4.026、5.835,P<0.05）;在极低、低2个量级中,与MGIT960液体培养、T-SPOT法、抗酸染色法的结核菌检出率相比,GeneXpert MTB/RIF系统的检出率明显增高,差异有统计学意义（χ2=5.172-18.935,P<0.05）;在高量级中,与MGIT960液体培养、T-SPOT法的结核菌检出率相比,GeneXpert MTB/RIF系统的检出率均明显增高,差异有统计学意义（χ2=4.374、4.286,P<0.05）。结论（1）GeneXpert MTB/RIF是一种快速、准确诊断系统性自身免疫病合并肺结核及利福平耐药性的方法,对不同系统性自身免疫病合并肺结核的早期诊断具有临床意义。（2）与传统的MGIT960液体培养、T-SPOT法和抗酸染色法等联合,可显着提高合并肺结核系统性自身免疫病结核病的检出率。
张铭锦[2]（2019）在《实验猴结核病流行病学调查及抗体斑点免疫胶体金检测方法的研究》文中进行了进一步梳理实验猴在动物实验中具有其他实验动物所无法替代的重要地位。当前西方国家因为动物资源稀缺,动物保护主义者反对,应用成本过高等多种原因而大幅缩减实验猴的研究与应用。而此时,我国实验猴的养殖和应用却随着生物医学、药品、临床实验等学科水平的进步得到迅猛发展,已成为世界第一大实验猴出口国,目前实验猴存栏量约30万（只）。2017年11月27日,世界上首只体细胞克隆猴“中中”在上海中国科学院神经科学研究所的诞生标志着中国率先开启了以遗传背景相同的克隆猴作为实验动物模型的时代。结核病主要是由结核分枝杆菌复合群引起的一类以呼吸系统感染为主,同时可侵袭身体多种组织器官的人兽共患的感染性疾病。舍室集中饲养为结核病在实验猴群中流行提供了条件,结核病不仅危及实验猴生命,同时对接触到患病实验猴的人员健康产生威胁。目前对实验猴结核病的流行状况尚不清楚,给实验猴的结核病控制带来困难。对于灵长动物目前法定的结核检疫方法是结核菌素皮内变态反应试验,结核菌素皮内变态反应试验具有劳动强度大、操作复杂、费时、容易出现误判等特点,除此以外还会与卡介苗和非结核分枝杆菌等具有交叉反应,接受了皮试的灵长动物也会产生强烈的不适。对于结核病的检测需要探索更加灵敏快速的检测方法。血清免疫学检测方法简单、快速、易于自动化、相对廉价,曾经是我国对人临床检验诊断结核病的重要辅助诊断方法。血清免疫学检查还可能发现痰涂片镜检法无法检测出的菌阴结核病例。我国专家共识认为血清免疫学检测方法随着技术不断的发展,具有诊断价值的抗原被不断发现,该方法具有很大潜力。本研究使用免疫学、细菌学、分子生物学对广西某三家猴场饲养的1248只实验猴进行了结核流行病学调查。调查结果显示在广西部分地区实验猴中结核发病率为1.8%（22/1248）,在不同年龄段的实验猴中,老年组实验猴发病率最高,发病率为6.42%,其次为幼年组,发病率为4.12%,中年组发病率为0.87%,青年组发病率为0.40%,并在结核感染实验猴病灶组织标本中分离培养出对异烟肼耐药结核分枝杆菌菌株,为相关方面研究积累了数据。本研究对实验猴结核分枝杆菌抗体检测方法进行探索性研究,利用斑点免疫胶体金渗滤法原理建立实验猴结核抗体斑点免疫胶体金检测方法。对60例实验猴血清样本进行检测,与结核菌培养结果作为参照,实验结果显示该方法灵敏、特异、准确,阳性预测值、阴性预测值较高。本研究通过对广西部分地区实验猴开展结核病的流行病学调查,对逐步建立、完善规范化管理提供依据,并提示防治实验猴结核病的重点,以提高实验猴饲养工作者、管理者对结核病的认知。同时对实验猴结核分枝杆菌血清免疫学检测方法进行研究,评估实验猴结核血清免疫学检测效果,为进一步开发实验猴结核分枝杆菌血清学检测方法提供了依据。
吴丹丹[3]（2019）在《应用逆转录-环介导等温扩增技术检测结核分枝杆菌16S rRNA的研究》文中研究指明结核分枝杆菌（Mycobacterium Tuberculosis,MTB）是引起结核病的病原菌,结核病的早期诊断对合理治疗和终止传染具有重要作用。目前应用的PCR、荧光定量PCR（Fluorescence Quantitive PCR,FQ-PCR）、环介导等温扩增法（Loop-mediated Isothermal Amplification,LAMP）等分子生物学检测法是以MTB-DNA为靶序列设计引物并进行扩增的,以DNA为基础的引物检测法对死菌或活菌都呈现阳性结果,在临床上无法评估抗结核治疗效果,并且检测灵敏度和特异性有限,不能满足临床诊断的需要。