一、骨密灵防治大鼠绝经后骨质疏松症的实验研究（论文文献综述）
刘晗念[1]（2020）在《青娥丸治疗绝经后骨质疏松症的meta分析》文中研究指明目的:搜集数据库从建库至2019年12月的已公开发表的青娥丸治疗绝经后骨质疏松的临床随机对照试验的中文文献,运用循证医学meta分析方法,探讨青娥丸治疗绝经后骨质疏松的临床疗效,观察其应用对临床检测指标的影响,为青娥丸治疗绝经后骨质疏松的的临床应用提供循证依据。方法:应用计算机网络系统,依次以“青娥丸”、“青娥方”、“青蛾丸”“绝经后骨质疏松”等为主题词、关键词进行全文检索,搜索从建库至2019年12月,在“中国知网CNKI”、“重庆维普VIP”、“万方全文数据库”、“中国生物医学文献数据库（CBM）”、“PubMed”公开发表的医学文献。按照规定的纳入及排除标准对文献进行阅读筛选,运用Cochrane系统评价方法对符合标准的文献进行质量评估。以纳入文献中的骨密度、主要临床症状积分、不良反应、VAS评分等为评价指标,使用Review Manger5.3软件进行Meta分析。结果:初步检索出可能符合纳入标准的文献共130篇,其中CNKI为36篇,万方医学为45篇,维普VIP为22,Pubmed为0篇,CBM为27篇。剔除重复文献90篇,对文章题目及摘要进行初步筛选,剔除文献18篇,初步得到纳入文献22篇,加上不符合纳入标准、排除无法提取数据的文献及不为随机对照试验文献后,最终纳入10篇文献。其中对照组为402例,试验组为403例。本文对青娥丸治疗绝经后骨质疏松症骨密度、VAS评分、中医证候积分表、不良反应进行系统的分析,结果如下:（1）各部位骨密度（腰椎、股骨颈、股骨大粗隆、ward’s三角骨密度）:[MD=0.05,95%CI[0.02,0.08],Z=3.37（P=0.0007）]、[MD=0.06,95%CI[0.02,0.10],Z=3.05（P=0.002）]、[MD=0.03,95%CI（-0.00,0.07）,P=0.07]、[MD=0.12,95%CI（0.05,0.18）,P=0.0003]。青娥丸治疗绝经后骨质疏松患者的腰椎、股骨颈、ward’s三角骨的骨密度值的增长具有积极与提升的作用;但青娥丸治疗股骨大粗隆骨密度与对照组无统计学差异,可能与样本量不足、文献质量偏低有关。（2）VAS评分:共有4篇纳入本研究,异质性检验P=0.43,I2=0%,说明纳入研究异质性小,结果统计时采用固定效应模型,合并效应量MD=-1.44,95%CI[-1.70,-1.18],Z=10.70（P<0.00001）,根据上述指标可以判定:与对照组患者相比,青娥丸可以显着改善绝经后骨质疏松患者的疼痛,差异有统计学意义。根据漏斗图表示,左右两边较对称,发表偏倚较小。（3）临床各症状评分（腰膝酸软、腰背疼痛、步履困难、下肢抽搐）:共有2篇纳入本研究,统计后经Meta分析显示:在腰背疼痛症状方面,MD=-0.42,95%CI（-0.56,-0.28）,Z=5.73,P<0.00001,差异具有统计学意义;在腰膝酸软无力症状方面,MD=-0.51,95%CI（-0.69,-0.34）,Z=5.72,P<0.00001,差异具有统计学意义;在下肢抽搐症状方面,MD=0.04,95%CI（-0.11,0.19）,Z=0.51,P=0.61,两组无统计学意义;在步履困难症状方面,MD=-0.27,95%CI（-0.45,-0.09）,Z=2.89,P=0.004,差异具有统计学意义。根据漏斗图表示,左右两边较对称,发表偏倚较小。（4）不良反应:共有5篇所纳入的数据之间异质性较低,即（P=0.94,I2=0%）,故采用固定效应模型分析。结果显示:两组间差异具无统计学意义,即[Z=1.11,OR=1.42,95%Cl（0.77,2.62）,P=0.27]。因试验组和对照组在统计学上无显着差异,故不行漏斗图分析。结论:（1）通过对青娥丸治疗绝经后骨质疏松的研究,现有证据表明青娥丸在提高绝经后骨质疏松患者的骨密度、缓解骨痛、改善中医主要临床症状的疗效较好,为临床提供循证依据。（2）同时本研究还发现,在控制不良反应方面,青娥丸与对照组在统计学上无意义,还需进一步研究。（3）根据纳入及排除标准后发现本研究所纳入的文献质量较低,样本量偏少,故对研究结果的可推性产生一定影响,故今后应多开展随机临床试验研究,特别是大规模、高质量、多中心的能更好的支持本研究结论。
李莉[2]（2020）在《六味地黄汤对绝经后骨质疏松症模型大鼠的早期干预作用》文中认为目的:观察六味地黄汤绝经后骨质疏松症模型大鼠的早期干预作用,研究六味地黄汤对绝经后骨质疏松症的早期干预作用及其机理,为延缓绝经后骨质疏松症的发生发展提供实验依据。方法:将6月龄SD雌性大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、六味地黄汤组、阿仑膦酸钠片组（阳性药物组）。除假手术外,其余各组大鼠均采用摘除双侧卵巢的方法制备绝经后骨质疏松症大鼠模型。在术后第5天开始,各组模型大鼠根据体重按相应的灌胃剂量给药至术后第90天。观察各组大鼠每周体重的变化,检测模型大鼠骨密度（BMD）值,血钙（Ca）、血磷（P）、血清雌二醇（E2）、碱性磷酸酶（ALP）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP）及骨钙素（BGP）水平,HE染色观察骨组织形态。结果:与模型组比较,六味地黄汤组可以显着提高模型大鼠BMD值及血清E2、Ca、P水平,降低血清ALP、BGP、TRACP水平,减少了骨小梁的断裂及骨髓腔中脂肪细胞的含量,并抑制了模型大鼠体重的持续过增而致的肥胖。结论:六味地黄汤对绝经后骨质疏松症的早期干预作用可以延缓该病的发生发展。其主要作用机理与六味地黄汤升高绝经后妇女体内雌激素水平,调节骨吸收与骨形成之间的平衡,降低血清中BGP、ALP、TRACP水平,来减缓骨矿中Ca、P的丢失速度,进而减少骨小梁的断裂及骨髓中脂肪细胞的含量,或抑制体重的过增而致的肥胖,延缓BMD值下降速度有关。
王庆谚[3]（2019）在《补肾益气活血方对绝经后骨质疏松症大鼠Wnt7b/β-catenin信号通路作用机制的研究》文中认为目的:系统论述肾虚血瘀与绝经后骨质疏松症的相关性,明确补肾益气活血治法及其方药对绝经后骨质疏松症的治疗效果及其作用机制,有助于阐明调节骨形成的新方法和开发有效的改善骨代谢的方剂,为临床防治绝经后骨质疏松症提供理论和实验依据。材料与方法:第一部分:理论研究通过文献整理及理论分析方法,从肾的精气、血、阴、阳方面论述其与骨的密切关系,阐释绝经后骨质疏松症的发病根本病机,并从来源和功能两方面论述肾精和骨髓间充质干细胞之间的相关性,进一步探究补肾益气活血为绝经后骨质疏松症的重要治法。第二部分:体内实验将90只SPF级SD雌性大鼠随机分为正常组、模型空白组、补肾益气活血方高剂量组、补肾益气活血方低剂量组、福善美组,共5组,每组各18只。采用一次性摘除大鼠双侧卵巢法建立绝经后骨质疏松症动物模型,正常组不进行手术。正常组和模型空白组大鼠给予0.9%生理盐水灌胃,其余各组给予相应药物灌胃,模型空白组及治疗组大鼠从手术结束后第二天开始给药,每日1次,共12周。在最后一次灌胃后,麻醉、开腹手术,从腹主动脉取血,以3000r/min离心15分钟,取血清,取出肾脏和左后肢股骨,用双能X线检测各组大鼠左后肢股骨骨密度,ELISA法检测大鼠血清ALP、TRACP表达,应用qRT-PCR法及ELISA法检测骨及肾组织Wnt7b、Axin2、Runx2 mRNA及蛋白表达,用Western法检测骨及肾组织Runx2、β-catenin蛋白表达。第三部分:体外实验实验药物:淫羊藿苷和地黄苷D分别为补肾中药淫羊藿和生地黄的有效成分,鹿茸提取液为本实验室用鹿茸冻干粉自制,黄芪甲苷为益气中药黄芪的有效成分,羟基红花黄色素A为活血中药红花的有效成分。实验将大鼠骨髓间充质干细胞分为以下9组:正常组、成骨诱导组、补肾组、益气活血组、补肾益气活血组、成骨诱导+DKK-1组、补肾+DKK-1组、益气活血+DKK-1组、补肾益气活血+DKK-1组。指标检测:用茜素红染色法观察第15d矿化结节形成,用qRT-PCR法检测Wnt7b、Axin2、Runx2 mRNA表达,ELISA法检测Wnt7b、Axin2、Runx2蛋白表达。