一、地锦草提取物对小鼠血液过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响（论文文献综述）
王思涵,陈俊吉,莫伟彬[1]（2022）在《铁皮石斛黄酮干预力竭运动模型大鼠肝脏氧化应激及自噬水平的变化》文中研究说明背景:适当的运动能够提高机体的抗氧化能力,抑制和延缓氧化应激的发生,激活机体内细胞自噬。但长时间的耐力训练后至力竭运动大鼠肝脏组织氧化应激及自噬机制十分复杂,铁皮石斛黄酮具有抗氧化、调节免疫和抗炎镇痛等作用,运动前补充铁皮石斛黄酮是否能达到保护肝脏组织的目的目前尚不明确。目的:探究铁皮石斛黄酮对力竭性运动大鼠肝脏组织氧化应激及自噬水平的影响。方法:将60只10周龄雄性SD大鼠随机分为安静对照组、运动对照组、铁皮石斛黄酮低、中、高剂量组。除安静对照组外,其余大鼠进行为期5 d的适应性跑台训练,之后进行为期6周的正式运动训练,于6周末即最后一次训练达到力竭。铁皮石斛黄酮低、中、高剂量组大鼠分别在运动前半小时灌胃1.5,3.0,4.5 g/（kg·d）的铁皮石斛黄酮,灌胃体积为5 m L/kg,1次/d,直到实验结束。苏木精-伊红染色观察大鼠肝脏组织病理学变化,检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶;丙二醛、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶表达水平和总抗氧化能力,RT-q PCR和Western blotting测试肝脏组织自噬相关指标的变化。结果与结论:（1）苏木精-伊红染色后运动对照组大鼠肝细胞索排列紊乱,肝窦肿胀、汇管区有炎性细胞浸润,胞质内有大量的脂滴;铁皮石斛黄酮低剂量组大鼠肝组织脂滴和炎症细胞浸润明显减少;中、高剂量组大鼠肝组织与安静对照组比较无明显变化;（2）与安静对照组比较,运动对照组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、丙二醛表达水平及总抗氧化能力均明显升高（P <0.01）,血清过氧化氢酶、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性均明显降低（P <0.01）;与运动对照组比较,铁皮石斛黄酮低、中、高剂量组丙氨酸氨基转移酶及天冬氨酸氨基转移酶活性均出现降低（P <0.01）,血清过氧化氢酶、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性均明显升高（P <0.01）;铁皮石斛黄酮中、高剂量组大鼠血清丙二醛水平及总抗氧化能力均出现降低（P <0.05）;（3）与安静对照组比较,运动对照组大鼠肝组织Beclin1、Atg7、LC3-Ⅱ、p62及Rab7 m RNA及蛋白表达水平均明显升高（P <0.01）;与运动对照组比较,铁皮石斛黄酮中、高剂量组大鼠肝组织Beclin1、Atg7、LC3-Ⅱ、p62及Rab7 m RNA及蛋白表达水平均出现下降趋势（P <0.05或P <0.01）;（4）提示长期的耐力运动至力竭运动会引起大鼠肝组织氧化应激、肝组织受损,铁皮石斛黄酮通过调节肝脏氧化代谢和调控大鼠肝脏组织自噬水平维持肝脏功能的稳定,从而达到保护肝脏的目的。
邢媛媛[2]（2021）在《黑沙蒿多糖对肉仔鸡免疫应激的缓解作用及其机理研究》文中研究说明本试验通过建立肉仔鸡免疫应激模型并饲喂黑沙蒿多糖（AOP）,探讨AOP对肉仔鸡免疫应激的缓解作用,并利用体内法和体外法相结合,探讨AOP缓解免疫应激反应的机制。主要研究内容及结果如下:试验一:黑沙蒿多糖的提取优化、分离纯化、结构表征和体外活性的研究试验一共包含两部分。试验（1）:采用热水浸提的方法,以水浴时间、水浴温度和料液比进行单因素实验,以AOP得率为响应值,采用响应面法优化AOP的提取条件,采用离子色谱和凝胶色谱法检测AOP分子量及单糖组成。结果表明:AOP的最佳提取条件为:液料比15:1 m L/g,提取时间4.3 h,提取温度60℃。