MTB-DNA通常为单一或少数拷贝,而16S rRNA在一个活的MTB中最高可达104拷贝,因此检测16S rRNA可提高检测的灵敏度;同时,结核杆菌16S rRNA仅存在于代谢增殖的活菌中,因而检测16S rRNA不但可提高诊断灵敏性,还可以用来评估抗结核疗效;此外,LAMP技术设备廉价、操作简便,产物无需任何仪器观察,经钙黄绿素或羟基萘酚蓝等染色后,肉眼可见,扩增快速高效,适合各种条件下检测,尤其适用于基层及现场使用。本研究针对16S rRNA区段设计MTB引物,建立逆转录-环介导等温扩增技术（Reverse Transcription Loop-mediated Isothermal Amplification,RT-LAMP）用以检测MTB,为结核病的临床诊断提供技术支持。第一部分应用逆转录-环介导等温扩增技术检测痰液中结核分枝杆菌16S rRNA目的:通过在结核分枝杆菌16S rRNA区段设计引物,建立RT-LAMP检测技术,为结核病的快速检测提供一个灵敏度高、特异性强、可检测活菌的简便的方法。方法:将MTB的16S rRNA完整序列与非结核分枝杆菌（nontuberculosis mycobacteria,NTM）进行比较,用Primer Explorer V5软件设计引物。通过对MTB细菌溶液进行连续性10倍的稀释后,比较RT-LAMP和LAMP的灵敏度,并观察NTM和其他已知的呼吸道病原菌（金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌）的检测结果,以确定引物特异性。用RT-LAMP、LAMP和罗氏培养法（Lowenstein-Jensen,L-J）检测131例结核病患者痰标本和24例阴性对照痰标本比较其临床检测效果。结果:通过灵敏度试验比较了RT-LAMP、LAMP方法的灵敏度,结果显示RT-LAMP方法比LAMP法高约10倍。RT-LAMP可检测出单个MTB菌。特异性试验利用RT-LAMP方法对已知的1株MTB、8株NTM和3株常见呼吸道细菌检测,结果发现只有MTB阳性。临床检测结果显示,RT-LAMP、LAMP和L-J法检测临床痰标本中MTB阳性检测率分别为97.7%（128/131）、78.6%（103/131）、73.2%（96/131）,阴性对照只有L-J法有1例假阳性。RT-LAMP方法的阳性检测率高于LAMP和L-J法（P<0.01,P<0.01）。18例痰菌阳性的肺结核患者,在抗结核治疗前应用RT-LAMP和LAMP检测痰液标本,两种方法均具有较高的阳性检测率,但随着治疗时间的延长,RT-LAMP阳性检测率很快下降,而LAMP阳性检测率下降缓慢,说明RT-LAMP可以用来检测活菌。结论:1.本研究首次利用16S rRNA在MTB内呈多拷贝且仅存在于活菌的特点,创建了针对16S rRNA的RT-LAMP技术,用于检测MTB活菌。不仅证明了其灵敏度高、特异性强,而且操作简便、耗时短,适合基层及低资源医院。该技术有望发展成为快速检测MTB的有效手段。2.利用RT-LAMP技术,针对MTB 16S rRNA设计特异性引物,用于检测痰中MTB。通过与LAMP技术及L-J法比较,证明了其具有较高的灵敏度和特异性。第二部分应用逆转录-环介导等温扩增技术检测脑脊液中结核分枝杆菌16S rRNA目的:利用前期建立的RT-LAMP技术检测脑脊液中MTB,为结核性脑膜炎（Tuberculous meningitis,TBM）提供快速诊断的新方法。方法:选取105例患者脑脊液（Cerebrospinal Fluid,CSF）标本,其中确诊TBM有52例,疑似TBM有33例,阴性对照有20例。利用前期建立的MTB 16S rRNA RT-LAMP方法,比较RT-LAMP与RT-PCR的灵敏度与特异性,在临床样本检测中,以FQ-PCR为对照,比较两种方法检测效果。结果:灵敏度试验结果显示RT-LAMP比RT-PCR的灵敏度高,RT-LAMP与RT-PCR最低检测值分别为1CFU/mL和102 CFU/mL。在常见的5种中枢神经系统病原体脑脊液标本中,利用两种方法均未扩增出特异性条带。RT-LAMP对TBM组、疑似TBM组阳性检出率分别为96.1%（50/52）、72.3%（24/33）,RT-PCR对TBM组、疑似TBM组的阳性检出率分别为71.1%（37/52）、33.3%（11/33）,FQ-PCR对TBM组、疑似TBM组阳性检出率分别为65.3%（34/52）、24.2%（8/33）,三种方法对照组均无非特异性扩增。RT-LAMP阳性检出率高于FQ-PCR,两种检测方法差异有统计学意义（P<0.01）;虽然在TBM组、疑似TBM组中,RT-PCR的阳性检出率略高于FQ-PCR,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论:通过RT-LAMP检测技术检测脑脊液中MTB,与RT-PCR方法比较,也证明了其具有灵敏度高和特异性强的特点。