结果:第一部分:理论研究绝经后骨质疏松症的根本病位在骨,肾虚血瘀为其常见证候之一,从“肾虚血瘀”立论,肾精亏虚,则肾之气血阴阳失调,因虚致瘀,骨髓不生,髓减骨枯,导致绝经后骨质疏松症的发病。补肾益气活血治法通过补肾调理气血,通过益气促进活血,两者相互协同,达到改善肾虚血瘀的病机变化,是防治绝经后骨质疏松症的有效治法。第二部分:体内实验1.骨密度结果显示:与正常组相比较,模型空白组左后肢股骨骨密度显着降低（P<0.01）,与模型空白组相比较,各治疗组骨密度均有不同程度的增高（P<0.01）。2.骨代谢指标结果显示:与正常组相比较,模型空白组血清ALP和TRACP水平明显升高（P<0.01）;与模型空白组相比较,各用药组血清ALP和TRACP水平均明显降低（P<0.01）,其中福善美组降低最明显,补肾益气活血方高剂量组次之（P<0.01）。3.qRT-PCR结果显示:与正常组相比较,骨及肾组织的模型空白组的Wnt7b、Axin2、Runx2的mRNA的相对表达量明显下调（P<0.05）;与模型空白组相比较,骨及肾组织的补肾益气活血方高剂量组和福善美组的Wnt7b、Axin2、Runx2的mRNA的相对表达量明显上调（P<0.05）;补肾益气活血方高剂量组与低剂量组相比较,骨及肾组织的Wnt7b、Axin2的mRNA的相对表达量明显上调（P<0.05）,肾组织的Runx2的mRNA相对表达量明显上调（P<0.05）,而骨组织的Runx2的mRNA相对表达量无显着差异（P>0.05）。4.ELISA结果显示:与正常组相比较,骨及肾组织的模型空白组的Wnt7b、Axin2、Runx2蛋白表达均明显下调（P<0.01）;与模型空白组相比较,骨及肾组织的补肾益气活血方高剂量组和福善美组的Wnt7b、Axin2、Runx2蛋白表达均明显上调（P<0.01）。5.Western结果显示:与正常组相比较,骨及肾组织的模型空白组的Runx2、β-catenin蛋白表达明显下调（P<0.05）;与模型空白组相比较,骨及肾组织的福善美组与补肾益气活血方高剂量组Runx2、β-catenin蛋白表达均明显上调（P<0.05）;补肾益气活血方高剂量组与低剂量组相比较Runx2、β-catenin蛋白表达明显上调（P<0.05）。第三部分:体外实验1.15d的茜素红染色结果显示:成骨诱导组的矿化结节数目最多,体积较其他组大;补肾组、益气活血组以及补肾益气活血组的矿化结节均较正常组多,且体积明显增大,其中以补肾益气活血组的矿化结节最多。成骨诱导组、补肾组、益气活血组和补肾益气活血组在加入DKK-1之后,矿化结节数量明显减少,体积偏小,矿化水平降低。2.qRT-PCR结果显示:与正常组相比较,成骨细胞在成骨诱导组、补肾益气活血组和补肾益气活血+DKK-1组的Wnt7b、Axin2和Runx2的mRNA相对表达量上调（P<0.05）;与成骨诱导组相比较,成骨细胞在成骨诱导+DKK-1组和益气活血+DKK-1组的Wnt7b mRNA相对表达量下调（P<0.05）,补肾组、益气活血组、成骨诱导+DKK-1组、补肾+DKK-1组和益气活血+DKK-1组的Axin2 mRNA相对表达量下调（P<0.05）,益气活血组、成骨诱导+DKK-1组和益气活血+DKK-1组的Runx2 mRNA相对表达量下调（P<0.05）;补肾组、益气活血组以及补肾益气活血组加入DKK-1后Wnt7b、Axin2和Runx2的mRNA相对表达量均下调（P<0.05）。3.ELISA结果显示:与正常组相比较,成骨细胞在成骨诱导组、补肾组和补肾益气活血组的Wnt7b、Axin2和Runx2蛋白表达上调（P<0.05）;与成骨诱导组相比较,成骨细胞在益气活血组、补肾益气活血组、成骨诱导+DKK-1组、补肾+DKK-1组、益气活血+DKK-1组和补肾益气活血+DKK-1组的Wnt7b、Axin2和Runx2蛋白表达下调（P<0.05）;补肾组、益气活血组以及补肾益气活血组加入DKK-1后Wnt7b、Axin2和Runx2的蛋白表达均下调（P<0.05）。结论:1.肾虚为绝经后骨质疏松症发病的根本病机,血瘀为绝经后骨质疏松症的关键病机。补肾益气活血治法及其复方通过益气补肾生精,促进气血运行,调节阴阳平衡,从而改善绝经后骨质疏松症肾虚血瘀的病机变化,标本兼顾,理论依据充分。2.补肾益气活血方可以提高绝经后骨质疏松症大鼠股骨骨密度,显着降低血清ALP和TRACP的表达水平,并呈剂量相关,表明补肾益气活血方能改善绝经后骨质疏松症大鼠骨密度及骨转换率,从而有效防治绝经后骨质疏松症。3.补肾益气活血方的作用机制是上调绝经后骨质疏松症大鼠骨和肾组织Wnt7b、Axin2及Runx2 mRNA及蛋白表达,且上调骨和肾组织的β-catenin蛋白表达,呈剂量相关,通过上调Wnt7b/β-catenin信号通路相关因子以促进成骨分化,从而对绝经后骨质疏松症起到防治作用。4.补肾益气活血有效组分功能配伍增强矿化结节的形成,可以促进BMSCs成骨分化,起到维持正常骨量的作用。5.补肾益气活血有效组分功能配伍能够上调Wnt7b/β-catenin信号通路中Wnt7b、Axin2以及Runx2 mRNA及蛋白表达以促进BMSCs成骨分化。
张方珍[4]（2015）在《五味子总木脂素对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及机理探讨》文中研究表明目的以去卵巢大鼠为骨质疏松症动物模型,观察五味子总木脂素对其的作用;并从对骨代谢具有重要调节作用的白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-11（IL-11）的角度,部分揭示其作用机理,为五味子总木脂素应用于治疗骨质疏松症提供实验依据。方法选用雌性SD大鼠92只,体重210±20g,SPF级,按体重随机分3组,空白对照组12只,假手术组12只,造模组68只。运用戊巴比妥钠45mg/kg对造模组大鼠进行麻醉后,摘除双侧卵巢;假手术组只摘除卵巢周围的少许脂肪组织,不切除卵巢。手术过程中有1只大鼠死亡。术后3周,再将造模组67只大鼠按体重随机分为5组:模型组12只;阳性对照组14只;五味子总木脂素小剂量组13只,中剂量组14只,大剂量组14只。分组后,开始对各给药组大鼠灌胃给药:五味子总木脂素小、中、大剂量组分别给予浓度为8.05mg/ml、16.1Omg/ml和32.20mg/ml的五味子总木脂素混悬液,给药体积为12ml/kg体重,给药剂量分别为96.6 mg/kg体重、193.2 mg/kg体重和386.4 mg/kg体重。阳性对照组灌胃给予浓度为0.015mg/ml的戊酸雌二醇（E2）溶液,给药体积为12ml/kg体重,给药剂量为0.18mg/kg体重。以上各组大鼠给药,每天1次,连续6天,休息1天后,再给药6天,如此给药13周。每周称体重一次,据此调整给药剂量。空白对照组、假手术组、模型组按上法灌胃给予等体积的1.07%吐温溶液。给药结束后,各组大鼠用45mg/kg剂量的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,处死各组大鼠之后,取左侧股骨运用 Skyscanl 174 X-Ray Microtomograph（micro-CT）进行骨组织形态指标检测,取右侧胫骨,制作脱钙冰冻切片,用于IL-6、IL-11蛋白及mRNA表达检测。实验结果皆以均数±标准差（x±s）表示,采用SPSS 20.0统计软件进行统计学处理。若数据为正态分布,则采用单因素方差分析进行处理:方差齐性的,组间两两比较采用LSD检验;方差不齐的则采用Dunnett’sT3检验。非正态分布的数据,采用Kruskal-Wallis 1-way ANOVA（k samples）进行检验:组间两两比较,采用 Stepwise step-down 法。结果1五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨组织形态指标的影响1.1五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨骨体积分数（BV/TV）的影响与假手术组比较,模型组、阳性对照组以及五味子总木脂素小、中、大剂量组大鼠股骨BV/TV均显着减少。与模型组比较,中剂量组、大剂量组和阳性对照组的BV/TV均显着增加;而小剂量组则无显着性变化。