在此条件下,AOP的得率和含糖量分别为5.56%和52.65%;AOP的平均分子量为2.1 k Da（62.6%）和1.5 k Da（37.4%）,由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸组成,其摩尔比为6.87:10.67:54.13:2.49:18.37:4.83:2.64;此外,AOP具有较好的体外益生作用和抗氧化能力。试验（2）:使用DEAE-52阴离子交换柱和葡聚糖凝胶进一步分离纯化AOP,采用离子色谱、凝胶色谱法和甲基化法检测纯化AOP的分子量、单糖组成和键合结构。结果表明:经过DEAE-52阴离子交换柱层析和葡聚糖凝胶柱层析得到AOP-Ⅰ,其平均分子量为9.00 k Da,是由岩藻糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、核糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸组成的一种中性多糖,其摩尔比分别为0.56:13.75:12.79:54.08:3.15:13.43:0.63:0.67:0.93;AOP-Ⅰ主要由尾端葡萄糖基、→5)-Ara（f）-（1→、→3）-Gal（p）-（1→、→2）-Gal（p）-（1→、→4）-Man（p）-（1→、→6）-Man（p）-（1→、→4）-Gal（p）-(1→和尾端阿拉伯糖基按66.43:1.55:4.81:3.19:6.48:6.74:9.17:1.65的摩尔比构成。试验二:黑沙蒿多糖对肉仔鸡免疫和抗氧化功能的影响本试验采用单因子随机区组试验设计,选取288只1日龄AA肉仔鸡,随机分为6个处理,每个处理6个重复,每个重复8只鸡。其中对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮的基础上分别添加250、500、750、1000 mg/kg AOP和50 mg/kg金霉素,试验期42 d。结果表明:AOP添加剂量在750 mg/kg时,对肉仔鸡生长、免疫及抗氧化功能的调控效果较为明显,有望替代金霉素在肉仔鸡日粮中的使用。试验三:黑沙蒿多糖对肉仔鸡免疫应激的缓解作用及其分子调控机理研究根据试验二的结果,综合生长、免疫和抗氧化指标确定AOP在肉仔鸡日粮中的适宜添加量,作为本试验日粮中AOP的添加量。通过腹腔注射LPS构建肉仔鸡的免疫应激模型,采用2×2因子试验设计,选取192只1日龄AA肉仔鸡随机分为4个处理,6个重复,每个重复8只鸡。试验期为42 d,分为预饲期（0-14 d）、应激Ⅰ期（15-21 d,LPS注射期）、恢复Ⅰ期（22-28 d）、应激Ⅱ期（29-35 d,LPS注射期）和恢复Ⅱ期（36-42 d）。处理1和处理2饲喂基础日粮,处理3和处理4饲喂试验日粮（基础日粮中添加适宜剂量的AOP）。分别在应激Ⅰ期（试验第15、17、19、21 d）和应激Ⅱ期（试验第29、31、33、35 d）给处理1和处理3组的肉仔鸡腹腔注射5 m L/kg体重的LPS溶液（LPS溶液浓度为100μg/m L生理盐水）,处理2和处理4组注射等量的生理盐水。结果表明:日粮中添加AOP可通过提高肉仔鸡蛋白质表观代谢率,降低血清应激激素和促炎细胞因子含量来缓解LPS导致的生长性能的下降;日粮中添加AOP通过抑制TLR4/NF-κB信号通路降低LPS诱导的促炎因子的过量产生;通过激活Nrf2/Keap1信号通路,减轻LPS诱导的抗氧化酶活性下降,从而缓解肉仔鸡的免疫应激和氧化损伤。试验四:黑沙蒿多糖对肉仔鸡外周血淋巴细胞免疫应激的缓解作用本试验采用2×7因子设计,即主效应包括2个应激状态（非应激组:不添加LPS;应激组:添加LPS,添加量为10μg/m L）和6个AOP-Ⅰ添加水平（0、50、100、150、200和250μg/m L）和维生素A（VA）添加组,共设14个处理,每个处理6个重复。结果表明:非应激条件下,AOP-Ⅰ在体外具有显着的免疫调节及抗氧化功能;应激条件下,AOP-Ⅰ可缓解由LPS导致的免疫应激,且缓解作用与VA相当;150μg/m L AOP-Ⅰ可作为体外研究其免疫和抗氧化调节机制的适宜添加量。试验五:黑沙蒿多糖通过TLR4/NF-κB途径对肉仔鸡外周血淋巴细胞免疫应激的缓解作用及其机理研究试验五共包括三部分。