郭如惠[4]（2019）在《2种显微镜检查抗酸杆菌的方法学比较》文中进行了进一步梳理目的比较2种显微镜镜检抗酸杆菌的方法学的差异。方法收集125例结核病患者的痰标本,每位患者收集3份痰（即时痰、清晨痰和夜间痰）,共375份痰标本。分为萋-尼染色（Z-N）法镜检组（简称Z-N组）和荧光染色发光二极管显微镜镜检组（简称LED组）。对每份痰标本同时采用上述2种镜检法进行检测。检查抗酸杆菌的阳性率差异情况,比较两者的检验结果。结果 LED组125例结核病患者的痰标本中检出阳性45例,阳性率为36. 0%; Z-N组检出阳性29例,阳性率为23. 2%,差异有统计学意义（χ2=4. 89,P <0. 05）。在检测1+或以下菌量的标本中LED组镜检阳性率为14. 4%,Z-N组阳性率为6. 4%,差异有统计学意义（χ2=12. 86,P <0. 01）。结论 LED较Z-N能够提高涂片镜检的阳性检出率,两者阳性率差异主要体现在1+及以下的标本中,且读片时间明显缩短。
樊晓东,陆兴热,张成伟,张青,资云菊,袁雕,叶树樱,王武满,朱德永,杨生仙[5]（2018）在《集菌涂片金胺“O”荧光染色法在检测痰液中抗酸杆菌的临床应用》文中研究说明目的:探讨金胺"O"荧光集菌染色法在检测痰液中抗酸杆菌的临床应用,为肺结核的早期快速诊断、治疗提供参考依据。方法:选择212例2016年6月2017年12月感染科收治的疑似肺结核患者为研究对象,对其痰标本采取直接涂片和离心集菌涂片两种制片方法,用萋-尼氏抗酸染色法和金胺"O"荧光法进行染色镜检。结果:直接涂片抗酸染色法阳性率（9.43%,20/212）低于集菌涂片抗酸染色法（13.68%,29/212）,直接涂片金胺"O"荧光染色法阳性率（17.45%,37/212）低于集菌涂片金胺"O"荧光染色法（36.32%,77/212）,差异具有统计学意义（χ2=6.62,12.37,P=0.02,0.00）。集菌涂片抗酸染色法阳性率（13.68%,29/212）低于集菌涂片金胺"O"荧光染色法（36.32%,77/212）,差异具有统计学意义（χ2=13.65,P=0.00）。金胺"O"荧光染色法的敏感度,特异性,约登指数及阳性、阴性预测值均优于萋-尼氏抗酸杆菌染色法,差异有显着性（P<0.05）。结论:金胺"O"荧光集菌染色法是一种检测灵敏度高、特异性好、操作简便、快速的方法,对结核病患者的早期诊断和治疗具有重要意义。
李玉雪,柳晓金,王薇,范蓉,安翠平[6]（2018）在《改良抗酸染色法在检测痰结核分枝杆菌中的应用》文中认为目的比较痰涂片传统抗酸染色、改良抗酸染色、BACTEC MGIT 960培养和Xpert MTB/RIF技术四种方法检测痰中结核分枝杆菌对于肺结核的诊断价值。方法 207例确诊结核患者和145例其他肺部感染患者的痰液,分别用痰涂片传统抗酸染色法、改良抗酸染色法、BACTEC MGIT 960培养及Xpert MTB/RIF技术检测抗酸杆菌,比较四种方法的灵敏度及特异性。结果痰涂片传统抗酸染色法、改良抗酸染色法、BACTEC MGIT 960培养和Xpert MTB/RIF技术检测痰中结核分枝杆菌的敏感度分别为20.3%、59.9%、55.6%和69.1%;特异性分别为99.3%、99.3%、100%和99.3%。结论与传统抗酸染色法、BACTEC MGIT 960培养和Xpert MTB/RIF技术相比,改良抗酸染色法具有简单、快速、敏感性高、特异性强和成本低廉等优点,是临床肺结核快速诊断的有效检测方法,值得基层实验室推广。
陈永生,陈悦[7]（2017）在《抗酸杆菌自动染色和数字扫描系统的临床应用》文中研究指明目的评价自动化染色和数字扫描系统检测抗酸杆菌（分枝杆菌）的效能。方法选择临沂市人民医院门诊连续纳入的肺结核可疑者,同时开展传统痰涂片人工染色镜检、ASDS检测和固体培养。结果与结论 ASDS的检测结果更为可观,能够提高实验室的检测能力,适于广泛应用。
王敏娣,孙丽娜,梁慧,邱颖,陈然[8]（2017）在《缸染法抗酸染色显微镜方法检查抗酸杆菌结果分析》文中研究说明目的分析抗酸杆菌应用缸染法抗酸染色显微镜方法进行检查的结果。方法方便选择2008年1月—2016年1月该单位收治的100例结核病患者作为观察组,并将该单位同期收治的100例结核病患者设为对照组,予以对照组单片分置染色,予以观察组单片浸入混合染色,比较两组检查结果。结果观察组抗酸杆菌检出率95.00%,对照组抗酸杆菌检出率80%,对比差异有统计学意义（P<0.05）。观察组污染率0.00%,对照组污染率10.00%,对比差异有统计学意义（P<0.05）。结论缸染法抗酸染色显微镜方法应用在抗酸杆菌检验中,检出率高,污染发生率较低,值得推广。