三个剂量组之间比较,中剂量组、大剂量组的BV/TV明显高于小剂量组;大剂量组与中剂量组比较,无显着性差异。1.2五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨骨小梁数量（Tb.N）的影响模型组、阳性对照组以及五味子总木脂素小、中、大剂量组大鼠股骨Tb.N显着少于假手术组。中剂量组、大剂量组和阳性对照组与模型组比较,Tb.N均显着增多;小剂量组与之比较,无显着性变化。三个剂量组之间比较,中剂量组、大剂量组与小剂量组比较,Tb.N显着增多;大剂量组与中剂量组比较,无显着性差异。1.3五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨骨小梁厚度（Tb.Th）的影响模型组、阳性对照组以及五味子总木脂素小、中、大剂量组与假手术组比较,大鼠股骨Tb.Th均显着减少。与模型组比较,中剂量组、大剂量组以及阳性对照组的Tb.Th显着增加;而小剂量组无显着性变化。三个剂量组之间比较,中剂量组、大剂量组的Tb.Th较小剂量组显着增加;大剂量组与中剂量组比较,无显着性差异。1.4五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨骨小梁分离度（Tb.SP）的影响与假手术组比较,模型组、阳性对照组以及五味子总木脂素小、中、大剂量组大鼠股骨Tb.SP均显着增加。中剂量组、大剂量组以及阳性对照组与模型组比较,Tb.SP显着减少;小剂量组与之比较,无显着性变化。三个剂量组之间比较,中剂量组、大剂量组的Tb.SP均明显少于小剂量组;大剂量组与中剂量组比较,无显着性差异。1.5五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨结构模型指数（SMI）的影响模型组、阳性对照组以及五味子总木脂素小、中、大剂量组大鼠股骨SMI较假手术组明显增加。与模型组比较,中剂量组、大剂量组和阳性对照组的SMI明显减少;而小剂量组无显着性差异。三个剂量组之间比较,中剂量组、大剂量组与小剂量组比较,SMI均明显减少;大剂量组与中剂量组比较,无显着性差异。2五味子总木脂素对去卵巢大鼠胫骨骨髓中IL-6蛋白及其mRNA表达的影响与假手术组比较,模型组、五味子总木脂素小剂量组大鼠胫骨骨髓中IL-6蛋白及其mRNA表达IOD（积分光密度）均显着增高;而中剂量组、大剂量组和阳性对照组的IL-6蛋白表达IOD无显着差异;中剂量组的IL-6mRNA表达IOD显着增高,但大剂量组和阳性对照组的IL-6 mRNA表达IOD无显着性差异。与模型组比较,中剂量组、大剂量组和阳性对照组的IL-6蛋白及其mRNA表达IOD均明显降低;小剂量组的则均无显着性差异。三个剂量组之间比较,中剂量组、大剂量组的IL-6蛋白及其mRNA表达IOD均明显低于小剂量组;大剂量组与中剂量组比较,无显着性变化。3五味子总木脂素对去卵巢大鼠胫骨骨髓中IL-11蛋白及其mRNA表达的影响与假手术组比较,模型组、五味子总木脂素小、中剂量组大鼠胫骨骨髓中IL-11蛋白及其mRNA表达IOD均明显增高;大剂量组的IL-11蛋白表达IOD明显增高,而其mRNA表达IOD无显着性差异;阳性对照组的IL-11蛋白及其mRNA表达IOD均无显着性差异。中剂量组、大剂量组以及阳性对照组的IL-11蛋白及其mRNA表达IOD均低于模型组;小剂量组与之比较均无显着性差异。三个剂量组之间比较,中剂量组、大剂量组的IL-11蛋白及其mRNA表达IOD均较小剂量组显着降低;大剂量组与中剂量组比较,均无显着性变化。结论（1）切除大鼠卵巢可使其股骨BV/TV、Tb.Th和Tb.N显着减少,使Tb.SP和SMI显着增加;而五味子总木脂素可使以上指标在一定程度上发生逆转。表明五味子总木脂素对去卵巢所致的大鼠骨质疏松症具有治疗作用。（2）五味子总木脂素可使去卵巢所致的大鼠骨髓中增强的IL-6和IL-11蛋白表达减弱,表明该药可通过抑制骨髓中IL-6和IL-11的合成和分泌而达到治疗骨质疏松症的作用。
陈怿爽[5]（2017）在《基于TGF-β/Smad信号通路补肾活血方防治大鼠骨质疏松症的机制研究》文中认为目的 通过动物实验观察补肾活血方对去势大鼠TGF-β/Smad信号通路影响,探究补肾活血方防治骨质疏松症的作用机制。方法 本实验将60只3月龄SD雌性大鼠随机分成补肾活血组、阿仑膦酸钠组、模型组与假手术组四组,每组15只,前三组行双侧卵巢切除术（VOX）,假手术组则行假手术处理,饲养3月后,每组随机抽取1只样本进行病理观察确认造模成功。完成造模后,模型组与假手术组予生理盐水,补肾活血组和阿仑膦酸钠组分别给予对应药物,均灌胃12周后处死,分别检测血清钙（Ca）、磷（P）、碱性磷酸酶（ALP）、雌激素（E2）和骨钙素（BGP）,腰椎行最大承载力检测,右侧股骨检测骨密度并行组织切片HE染色观察,左侧股骨通过RT-PCR检测TGF-β、Smad2、Smad3、OPG、RANKL 的 mRNA 水平。结果 动物实验的结果显示,补肾活血组大鼠较模型组能够显着提高去势大鼠血清Ca、P、E2及骨形成标志物ALP和BGP的水平（P<0.01）,与阿仑膦酸钠组大鼠作用相似,能改善骨组织病理状况,显着提高右侧股骨骨密度及腰椎承载力,从而改善骨质疏松的状况。补肾活血方能有效的激活TGF-β/Smad信号通路中TGF-β、Smad2、Smad3的mRNA水平（P<0.05）,并且能提高OPG的mRNA水平和OPG/RANKL的比值（P<0.05）。结论 补肾活血方能够明显改善去势大鼠的骨质疏松状况,并获得近似阿仑膦酸钠的疗效;补肾活血方可以通过TGF-β/Smad信号通路发挥抗骨质疏松的作用,并且能提高OPG的mRNA水平。补肾活血方具有类雌激素样效应,并且能激活TGF-β信号通路,这可能是补肾活血方预防和治疗骨质疏松的机制。
孟玥[6]（2016）在《左、右归丸及其拆方干预去卵巢大鼠肾脏TGF-β1/Smads信号通路的研究》文中提出目的:本研究基于中医学“肾主骨”理论,从TGF-β1/Smads信号通路研究左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠肾脏相关成骨、成脂分化指标的影响,探讨中医学“肾”与“骨”的相关性。材料与方法:SPF级2月龄雌性未生育SD大鼠90只,按体重随机分层,分别为正常组10只,假手术组10只,去卵巢模型组70只。去卵巢模型组采用双侧背部卵巢切除术制备模型,假手术组则只去除卵巢周围部分脂肪组织,造模7 d后,将术后成活的去卵巢模型组大鼠按体重随机分层为7组,即正常组（Control）,假手术组（Sham）,模型组（OVX）,补佳乐组（BJL）,左归丸组（ZGW）,右归丸组（YGW）,共同药组（GTY）,滋阴药组（ZYY）,补阳药组（BYY）。各治疗组灌服对应药物,正常组、假手术组、模型组灌服蒸馏水。经12 w给药治疗后,除因手术灌胃等原因死亡,总共纳入大鼠76只取材进行指标检测。取材前禁食不禁水24 h,末次给药2 h后称重并麻醉,取大鼠股骨用去离子水浸湿的纱布包裹并置于﹣80℃冻存,用于双能X线骨密度检测;取大鼠肾脏和股骨近端1/3部分,剥离附着的肌肉筋膜及结缔组织,固定（脱钙）数周后制做石蜡切片,用于形态学HE检测;麻醉前用电子天平测量大鼠体重并记录,取大鼠肾脏,剥除肾脏被膜及周围脂肪组织,用扭力天平测其湿重,以备进行肾脏指数的计算;取大鼠肾脏,剥除肾脏被膜及周围脂肪组织,于﹣80℃冻存,用于实时荧光定量PCR法检测大鼠肾脏Runx2、CollagenⅠ、ALP、BGP、PPARγ、FABP4、TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad1、Smad2、Smad4的基因表达情况;用蛋白印记法检测大鼠肾脏Runx2、CollagenⅠ、ALP、BGP、PPARγ、FABP4、TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad1、Smad2、Smad4的蛋白表达情况;取大鼠肾脏,固定数周后制成石蜡切片,以备Runx2、CollagenⅠ、ALP、BGP、PPARγ、FABP4指标的免疫组化检测。结果:1.