郑立恒[9]（2016）在《涂阴肺结核支气管肺泡灌洗液和结核性胸水改良抗酸染色法的建立与应用评价》文中研究指明目的:本研究旨在传统抗酸染色法的基础上利用玻片离心沉淀仪对其进行改良,建立改良抗酸染色法,并评价其在涂阴肺结核患者支气管肺泡灌洗液中的应用价值。方法:（1）收集痰涂片阴性肺结核患者的支气管肺泡灌洗液标本,标本经4%Na OH按一定比例消化后,利用玻片离心沉淀仪收集其中的结核分枝杆菌,待玻片（实验前经多聚赖氨酸处理）干燥后,进行抗酸染色,建立改良抗酸染色法;（2）对收集到的灌洗液标本进行改良罗氏培养、直接涂片法、离心涂片法和改良抗酸染色法检测,对培养阳性患者的所有灌洗液标本用Gene Xpert?MTB/RIF系统进行检测,以罗氏培养作为金标准,通过比较不同方法间的差异,探讨改良抗酸染色法在涂阴肺结核患者支气管肺泡灌洗液中的诊断价值。结果:共纳入379例痰涂片阴性肺结核患者,其中32例被剔除,被剔除者中5例因诊断不明、15例因资料丢失、12例因标本培养污染而退出分析。最后347例患者中,74例患者改良罗氏培养阳性,基于74例患者进行统计分析,直接涂片法、离心涂片法和改良抗酸染色法敏感性分别为16.2%（95%CI:12.3,20.0）（n=12/74）、37.8%（95%CI:32.7,42.9）（n=28/74）、87.8%（95%CI:84.4,91.2）（n=65/74）,改良抗酸染色法较直接涂片法和离心涂片法阳性率高,差异均有统计学意义（P<0.05）。直接涂片法、离心涂片法和改良抗酸染色法的特异性分别为100%（n=273/273）、100%（n=273/273）和99.6%（n=272/273）。Gene Xpert?MTB/RIF系统74例培养阳性患者中,阳性67例,阳性率90.5%。74例灌洗液培养阳性患者中共收集到106份标本,基于此106份标本进行统计分析,改良罗氏培养法、直接涂片法、离心涂片法、Gene Xpert?MTB/RIF系统和改良抗酸染色法阳性率分别为76.4%（81/106）、13.2%（14/106）、34%（48/106）、93.4%（99/106）和91.5%（97/106）。改良抗酸染色法与Gene Xpert?MTB/RIF系统的阳性率相近,但远高于直接涂片法和离心涂片法的阳性率,差异均有统计学意义（P<0.05）。对106份标本同时进行三种抗酸染色,每张染色玻片于油镜下观察300个视野,直接涂片法和离心涂片法的阳性视野数分别为34.4±54.0和38.2±36.8,而改良抗酸染色法的阳性视野数为69.0±67.8,远高于其它两种方法,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论:（1）利用玻片离心沉淀仪成功建立了涂阴肺结核支气管肺泡灌洗液的改良抗酸染色法;（2）改良抗酸染色法明显提高了涂阴肺结核支气管肺泡灌洗液中结核分枝杆菌的检出率,对肺结核的诊断价值较大;（3）改良抗酸染色法简便、快速、经济、高效,值得临床推广应用。背景结核病是单一病原菌引起的感染性疾病中死亡率最高的疾病之一,是人类面临的重大公共卫生和社会问题。我国约有50%的人感染过结核分枝杆菌,结核性胸膜炎约占所有类型结核病5%,占肺结核病的10%20%,其发病率大约为1.25%,据估算为160万人,青壮年是易感人群,39岁以下的患者占73%,其中约10%30%的结核性胸膜炎患者有胸腔积液出现,是临床上第二大常见的肺外结核病。结核性胸膜炎如不能及时诊断和治疗,则可能造成胸膜增厚、粘连,甚至可引起肺功能下降而丧失劳动能力,因此及时诊治非常重要。胸腔积液是一种常见的临床问题,结核病和恶性肿瘤侵及胸膜是出现胸腔积液的两大主要原因,发生率分别为49.6%与29.6%。结核分枝杆菌抗酸染色和培养是诊断结核性胸膜炎的“金标准”,但结核性胸水离心涂片法阳性率极低,培养所需时间长,一般在4 w8 w;PPD试验检测结果不易区分是否卡介苗接种、MTB潜伏感染及NTM感染;胸膜活检有创伤性,患者依从性差,诊断的敏感性和阳性率较低,操作耗时费力。结核性胸膜炎早期诊断困难,而诊断和治疗的延迟会导致死亡率的增加。因此,寻求对结核性胸膜炎快速、高效的诊断方法,在临床诊治工作中仍然是一个挑战。目前亟需研究新的检查方法以提高对结核性胸膜炎的诊断水平。近几年,应用玻片离心沉淀仪的改良抗酸染色技术大大提高了结核性脑膜炎的诊断效率,其原理为首先应用玻片离心沉淀仪浓缩脑脊液中的细胞和结核分枝杆菌,然后进行固定细胞和破坏细胞膜蛋白,再行抗酸染色。由于其浓缩原理较离心沉淀法好,避免了菌的浮力和转移损失的问题,加之收集的菌沉淀面积小,染色后可以同时观察细胞内外的结核分枝杆菌,所以阳性率较离心涂片法提高了将近80%。因此,我们推测玻片离心沉淀仪亦可应用于结核性胸水的诊断,有可能在结核性胸膜炎的早期诊断中发挥重要作用。本研究旨在建立结核性胸水的改良抗酸染色法,并进一步探讨其临床应用价值。目的:在传统抗酸染色的基础上利用玻片离心沉淀仪进行改良,建立胸水改良抗酸染色法,并评价其在结核性胸膜炎中的应用价值。方法:选取2014年6月1日至2015年8月31日于邯郸市传染病医院、河北省胸科医院收治的胸水患者,共纳入实验组结核性胸膜炎患者184例（胸水ADA>45U/L）,对照组恶性胸水患者43例。建立改良抗酸染色法,对所有胸水分别进行离心涂片法、BACTEC 960培养法、Gene Xpert?MTB/RIF系统和改良抗酸染色法检测,将改良抗酸染色法的结果与其它方法结果进行统计学分析,综合评价其在结核性胸膜炎诊断中的应用价值。结果:共纳入184例结核性胸膜炎患者的胸水标本,5例被剔除的患者中其中1例是由于资料丢失,4例是由于培养污染。最后179例患者中,98例未经过抗结核治疗,81例已经开始抗结核治疗。纳入恶性胸水患者43例,其中3例由于培养污染被剔除。（1）未治疗组和治疗组结核分枝杆菌检出率比较:98例未治疗组,离心涂片法、改良抗酸染色法、BACTEC 960培养法和Gene Xpert?MTB/RIF系统阳性率分别为2.04%（2/98）、33.67%（33/98）、20.41%（20/98）和15.31%（15/98）,改良抗酸染色法检测结核分枝杆菌的阳性率较其它三种方法阳性率高,差异有统计学意义（P<0.05）。81例已治疗组,离心涂片法、改良抗酸染色法、BACTEC960培养法和Gene Xpert?MTB/RIF系统阳性率分别为1.23%（1/81）、25.93%（21/81）、13.58%（11/81）和8.64%（7/81）,改良抗酸染色法较其它三种方法阳性率高,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗组和未治疗组中同种方法间结核分枝杆菌检出率相比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。（2）四种方法敏感性、特异性比较:以临床诊断为金标准,离心涂片法、改良抗酸染色法、BACTEC 960培养法和Gene Xpert?MTB/RIF系统检测的敏感性分别为1.68%（95%CI:0.00,3.38）、30.17%（95%CI:24.09,36.25）、17.32%（95%CI:12.31,22.33）和12.29%（95%CI:7.94,16.64）,特异性分别为100%（40/40）、100%（40/40）、100%（40/40）和97.50%（39/40）。改良抗酸染色法较离心涂片法、BACTEC 960培养法和Gene Xpert?MTB/RIF系统敏感性高,差异有统计学意义（P<0.05）。（3）改良抗酸染色法同份单次检测与重复检测检出率比较:实验组179例标本,第一次检测抗酸杆菌阳性为52例,第二次检测抗酸杆菌阳性为53例,第三次检测抗酸杆菌阳性为54例,阳性率分别为29.05%、29.61%和30.17%,三者之间比较无统计学意义（P>0.05）。（4）胸水中结核分枝杆菌含量检测结果:在Gene Xpert?MTB/RIF系统阳性的22份标本中,结核分枝杆菌含量极低（CT>28）20份,含量低（22<CT<28）2份。结论:（1）利用玻片离心沉淀仪成功建立了结核性胸腔积液的改良抗酸染色法;（2）结核性胸水中结核分枝杆菌浓度极低,改良抗酸染色法可明显提高结核性胸水的阳性率,比BACTEC 960培养法和Xpert MTB/RIF系统均高,对结核性胸膜炎的诊断价值较大;（3）改良抗酸染色法简便、快速、经济、高效,可作为早期诊断结核性胸膜炎的检查手段,值得临床推广应用。
毛小芳,杨敏,谢英,魏云烁[10]（2016）在《金胺“O”荧光染色LED显微镜检测痰中抗酸杆菌的应用》文中进行了进一步梳理目的探讨金胺"O"荧光染色LED显微镜法在检测痰中抗酸杆菌的应用。方法依据《中国结核病防治规划﹑痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册》对2106例痰标本同时用萋-尼氏抗酸染色法和金胺"O"荧光染色法查找抗酸杆菌,比较两种方法的实验结果,分析金胺"O"荧光染色LED显微镜检测抗酸杆菌的灵敏度和特异性。结果 2106例痰标本中荧光染色阳性315例,阳性率15.0%;萋-尼氏染色阳性283例,阳性率13.4%,两种方法符合率89.8%。对比两组检测结果,金胺"O"荧光染色LED显微镜法检测的灵敏度和特异性均较高。结论金胺"O"荧光染色LED显微镜法是一种检测灵敏度高﹑特异性好﹑操作简便﹑快速的方法,对结核病患者的早期诊断和治疗具有重要意义。