左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠骨密度影响与正常组相比,除假手术组外,各组大鼠骨密度均有下降,模型组大鼠全股骨骨密度指数降低明显（P﹤0.01）;给药12 w后,与模型组比较,各用药组的骨密度指数均有所提高,差异有统计学意义（P﹤0.05或P﹤0.01）,其中补佳乐组、左归丸组效果较好,右归丸组虽亦有统计学差异（P﹤0.01）,但其水平较补佳乐组、左归丸组低,其他给药组结果差异无统计学意义。2.左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠骨组织形态学的影响研究结果表明,正常组和假手术组可见骨小梁排列紧密规则,形态结构完整,骨小梁之间呈网状连接,骨小梁表面可见较多整齐的、呈单行排列的成骨细胞,骨髓腔相对较小;而模型组骨小梁总量明显减少,结构较为稀疏,连接性差,排列不规则,出现大量骨小梁盲端,小梁壁的厚度不一致,骨小梁表面成骨细胞数目也明显较少,见大量体积大、形态不规则、多核的破骨细胞,骨髓腔增大;各给药组经给药12 w后,骨小梁数目均有不同程度的增加、骨小梁面积增大、增宽,结构排列形态与空白组较为接近,小梁间连接呈网状,骨髓腔缩小,其中补佳乐组、左归丸组效果明显。3左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠肾脏指数的影响与正常组比较,模型组左、右及总肾脏指数均有降低,有显着性差异（P﹤0.01）,各用药组较正常组亦下降,差异有统计学意义（P﹤0.05）;与模型组比较,各用药组肾脏指数均有所提高,左肾指数中左归丸组与右归丸组提高较为明显（P﹤0.05）,右肾指数和两肾脏指数中的左归丸组、右归丸组、滋阴药组有所提高,有统计学差异（P﹤0.01）;与补佳乐组比较,各用药组肾脏指数均低于补佳乐组,共同药组、补阳药组差异有统计学意义（P﹤0.05）,左归丸组与右归丸组较补佳乐组差异不明显。4左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠肾脏组织形态学的影响研究结果表明,正常组、假手术组肾小球与肾小囊脏层紧密相连,结构清晰完整,近曲小管结构清晰;模型组可见肾小体结构紊乱,无法区别肾小球与肾小囊,肾小体管状结构被破坏;补佳乐组、左归丸组、右归丸组、滋阴药组均可见肾小体结构清晰完整,共同药组、补阳药组肾小体结构比较完整。5左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠肾脏Runx2、CollagenⅠ、ALP、BGP的影响免疫组化方法检测结果表明:正常组、假手术组肾小球与肾小囊脏层紧密相连,结构清晰完整,近曲小管结构清晰,在其管状断面可见ALP、BGP阳性表达,呈深棕黄色,未见核阳性细胞,较远曲小管染色深,ALP、BGP阳性表达明显。肾小球、肾小管间质可见Runx2、CollagenⅠ阳性表达;模型组可见肾小体结构紊乱,无法区别肾小球与肾小囊,肾小体管状结构被破坏,其管状断面细胞ALP、BGP染色不明显,远曲小管基本无染色,肾小球、肾小管间质Runx2、CollagenⅠ染色不明显;补佳乐组、左归丸组、右归丸组、滋阴药组均可见肾小体结构清晰完整,共同药组、补阳药组肾小体结构比较完整,近曲小管管状断面ALP、BGP阳性染色细胞数量有不同程度的增加,肾小球、肾小管间质Runx2、CollagenⅠ阳性染色细胞数量亦有所增加,其中以左归丸组阳性染色增加最为明显。基因检测结果表明:与正常组比较,模型组大鼠肾脏Runx2、CollagenⅠ、ALP、BGP基因的表达量均降低（P﹤0.01）;与模型组比较,补佳乐组、左归丸组、右归丸组大鼠肾脏Runx2、CollagenⅠ、ALP、BGP基因表达量有所提高（P﹤0.01）;与补佳乐组比较,各给药组的Runx2、CollagenⅠ、ALP、BGP基因的表达量均降低（P﹤0.01）,其中左归丸组表达量较其他给药组高。蛋白表达检测结果显示:与正常组比较,模型组肾脏Runx2、CollagenⅠ、ALP、BGP的蛋白表达量降低（P﹤0.01）;给药12周后,与模型组比较,各给药组的Runx2、CollagenⅠ、ALP、BGP蛋白表达有所提高,有统计学差异（P﹤0.01）;与补佳乐组比较,各给药组的Runx2、CollagenⅠ、ALP、BGP蛋白表达均有所降低,其中左归丸组较其他手术组高。6左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠肾脏PPARγ、FABP4的影响免疫组化方法检测结果表明:PPARγ:正常组、假手术组肾小球与肾小囊脏层紧密相连,结构清晰完整,近曲小管结构清晰,内髓集合管未见深棕黄色阳性表达;模型组可见肾小体结构紊乱,无法区别肾小球与肾小囊,肾小体管状结构被破坏,内髓集合管呈高水平表达;补佳乐组、左归丸组、右归丸组、滋阴药组均可见肾小体结构清晰完整,共同药组、补阳药组肾小体结构比较完整,内髓集合管中阳性染色细胞数量有不同程度的增加。FABP4:观察肾髓质以及近髓皮质部位。正常组、假手术组肾小球与肾小囊脏层紧密相连,结构清晰完整,近曲小管结构清晰,内皮细胞的胞浆和胞核未见深棕黄色阳性表达;模型组可见肾小体结构紊乱,无法区别肾小球与肾小囊,肾小体管状结构被破坏,内皮细胞的胞浆和胞核呈高水平表达;补佳乐组、左归丸组、右归丸组、滋阴药组均可见肾小体结构清晰完整,共同药组、补阳药组肾小体结构比较完整,内皮细胞的胞浆和胞核中阳性染色细胞数量有不同程度的增加。基因检测结果表明:与正常组比较,模型组组肾脏PPARγ、FABP4基因的表达量升高,有显着性差异（P﹤0.01）;与模型组比较,各给药组的PPARγ、FABP4基因的表达量均降低,差异有统计学差异（P﹤0.01）;与补佳乐组比较,各给药组的PPARγ、FABP4基因的表达量均高于补佳乐组,左归丸组表达量较其他给药组低。蛋白表达检测结果显示:与正常组比较,模型组组肾脏PPARγ、FABP4蛋白的表达量升高,有显着性差异（P﹤0.01）;给药12周后,与模型组比较,各给药组的PPARγ、FABP4蛋白的表达量均降低,差异有统计学差异（P﹤0.01）;与补佳乐组比较,各给药组的PPARγ、FABP4蛋白的表达量均高于补佳乐组,左归丸组表达量较其他给药组低。7左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠肾脏TGF-β1/Smads信号通路的影响基因检测结果表明:与正常组比较,模型组组肾脏TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad1、Smad2、Smad4基因的表达量降低,有显着性差异（P﹤0.01）;给药12周后,与模型组比较,各给药组的TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad1、Smad2、Smad4基因的表达量均升高,差异有统计学意义（P﹤0.01）;与补佳乐组比较,各给药组的TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad1、Smad2、Smad4基因的表达量均低于补佳乐组,差异有统计学意义（P﹤0.01）,其中左归丸组表达量较其他给药组高。蛋白表达检测结果显示:与正常组比较,模型组组肾脏TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad1、Smad2、Smad4蛋白的表达量降低,有显着性差异（P﹤0.01）;给药12周后,与模型组比较,各给药组TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad1、Smad2、Smad4蛋白的表达量均升高,差异有统计学差异（P﹤0.01）;与补佳乐组比较,各给药组的TGF-β1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad1、Smad2、Smad4蛋白的表达量均低于补佳乐组,差异有统计学意义（P﹤0.01）,其中左归丸组表达量较其他给药组高。结论:1大鼠去卵巢后,骨密度降低,骨微结构破坏,绝经后骨质疏松模型复制成功;实验大鼠肾脏指数均有不同程度降低,肾脏形态改变,说明绝经后骨质疏松症的发生会对肾脏造成一定影响。2大鼠去除双侧卵巢后,肾脏中的Runx2、CollagenⅠ、ALP、BGP基因和蛋白的含量降低,而这些指标与成骨分化相关,提示成骨标志性指标在肾脏中的变化可以作为评价骨代谢的参考指标。3大鼠去除双侧卵巢后,肾脏中脂代谢相关指标PPARγ、FABP4基因和蛋白的表达水平明显升高,提示绝经后骨质疏松症发生会对肾脏中脂代谢产生影响。4左、右归丸及其拆方均可以调节去卵巢大鼠肾脏中成骨、成脂分化相关指标,共同药组的治疗效果较其他四组最差,滋阴药组、补阳药组的治疗效果其次,左归丸与右归丸干预效果较共同药、单纯滋阴、单纯补阳效果更佳,其中左归丸的疗效最为突出。5绝经后骨质疏松症的发生机制与成骨、成脂平衡失衡有关,左、右归丸及其拆方可抑制肾脏中成脂分化指标表达,同时促进成骨相关指标的表达,提示左、右归丸及其拆方防治绝经后骨质疏松的机制可能与调控肾脏中成骨分化与成脂分化相关指标的平衡有关,以左归丸组效果更为突出。6 TGF-β1/Smads信号通路与成骨分化、成脂分化均有相关性,左、右归丸及其拆方抑制肾脏中成脂分化、促进成骨相关指标的表达其机制可能是通过调节TGF-β1/Smads信号通路而实现的,这为基于中医学“肾主骨”理论来探讨“肾”与“骨”相关性提供了一定的实验依据。