二、应用金胺O法在37℃下检测抗酸杆菌（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、应用金胺O法在37℃下检测抗酸杆菌（论文提纲范文）
（1）GeneXpert MTB/RIF在系统性自身免疫病合并肺结核患者中的应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 研究对象与方法 |
| 1 研究对象 |
| 1.1 观察组 |
| 1.2 对照组 |
| 2 实验仪器与试剂 |
| 2.1 实验仪器 |
| 2.2 实验试剂 |
| 3 研究方法 |
| 3.1 标本采集 |
| 3.1.1 痰液样本采集 |
| 3.1.2 血样本采集 |
| 3.2 标本检测 |
| 3.2.1 GeneXpert MTB/RIF检测 |
| 3.2.2 MGIT960 液体培养及药敏试验 |
| 3.2.3 抗酸染色法 |
| 3.2.4 T-SPOT法 |
| 4 观察指标 |
| 5 质量控制方法 |
| 6 统计学方法 |
| 6.1 灵敏度 |
| 6.2 特异度 |
| 6.3 预测值 |
| 结果 |
| 1 GeneXpert MTB/RIF、MGIT960 液体培养、T-SPOT法和抗酸染色法在不同系统性自身免疫病中肺结核的检出率 |
| 2 GeneXpert MTB/RIF、MGIT960 液体培养、T-SPOT法和抗酸染色法检测结核分枝杆菌的效能分析 |
| 3 GeneXpert MTB/RIF在检测利福平耐药性方面的应用 |
| 4 GeneXpert MTB/RIF系统不同量级的结果与MGIT960 液体培养、T-SPOT法、抗酸染色法细菌计数各方法比较 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 系统性自身免疫病合并肺结核患者的诊断与耐药性分析研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 英文缩略词汇表及中文对照 |
| 致谢 |
（2）实验猴结核病流行病学调查及抗体斑点免疫胶体金检测方法的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩写词表 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 结核病的流行以及危害 |
| 1.1 结核及耐药结核 |
| 1.2 实验猴结核病在我国现状 |
| 第二章 非人灵长类动物结核检测方法 |
| 2.1 影像学检测 |
| 2.2 细菌学检测 |
| 2.3 分子生物学诊断 |
| 2.4 免疫学诊断 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第一章 实验猴结核病流行病学调查 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 结核菌素皮内实验反应结果 |
| 2.2 结核菌涂片检测结果 |
| 2.3 结核菌分离培养结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二章 实验猴结核分枝杆菌耐药性检测 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 药敏实验结果 |
| 2.2 耐药基因芯片检测方法对结核分枝杆菌利福平耐药基因rpoB的检测 |
| 2.3 耐药基因芯片检测方法对结核分枝杆菌异烟肼耐药基因inhA以及katG的检测 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 实验猴结核抗体斑点免疫胶体金检测方法研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 结核抗体斑点免疫胶体金检测方法建立 |
| 2.2 使用制备的结核抗体斑点免疫胶体金检测试纸进行检测 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 导师简介 |