朱元元[7]（2014）在《伤科益肾壮骨丸与阿仑膦酸钠联合治疗绝经后骨质疏松症的临床观察》文中提出绝经后骨质疏松症是绝经后妇女易患常见病、多发病之一，目前，其发病机制尚未完全明确。近年来经过临床研究及动物实验，大多数学者认为其的发病与绝经后妇女的卵巢机能衰退有关，致使雌激素水平低下，骨偶联异常即骨吸收过程胜过骨形成过程，是本病发病的主要机理。目前，治疗绝经后骨质疏松症药物虽然较多，包括促进骨形成剂及抑制骨吸收剂两大类，但常常因为疗效不甚满意及毒副作用，临床上较少单独使用。经过大量的临床试验及动物实验表明，中医中药补肾健脾法治疗骨质疏松症疗效确切，且副作用小。而中西结合治疗骨质疏松症在治疗中疗效满意，毒副作用小，越来越受关注。本研究主要观察伤科益肾壮骨丸与阿仑膦酸钠联合治疗绝经后骨质疏松症临床疗效。目的通过临床观察伤科益肾壮骨丸与阿仑膦酸钠联合治疗绝经后骨质疏松症患者疼痛缓解率，观察骨密度平均值水平、性激素水平的变化，并与单独应用阿仑膦酸钠相对比，从而探讨伤科益肾壮骨丸与阿仑膦酸钠联合治疗绝经后骨质疏松症临床疗效及安全性，并探讨伤科益肾壮骨丸对性激素的影响。方法本研究对象为自2012年1月至2013年6月期间至荆州市中医医院门诊就治108例绝经2年以上骨质疏松症患者，所选取患者符合本研究纳入标准并在半年内未使用影响骨代谢药物，按随机原则分研究组和对照组，研究组55例，对照组53例。研究方法为：对照组只单独给予阿仑膦酸钠片口服治疗；研究组在前面基础上，另加用荆州市中医医院自制中成药--伤科益肾壮骨丸口服治疗，两组研究对象连续治疗6个月。通过治疗后，对两组受试对象治疗后临床疗效、疼痛缓解有效率、骨密度平均值、性激素平均值水平进行对比，并进行统计学分析。结果1.治疗后，两组受试对象疼痛均得到不同程度的缓解。治疗后1月，研究组在疼痛缓解有效率、显效率较对照组相比差异明显（P<0.05），研究组明显高于对照组；在治疗后6个月，两组受试对象在疼痛缓解有效率上相比，差异不明显（P>0.05），不具有统计学意义，研究组较对照组在疼痛缓解有效率方面优势不明显，但仍高于对照组。说明伤科益肾壮骨丸与阿仑膦酸钠联合治疗较单独使用阿仑膦酸钠疼痛缓解起效快效果好。2.治疗后，研究组与对照组在次要症状的改善方面相比，差异明显（P<0.05），具有统计学意义，说明伤科益肾壮骨丸与阿仑膦酸钠联合治疗在改善次要症状要明显高于单纯使用阿仑膦酸钠。3.两组通过对骨密度水平比较，治疗后两组骨密度均有所增加，而研究组骨密度增加与对照组相比差异明显（P<0.05），说明伤科益肾壮骨丸与阿仑膦酸钠联合使用较单独应用阿仑膦酸钠在增加患者骨密度水平优势明显。4.治疗后，研究组治疗后性激素水平明显增加，与治疗前相比差异明显（P<0.05），具有统计学意义；对照组在治疗前与治疗后性激素水平平均值相比差异不明显（P>0.05），差异不具有统计学意义；研究组与对照组在治疗后性激素水平差异明显（P<0.05），具有统计学意义。证明伤科益肾壮骨丸通过补肾治疗能提高机体性激素水平。5.治疗后，两组均取得比较满意的疗效。研究组治疗后显效率与对照组显效率相比，差异明显（P<0.05），具有统计学意义，研究组显效率明显优于对照组；研究组总有效率较对照组总有效率高，经检验，差异不明显（P>0.05），不具备统计学意义。说明伤科益肾壮骨丸与阿仑膦酸钠联合治疗绝经后骨质疏松症较单独应用安仑膦酸钠临床疗效优势明显。结论伤科益肾壮骨丸与阿仑膦酸钠联合治疗绝经后骨质疏松症疗效确切，使用安全，伤科益肾壮骨丸能增加绝经后骨质疏松症患者性激素水平。
卞玉群[8]（2014）在《补肾法治疗原发性骨质疏松症的理论与实验研究》文中进行了进一步梳理目的：全面梳理和总结古今中医学家对原发性骨质疏松症病因病机、治则治法的认识,系统整理和研究古今医学文献中治疗原发性骨质疏松症有效方剂的配伍方法,探析古今医家应用补肾法治疗原发性骨质疏松症的遣药制方规律,观察经典补肾方剂左归丸、右归丸对原发性骨质疏松模型大鼠的干预作用,揭示补肾法治疗原发性骨质疏松症的药效以及部分作用机制,为进一步深入研究中医药对于骨质疏松症的防治作用提供参考。方法：1.理论探讨：根据自秦汉至清代70余部古代医籍和1990年以来中医药期刊中公开发表的关于原发性骨质疏松症病因病机与治法方药的文献记载,探寻中医学对于原发性骨质疏松症的认识发展脉络,总结古今医家运用补肾法治疗原发性骨质疏松症的证治源流。2.统计分析：建立治疗骨质疏松症的有效方剂数据表（包含114首古方及308首现代方）,运用Rapidminer软件统计药物频次并作关联分析,探索补肾药物在治疗原发性骨质疏松症方剂中的配伍应用。3.动物实验：采用摘除卵巢方法建立大鼠原发性骨质疏松模型,从病理形态学、骨密度、血清骨代谢等多方面观察经典补肾方剂左归丸、右归丸对于上述模型的干预作用。结果：1.源流探析：中医药治疗骨质疏松症源远流长,秦汉时期医家创立肾主骨理论,奠定补肾壮骨大法；隋唐时期提出养肝强筋骨,开拓精血并补思路；宋金元时期重视补脾益精髓,主张预防治疗并举；明清时期承袭补虚以养骨,尤重活血祛瘀通络；现代中医制定明确的诊断标准,初步构建辨治体系。其中补肾壮骨治法贯穿始终,体现了治疗骨质疏松症的根本大法。2.常用药物：古代方剂共使用药物1266味次,涉及药物162味,现代方剂共计使用药物3090味次,涉及药物172味。用药多集中在补虚、活血化瘀、温里、利水渗湿、祛风湿、收涩、清热、解表等方面。古方中排名前三位的为补虚药43.29%、温里药9.56%、活血化瘀药7.66%。今方中前三位为补虚药59.00%、活血化瘀药15.21%、祛风湿药5.24%。其中补肾益精的药物所占比例最重,熟地黄、杜仲、淫羊藿、鹿角、肉苁蓉、菟丝子、补骨脂、巴戟天、川断等出现频率较高；辅以健脾益气,黄芪、人参、山药、白术、党参较为多见；兼滋养肝肾、补益阴血,枸杞子、龟板、女贞子、当归最为常用；活血化瘀药以牛膝、川芎、骨碎补、丹参多见；温里助阳药附子、肉桂较为常见；祛风胜湿药多用狗脊、桑寄生、独活、威灵仙。3.配伍规律：古代方剂中频繁出现有杜仲与牛膝、熟地黄与牛膝、肉桂与熟地黄等两味药的集合,以及杜仲、肉桂、牛膝；熟地黄、杜仲、牛膝等多味药的集合,其中大多数以熟地黄、牛膝为核心药物出现；今方数据表中频繁出现的有淫羊藿与熟地黄、杜仲与熟地黄、黄芪与淫羊藿等两味药的集合,以及淫羊藿、当归、熟地黄；山药、山茱萸、熟地黄等多味药的集合,其中多以熟地黄、淫羊藿、山药为核心药物出现。古今方中均以熟地黄为核心药物出现的频率最高。关联规则中出现频率较高药物如地黄、杜仲、当归、山药、山茱萸、牛膝、鹿角、菟丝子、茯苓、川断、枸杞子、龟板、人参、附子、肉桂、黄芪、淫羊藿等,大多可以看作是六味地黄丸、左归丸、右归丸加减变化而成。4.实验观察：通过摘除卵巢成功的复制原发性骨质疏松大鼠模型,采取经典补肾方剂左归丸、右归丸予以干预,发现补肾方剂可以改善模型大鼠的病理形态,提高骨密度,降低血清骨碱性磷酸酶、骨钙素的水平,同时升高血清骨保护素的含量。结论：1.中医药治疗骨质疏松症有着悠久的历史,积累了丰富的经验。以补肾壮骨为主,随证辅以养肝健脾、活血通络,是原发性骨质疏松症的治法特点。2.古今文献中治疗骨质疏松症的方剂多以熟地黄、牛膝、淫羊藿、山药为主要组成,配伍方法体现了六味地黄丸、左归丸、右归丸的加减变化。3.补肾方剂左归丸、右归丸可以不同程度的改善摘除卵巢骨质疏松大鼠模型的病理形态,提高骨密度,改善血清生化指标,其防治骨质疏松症的机制可能是通过抑制摘除卵巢大鼠的高转换状态来实现。
吴树鑫[9]（2012）在《补肾活血法联合阿仑膦酸钠对绝经后骨质疏松症的疗效观察》文中提出目的：本课题以补肾活血法为原则,临床观察补肾活血汤辨证加减联合阿仑膦酸钠治疗对绝经后骨质疏松症患者骨痛与骨代谢生化指标的影响,并与单独阿仑膦酸钠治疗比较,探讨提高绝经后骨质疏松症疗效之途径,最终为补肾活血法防治绝经后骨质疏松症,提供实验依据和应用价值。方法：选择经临床检查确诊为绝经后骨质疏松症,有腰背疼痛症状的患者且愿意加入临床试验研究,共60例,随机分为试验组（联合治疗组）,对照组（阿仑膦酸钠组）。试验组：根据临床症状,对补肾活血汤随证加减联合阿仑膦酸钠治疗；对照组：阿仑膦酸钠治疗。观察治疗不同阶段后镇痛有效率；并采用酶联免疫吸附法测定治疗前与治疗12周后血清骨碱性磷酸酶、骨钙素、抗酒石酸酸性磷酸酶、尿脱氧吡啶啉排泄率,并进行统计学分析比较。结果：1、两组治疗后都能有效缓解患者腰背疼痛,治疗4周后试验组镇痛总有效率与对照组比较,P<0.05,有统计学意义；治疗8周、12周后,比较无统计学差异,但显效率、总有效率绝对值仍大于对照组。2、试验组与对照组治疗前B-ALP、 BGP、TRACP5b、DPD排泄率比较,P>0.05,无统计学意义,说明根据入选病例随机分组合理,两组具有可比性。3、试验组治疗前后B-ALP比较,P<0.05, BGP比较,P<0.01,均具有统计学意义;TRACP5b比较,P<0.01, DPD排泄率比较,P<0.01,均具有显着性差异；4、对照组治疗前后B-ALP比较,P<0.05, BGP比较,P<0.01; TRACP5b比较,P<0.01, DPD排泄率比较,P<0.05,各生化指标均有统计学差异；5、两组治疗后B-ALP、BGP （?）匕较,P>0.05,无统计学意义；TRACP5b、 DPD排泄率比较P>0.05,无统计学意义,但从绝对值趋势看,试验组各生化指标均比对照组更低些。结论：1、补肾活血汤辨证加减联合阿仑膦酸钠治疗,与单用阿仑膦酸钠治疗相比,两组均能够有效地改善绝经后骨质疏松症患者骨代谢生化指标,保持适度的骨转换,调节平衡骨代谢；但中药辨证加减联合阿仑膦酸钠治疗,在缓解患者骨痛症状方面显效更快更佳,并且从治疗后各生化指标的绝对值来看,两者联用比单用阿仑膦酸钠治疗更具有优越性。2、运用补肾活血法辨证施治,能改善机体脏腑整体功能,以补肾壮骨、改善微循环为手段,与阿仑膦酸钠联用,能有效预防和治疗绝经后骨质疏松症,尤其在改善骨痛方面。
蹇顺华[10]（2011）在《补肾化痰方对骨质疏松大鼠成骨作用影响的实验研究》文中指出目的：本研究课题拟通过补肾化痰方和利维爱对去卵巢骨质疏松模型大鼠的对比研究,观察去卵巢骨质疏松模型大鼠离体骨密度,血清骨钙素N端中分子片段、25羟维生素D、I型前胶原羧基端前肽,骨髓细胞中BGPmRNA、Cbfa1mRNA表达,骨组织中BMP-2和TGF-β1表达来探讨补肾化痰方对去卵巢骨质疏松模型大鼠的治疗作用及作用机制。材料与方法：实验采用切除双侧卵巢的方法,建立大鼠骨质疏松模型。实验动物被分为假手术组、手术模型组、西药治疗组、补肾化痰方中剂量组和补肾化痰方高剂量组。手术三个月后开始灌胃,持续两个月,并用西药利维爱作为对照治疗,假手术组和手术模型组等量生理盐水灌胃。所有大鼠在灌胃两个月后被处死,用双能X线骨密度仪检测大鼠离体骨密度,酶联免疫分析法检测大鼠血清中骨钙素N端中分子片段、25羟维生素D、I型前胶原羧基端前肽水平,RT-PCR方法观察大鼠骨髓细胞中BGPmRNA、Cbfa1mRNA表达,HE方法观察大鼠骨组织形态学变化,免疫组化方法观察大鼠骨组织中BMP-2和TGF-β1表达。结果：1、各实验组大鼠离体股骨骨密度比较：与假手术组相比,手术模型组大鼠离体股骨骨密度显着下降,差异有显着性意义；而补肾化痰方中剂量组、补肾化痰方高剂量组和西药治疗组股骨骨密度水平均显着高于手术模型组,差异有显着性意义；中药高剂量组与假手术组比较,差异无统计学意义。2、各实验组大鼠血清骨代谢生化指标比较：和假手术组相比,手术模型组大鼠的血清骨钙素N端中分子片段水平明显升高,差异有显着性意义,而补肾化痰方中剂量组、补肾化痰方高剂量组和西药治疗组大鼠的血清骨钙素N端中分子片段水平均显着低于手术模型组,.差异有统计学意义。在25羟维生素D和I型前胶原羧基端前肽这两个指标方面,手术模型组大鼠血清中的含量显着低于假手术组,差异有统计学意义,而补肾化痰方中剂量、补肾化痰方高剂量和西药利维爱均能显着提升大鼠血清中25羟维生素D和Ⅰ型前胶原羧基端前肽含量。3、各实验组大鼠骨髓细胞中BGPmRNA、Cbfa1mRNA表达比较：RT-PCR检测显示,手术模型组大鼠骨髓细胞中BGPmRNA、Cbfa1mRNA表达水平显着低于假手术组,差异有显着性意义；与手术模型组比较,补肾化痰方中剂量组、补肾化痰方高剂量组和西药治疗组大鼠骨髓细胞中BGPmRNA、Cbfa1mRNA表达水平显着高于手术模型组,差异有统计学意义。4、各实验组大鼠骨组织形态学比较：骨组织HE染色显示,假手术组骨小梁粗大宽厚,形态结构完整,分布均匀,相互连接成网络结构,排列规则,骨小梁未见中断,边缘光滑,各骨小梁之间的间隙小；而模型组与假手术组相比,骨小梁明显显得纤细,连接点少,形态结构不完整,边缘粗糙,且骨小梁分布稀疏零乱,游离末端增多断裂严重,骨小梁间间距较大,出现典型的骨质疏松病理形态改变,说明双侧卵巢切除法已成功复制出大鼠骨质疏松模型。而西药治疗组、补肾化痰方中剂量组和补肾化痰方高剂量组在骨小梁的数量、宽度、完整性方面均明显优于模型组。5、各实验组大鼠骨组织中BMP-2和TGF-β1表达比较：TGF-β1和BMP-2表达主要在定位于骨小梁附近的成骨细胞,在成骨细胞的胞浆中呈阳性显色。在TGF-β1阳性表达方面,假手术组、西药治疗组、中药中剂量组、中药高剂量组在累积光密度值上明显强于手术模型组,经统计学比较,差异有非常显着性意义；中药高剂量组与假手术组、西药治疗组、中药中剂量组比较,差异均没有统计学意义。而在BMP-2阳性表达方面,相比手术模型组,假手术组、西药治疗组、中药中剂量组、中药高剂量组在累积光密度值上均明显增高,经统计学比较,差异有非常显着性意义；中药高剂量组与假手术组、西药治疗组、中药中剂量组比较,差异均没有统计学意义。结论：去卵巢后形成的实验性骨质疏松大鼠模型,其骨密度明显降低,血清中25（OH）VD、PICP水平明显降低,N-MID水平明显升高,BGPmRNA. Cbfa1mRNA表达水平显着降低,BMP-2和TGF-β1表达水平显着低于假手术组,出现了典型的骨质疏松症。实验结果表明,补肾化痰方具有升高去卵巢大鼠骨密度,降低血清N-MID水平,升高25（OH） VD、PICP水平,上调骨髓细胞中BGPmRNA、CbfalmRNA表达,上调骨组织中BMP-2和TGF-β,表达水平,减轻去卵巢大鼠的骨质疏松程度。实验证明,补肾化痰方能升高大鼠骨密度,改善大鼠骨髓微环境,增加有利于骨形成的细胞因子,从而发挥治疗骨质疏松的作用。
二、骨密灵防治大鼠绝经后骨质疏松症的实验研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、骨密灵防治大鼠绝经后骨质疏松症的实验研究（论文提纲范文）
（1）青娥丸治疗绝经后骨质疏松症的meta分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 1.资料与方法 |
| 1.1 文献检索策略 |
| 1.2 根据国际循证医学 Cochrane 协作网的工作手册标准,制定纳入标准和排除标准 |
| 1.3 文献筛选与资料提取 |
| 1.4 质量评价 |
| 1.5 偏倚风险评估 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2.结果 |
| 2.1 文献检索结果 |
| 2.2 纳入研究的基本特征 |
| 2.3 文献质量评价 |
| 2.4 纳入文献的偏倚风险评估 |
| 2.5 meta分析结果 |
| 3.结论 |
| 3.1 结果分析 |
| 3.2 本研究的不足 |
| 讨论 |