| 作者简介及在学习期间所取得的研究成果 |
| 致谢 |
（3）应用逆转录-环介导等温扩增技术检测结核分枝杆菌16S rRNA的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 应用逆转录-环介导等温扩增技术检测痰液中结核分枝杆菌16SrRNA |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 应用逆转录-环介导等温扩增技术检测脑脊液中结核分枝杆菌16S rRNA |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）2种显微镜检查抗酸杆菌的方法学比较（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 仪器与试剂 |
| 1.3 方法 |
| 1.3.1 检测方法 |
| 1.3.2 判读标准 |
| 1.4 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
（5）集菌涂片金胺“O”荧光染色法在检测痰液中抗酸杆菌的临床应用（论文提纲范文）
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 标本来源 |
| 1.2 仪器与试剂 |
| 1.3 方法 |
| 1.4 统计学分析 |
| 2. 结果 |
| 2.1 对比两种染色方法检测结果 |
| 2.2 集菌涂片金胺“O”荧光染色、集菌涂片抗酸染色法检查的诊断效能 |
| 3. 讨论 |
（6）改良抗酸染色法在检测痰结核分枝杆菌中的应用（论文提纲范文）
| 材料与方法 |
| 1研究对象 |
| 2标本采集 |
| 3仪器与试剂 |
| 4检测方法 |
| 4.1痰涂片传统抗酸染色 |
| 4.2改良抗酸染色 |
| 4.3BACTEC MGIT 960培养 |
| 4.4Xpert MTB/RIF检测 |
| 5统计学处理 |
| 结果 |
| 1改良抗酸染色法与传统抗酸染色法检测结果比较 |
| 2改良抗酸染色法、BACTEC MGIT 960培养法、Xpert MTB/RIF技术检测结果比较 |
| 讨论 |
（7）抗酸杆菌自动染色和数字扫描系统的临床应用（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 方法 |
| 1.1 研究现场 |
| 1.2 研究周期 |
| 1.3 样本类型及数量 |
| 1.4 入选和排除标准 |
| 1.4.1 入选标准 |
| 1.4.2 排除标准 |
| 1.4.3 标本的采集 |
| 1.4.4 标本的保存 |
| 1.5 检测方法 |
| 1.6 ASDS检测 |
| 1.7 ASDS重复性检测 |
| 1.8 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 病例纳入 |
| 2.2 ASDS与人工法染色镜检阳性率比较[12-14] |
| 2.2.1 萋尼氏染色 |
| 2.2.2 荧光染色 |
| 2.3 ASDS与人工法染色镜检的效能比较[15-19] |
| 2.3.1 萋尼氏染色 |
| 2.3.2 荧光染色 |
| 2.3.3 重复性分析 |
| 3 ASDS与传统人工法检测比较[20-23] |
| 3.1 萋尼氏染色 |
| 3.2荧光染色 |
| 4 不一致检测结果分析[24-30] |
| 4.1 萋尼氏染色 |
| 4.2 荧光染色 |
| 5 讨论 |
（8）缸染法抗酸染色显微镜方法检查抗酸杆菌结果分析（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 统计方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 两组患者镜检结果对比 |
| 2.2 两组患者污染率对比 |
| 3 讨论 |
（9）涂阴肺结核支气管肺泡灌洗液和结核性胸水改良抗酸染色法的建立与应用评价（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 第一部分：涂阴肺结核支气管肺泡灌洗液改良抗酸染色法的建立与应用评价 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 第二章 研究对象和方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 材料与方法 |
| 3 实验设计 |