| 1.现代医学对绝经后骨质疏松的认识 |
| 1.1 流行病学的研究 |
| 1.2 发病机制 |
| 1.3 PMOP的临床表现 |
| 1.4 鉴别诊断 |
| 1.5 PMOP的西医治疗 |
| 2.祖国医学对绝经后骨质疏松的认识 |
| 2.1 病名的认识 |
| 2.2 病因病机 |
| 2.3 治疗原则 |
| 3.青娥丸 |
| 3.1 青娥丸的方药组成及特点 |
| 3.2 方药药理分析 |
| 3.3 青娥丸在治疗绝经后骨质疏松的应用 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1 综述 |
| 参考文献 |
| 附录2 硕士研究生期间发表论文 |
| 致谢 |
（2）六味地黄汤对绝经后骨质疏松症模型大鼠的早期干预作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词 |
| 引言 |
| 第一章 绝经后骨质疏松症模型大鼠的复制及评价 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 模型大鼠体征变化 |
| 2.2 模型成功的评价 |
| 2.3 子宫解剖学特征 |
| 3 小结 |
| 第二章 六味地黄汤对绝经后骨质疏松症大鼠模型的早期干预作用 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 药物对模型大鼠术后第 5-90 天持续干预期间每周体重的影响 |
| 2.2 药物早期干预对模型大鼠术后第 90 天时血清 E2 水平的影响 |
| 2.3 药物早期干预对模型大鼠术后第90 天时BMD、血清Ca、P水平的影响 |
| 2.4 药物早期干预对模型大鼠术后第90 天时血清BGP、ALP、TRACP水平的影响 |
| 2.5 药物早期干预对模型大鼠术后第90天时骨组织结构的影响 |
| 3 小结 |
| 3.1 药物早期干预对模型大鼠体重及血清 E2 的影响 |
| 3.2 药物早期干预对模型大鼠骨代谢的影响 |
| 第三章 讨论 |
| 1 现代医学对绝经后骨质疏松症的防治 |
| 2 传统医学对绝经后骨质疏松症的认识 |
| 3 六味地黄汤防治 PMOP 的研究 |
| 第四章 结论 |
| 第五章 展望与不足 |
| 1 不足 |
| 2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录A 综述 六味地黄汤对绝经后骨亚健康状态的防治作用 |
| 参考文献 |
（3）补肾益气活血方对绝经后骨质疏松症大鼠Wnt7b/β-catenin信号通路作用机制的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 :理论研究 肾虚血瘀与绝经后骨质疏松症相关性研究 |
| 1 肾虚与血瘀的相关性 |
| 2 肾虚血瘀是 PMOP 的根本病机 |
| 3 肾精与 BMSCs 的相关性 |
| 4 补肾益气活血是治疗 PMOP 的重要治法 |
| 第二部分 :体内实验研究 |
| 实验一 :补肾益气活血方对绝经后骨质疏松症大鼠股骨骨密度及血清ALP/TRACP表达的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 小结 |
| 实验二 :补肾益气活血方对绝经后骨质疏松症大鼠骨组织的Wnt7b/β-catenin信号通路的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 小结 |
| 实验三 :补肾益气活血方对绝经后骨质疏松症大鼠肾组织的Wnt7b/β-catenin信号通路的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 小结 |
| 体内实验分析讨论 |
| 第三部分 :体外实验研究 |
| 实验四 :补肾益气活血有效组分功能配伍诱导骨髓间充质干细胞成骨分化过程中对Wnt7b/β-catenin信号通路的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 小结 |
| 体外实验分析讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 科技查新报告 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（4）五味子总木脂素对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及机理探讨（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略表 |
| 文献综述 中药治疗骨质疏松症的研究进展 |
| 1 单味中药对骨质疏松症的治疗作用 |
| 2 单味中药主要成分对骨质疏松症的治疗作用 |
| 3 复方中药对骨质疏松症的治疗作用 |
| 4 其他方法对骨质疏松症的治疗作用 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 动物分组及处理 |
| 2.2 指标的检测方法 |
| 2.2.1 骨组织形态指标检测 |
| 2.2.2 胫骨骨髓中IL-6和IL-11蛋白及其mRNA表达的检测 |
| 2.2.2.1 脱钙骨冰冻切片的制作 |
| 2.2.2.2 胫骨骨髓中IL-6和IL-11蛋白表达的检测 |
| 2.2.2.3 胫骨骨髓中IL-6和IL-11 mRNA表达的检测 |
| 2.3 统计学分析 |
| 结果 |
| 1 五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨组织形态指标的影响 |
| 1.1 五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨BV/TV的影响 |
| 1.2 五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨Tb.N的影响 |
| 1.3 五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨Tb.Th的影响 |
| 1.4 五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨Tb.SP的影响 |
| 1.5 五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨SMI的影响 |
| 2 五味子总木脂素对去卵巢大鼠胫骨骨髓中IL-6蛋白及其mRNA表达的影响 |
| 3 五味子总木脂素对去卵巢大鼠胫骨骨髓中IL-11蛋白及其mRNA表达的影响 |
| 讨论 |
| 1 五味子总木脂素对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的治疗作用 |
| 2 五味子总木脂素治疗去卵巢所致大鼠骨质疏松症的作用机理 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 附图 |
（5）基于TGF-β/Smad信号通路补肾活血方防治大鼠骨质疏松症的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写对照表 |
| 前言 |
| 一、材料与方法 |
| (一) 实验材料 |
| (二) 实验方法 |
| 二、实验结果 |
| (一) 血清钙、磷、雌二醇的含量检测 |
| (二) 血清ALP、BGP水平检测 |
| (三) 股骨骨密度检测 |
| (四) 股骨病理组织HE染色形态观察 |
| (五) 腰椎压缩试验测试 |
| (六) 股骨TGF-β、Smad2、Smad3、OPG、RANKL的RT-PCR检测结果 |
| 三、分析与讨论 |
| (一) 中医药与绝经后骨质疏松 |
| (二) 骨质疏松症模型与给药时间的选择 |
| (三) 补肾活血方防治骨质疏松症模型大鼠的疗效观察 |
| (四) 补肾活血方对去势大鼠TGF-β/Smad信号通路的作用 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 致谢 |