| 4 统计学分析 |
| 第三章 实验结果 |
| 1 改良抗酸染色法的建立 |
| 2 临床资料 |
| 3 五种检测方法MTB检出结果 |
| 4 直接涂片法、离心涂片法和改良抗酸染色法AFB检出数量 |
| 5 五种方法检出MTB阳性率比较 |
| 6 直接涂片法、离心涂片法和改良抗酸染色法敏感度、特异度、PPV、NPV及 95%可信区间 |
| 7 直接涂片法、离心涂片法和改良抗酸染色法AFB阳性视野数 |
| 第四章 讨论 |
| 1 涂阴肺结核诊断 |
| 2 Gene Xpert? MTB/RIF系统 |
| 3 应用玻片离心沉淀仪的改良抗酸染色法原理与优势 |
| 4 支气管肺泡灌洗液检测诊断肺结核临床应用 |
| 5 支气管肺泡灌洗液改良抗酸染色法诊断效率评价 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分：结核性胸水改良抗酸染色法的建立与应用评价 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 第二章 研究对象和方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 材料与方法 |
| 3 实验设计 |
| 4 统计学分析 |
| 第三章 实验结果 |
| 1 改良抗酸染色法的建立 |
| 2 临床资料 |
| 3 未接受治疗者中四种方法检测MTB阳性率比较 |
| 4 接受治疗者中四种方法检测MTB阳性率比较 |
| 5 四种方法敏感性、特异性比较 |
| 6 改良抗酸染色法单次检测与重复检测检出率比较 |
| 7 胸水中MTB含量检测结果 |
| 第四章 讨论 |
| 1 结核性胸水的诊断 |
| 2 改良抗酸染色 |
| 3 Gene Xpert? MTB/RIF系统 |
| 4 改良抗酸染色法与离心涂片法、BACTEC 960 培养法、Gene Xpert? MTB/RIF技术比较的优势 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 综述结核病诊断技术研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表文章 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）金胺“O”荧光染色LED显微镜检测痰中抗酸杆菌的应用（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1标本来源 |
| 1.2主要试剂及器材 |
| 1.3方法 |
| 1.3.1标本处理 |
| 1.3.2 染色方法 |
| 1.3.2.1传统萋-尼氏染色 |
| 1.3.2.2荧光染色 |
| 1.3.3显微镜镜检 |
| 1.3.4结果报告 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
四、应用金胺O法在37℃下检测抗酸杆菌（论文参考文献）
- [1]GeneXpert MTB/RIF在系统性自身免疫病合并肺结核患者中的应用[D]. 刘婷. 青岛大学, 2019(03)
- [2]实验猴结核病流行病学调查及抗体斑点免疫胶体金检测方法的研究[D]. 张铭锦. 吉林大学, 2019(10)
- [3]应用逆转录-环介导等温扩增技术检测结核分枝杆菌16S rRNA的研究[D]. 吴丹丹. 承德医学院, 2019(02)
- [4]2种显微镜检查抗酸杆菌的方法学比较[J]. 郭如惠. 中国卫生检验杂志, 2019(02)
- [5]集菌涂片金胺“O”荧光染色法在检测痰液中抗酸杆菌的临床应用[J]. 樊晓东,陆兴热,张成伟,张青,资云菊,袁雕,叶树樱,王武满,朱德永,杨生仙. 中国医疗器械信息, 2018(18)
- [6]改良抗酸染色法在检测痰结核分枝杆菌中的应用[J]. 李玉雪,柳晓金,王薇,范蓉,安翠平. 标记免疫分析与临床, 2018(07)
- [7]抗酸杆菌自动染色和数字扫描系统的临床应用[J]. 陈永生,陈悦. 智慧健康, 2017(06)
- [8]缸染法抗酸染色显微镜方法检查抗酸杆菌结果分析[J]. 王敏娣,孙丽娜,梁慧,邱颖,陈然. 中外医疗, 2017(08)
- [9]涂阴肺结核支气管肺泡灌洗液和结核性胸水改良抗酸染色法的建立与应用评价[D]. 郑立恒. 北京市结核病胸部肿瘤研究所, 2016(02)
- [10]金胺“O”荧光染色LED显微镜检测痰中抗酸杆菌的应用[J]. 毛小芳,杨敏,谢英,魏云烁. 实验与检验医学, 2016(01)