| 文献综述 TGF-β与绝经后骨质疏松症关系的研究进展 |
| 参考文献 |
（6）左、右归丸及其拆方干预去卵巢大鼠肾脏TGF-β1/Smads信号通路的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 论文一 左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠骨密度及肾、骨形态的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文二 左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠肾脏Runx2、CollagenⅠ、ALP、BGP的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文三 左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠肾脏PPARγ、FABP4的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文四 左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠肾中TGF-β1/Smads信号通路的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（7）伤科益肾壮骨丸与阿仑膦酸钠联合治疗绝经后骨质疏松症的临床观察（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 临床资料 |
| 研究方法 |
| 研究结果 |
| 结论 |
| 讨论 |
| 不足与展望 |
| 结语 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（8）补肾法治疗原发性骨质疏松症的理论与实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 一 补肾法治疗原发性骨质疏松症源流探析 |
| 1. 秦汉——创立肾主骨理论,奠定补肾壮骨大法 |
| 2. 隋唐——提出养肝强筋骨,开拓精血并补思路 |
| 3. 宋元——重视补脾益精髓,主张预防治疗并举 |
| 4. 明清——承袭补虚以养骨,尤重活血祛瘀通络 |
| 5. 现代——制定诊断标准,初步构建辨治体系 |
| 二 补肾药物在治疗原发性骨质疏松症方剂中的配伍应用 |
| 1. 研究目的 |
| 2. 方剂数据表的建立 |
| 2.1 收录范围 |
| 2.2 选方标准 |
| 2.3 录入方法 |
| 2.4 录入说明 |
| 3. 统计分析方法 |
| 4. 研究结果 |
| 4.1 古方数据表 |
| 4.2 今方数据表 |
| 5. 分析与讨论 |
| 5.1 频数结果讨论 |
| 5.2 药物关联分析讨论 |
| 三 补肾方剂治疗原发性骨质疏松症的实验研究 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 仪器与试剂 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 动物准备 |
| 2.2 造模方法 |
| 2.3 分组及给药 |
| 2.4 动物处理与取材 |
| 2.5 检测指标 |
| 3. 数据处理 |
| 4. 实验结果 |
| 4.1 左归丸、右归丸对骨质疏松模型骨密度的影响 |
| 4.2 左归丸、右归丸对骨质疏松模型的股骨病理切片影响 |
| 4.3 左归丸、右归丸对骨质疏松模型血清骨碱性磷酸酶的影响 |
| 4.4 左归丸、右归丸对骨质疏松模型血清骨钙素的影响 |
| 4.5 左归丸、右归丸对骨质疏松模型血清骨保护素的影响 |
| 5. 讨论 |
| 5.1 骨质疏松模型的选择依据 |
| 5.2 骨密度、病理形态学与骨质疏松症的关系 |
| 5.3 骨代谢生化指标与骨质疏松症的关系 |
| 5.4 左归丸、右归丸的药效比较 |
| 6. 小结 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录一 各组股骨组织形态图片 |
| 附录二 西医学对原发性骨质疏松症的认识 |
| 附录三 本文统计的治疗骨质疏松症古代方剂一览表 |
| 附录四 本文统计的治疗原发性骨质疏松症现代方剂一览表 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（9）补肾活血法联合阿仑膦酸钠对绝经后骨质疏松症的疗效观察（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 临床实验 |
| 实验结果及结论 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 中英文对照表 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（10）补肾化痰方对骨质疏松大鼠成骨作用影响的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 理论探讨 |
| 1 古代中医对骨质疏松的认识 |
| 1.1 对本病病名的认识 |
| 1.2 对本病表现的描述 |
| 1.3 对本病病因病机的认识 |
| 1.4 对本病治疗法则的认识 |
| 2 现代中医对骨质疏松的研究 |
| 2.1 临床研究 |
| 2.2 实验研究 |
| 3 问题与思考 |
| 参考文献 |
| 第二部分 立论依据 |
| 1. 肾虚与原发性骨质疏松 |
| 2. 痰浊与原发性骨质疏松 |
| 3 课题研究的思路与背景 |
| 参考文献 |
| 第三部分 实验研究 |
| 实验一 补肾化痰方对去卵巢大鼠骨密度的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 补肾化痰方对去卵巢大鼠血清中N-MID、25(OH)VD、PICP的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 补肾化痰方对去卵巢大鼠骨髓细胞BGPmRNA、CbfalmRNA表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验四 补肾化痰方对去卵巢大鼠骨组织中BMP-2和TGF-β_1表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
四、骨密灵防治大鼠绝经后骨质疏松症的实验研究（论文参考文献）
- [1]青娥丸治疗绝经后骨质疏松症的meta分析[D]. 刘晗念. 湖北中医药大学, 2020(12)
- [2]六味地黄汤对绝经后骨质疏松症模型大鼠的早期干预作用[D]. 李莉. 湖南中医药大学, 2020(02)
- [3]补肾益气活血方对绝经后骨质疏松症大鼠Wnt7b/β-catenin信号通路作用机制的研究[D]. 王庆谚. 辽宁中医药大学, 2019
- [4]五味子总木脂素对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及机理探讨[D]. 张方珍. 中国中医科学院, 2015(01)
- [5]基于TGF-β/Smad信号通路补肾活血方防治大鼠骨质疏松症的机制研究[D]. 陈怿爽. 浙江中医药大学, 2017(05)
- [6]左、右归丸及其拆方干预去卵巢大鼠肾脏TGF-β1/Smads信号通路的研究[D]. 孟玥. 辽宁中医药大学, 2016(03)
- [7]伤科益肾壮骨丸与阿仑膦酸钠联合治疗绝经后骨质疏松症的临床观察[D]. 朱元元. 湖北中医药大学, 2014(11)
- [8]补肾法治疗原发性骨质疏松症的理论与实验研究[D]. 卞玉群. 南京中医药大学, 2014(03)
- [9]补肾活血法联合阿仑膦酸钠对绝经后骨质疏松症的疗效观察[D]. 吴树鑫. 福建中医药大学, 2012(02)
- [10]补肾化痰方对骨质疏松大鼠成骨作用影响的实验研究[D]. 蹇顺华. 湖北中医药大学, 2011(04)