试验（1）:采用完全随机试验设计,分为六个处理组:空白对照组、LPS组、LPS+TAK-242组、AOP-Ⅰ组、AOP-Ⅰ+TAK-242组、TAK-242组,每个处理六个重复。结果表明:TLR4是AOP-Ⅰ发挥免疫调节作用的候选靶点。试验（2）:采用完全随机试验设计,分为六个处理组:空白对照组、FITC-LPS组、LPS+FITC-LPS组、LPS组、AOP-Ⅰ+FITC-LPS组、AOP-Ⅰ组,每个处理六个重复。结果表明:AOP-Ⅰ具有干扰LPS与细胞表面受体结合的作用。试验（3）:采用完全随机试验设计,分为八个处理组:对照组、AOP-Ⅰ组、AOP-Ⅰ+PDTC组、PDTC组、LPS组、AOP-Ⅰ+LPS组、LPS+PDTC组、LPS+PDTC+AOP-Ⅰ组,每个处理六个重复。结果表明:非应激状态下,AOP-Ⅰ可通过激活TLR4/NF-κB信号通路进而发挥其免疫调节作用;应激状态下,AOP-Ⅰ可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路的过度激活进而缓解PBLs的免疫应激。试验六:黑沙蒿多糖通过Nrf2/Keap1途径对肉仔鸡外周血淋巴细胞免疫应激的缓解作用及其机理研究本试验采用完全随机试验设计,分为八个处理组:对照组、AOP-Ⅰ组、AOP-Ⅰ+ML385组、ML385组、LPS组、AOP-Ⅰ+LPS组、LPS+ML385组、LPS+ML385+AOP-Ⅰ组,每个处理六个重复。结果表明:非应激状态下与应激状态下,AOP-Ⅰ均可通过激活Nrf2/Keap1信号通路发挥其免疫调节作用。
杨硕[3]（2021）在《艾蒿醇提物对脂多糖刺激的肉仔鸡生长、免疫和抗氧化功能的影响及其机理研究》文中认为本试验通过体内试验和体外试验相结合的方法,探讨艾蒿醇提物（Artemisia argyi alcohol extract,AAAE）对肉仔鸡生长、免疫和抗氧化功能的影响及其作用机理。主要研究内容及结果如下:第一部分:艾蒿醇提物对肉仔鸡血清免疫和抗氧化指标的影响试验采用单因子随机区组试验设计。共选择240只1日龄爱拔益加（AA）肉仔鸡,按照初始体重相近原则随机分为5个处理组,每个处理包括6个重复,每个重复包括8只鸡。饲喂5种日粮,该5种日粮是在基础日粮的基础上分别添加0、250、500、750和1000 mg/kg的AAAE。试验分为前期（1-21 d）和后期（22-42 d）,共42d。结果表明:试验后期,日粮添加750 mg/kg的AAAE极显着提高肉仔鸡ADG,且随AAAE添加量的增加,ADFI呈极显着一次线性降低;日粮中添加适宜剂量（500-1000 mg/kg）的AAAE显着增加肉仔鸡血清中免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）、抗炎细胞因子（IL-2和IL-4）含量以及抗氧化酶（CAT和SOD）活性,并且显着降低血清促炎细胞因子（IL-1β和IL-6）及MDA含量。综合考虑,750 mg/kg的AAAE促进肉仔鸡免疫和抗氧化功能的效果更理想。第二部分:艾蒿醇提物对LPS刺激的肉仔鸡生长、免疫和抗氧化功能的影响及其机理研究试验采用2×2二因子试验设计,分别为2个日粮AAAE添加水平（0和750 mg/kg日粮）和2个LPS水平（0和750（?）g/kg体重）。共选取体重相近的192只1日龄AA肉仔鸡随机分为4个处理,每个处理6个重复,每个重复8只鸡。试验共42 d,分为预饲期（0-14 d）、应激Ⅰ期（15-21 d,LPS注射期）、恢复Ⅰ期（22-28 d）、应激Ⅱ期（29-35 d,LPS注射期）和恢复Ⅱ期（36-42 d）。处理1和处理2饲喂基础日粮,处理3和处理4饲喂试验日粮（基础日粮中添加750 mg/kg AAAE）。分别在应激Ⅰ期（试验第15、17、19、21 d）和应激Ⅱ期（试验第29、31、33、35 d）给处理1和处理3组的肉仔鸡腹腔注射750（?）g/kg体重的LPS溶液（LPS溶于生理盐水中配制成浓度为100（?）g/m L的LPS溶液）,处理2和处理4组注射等量的生理盐水。结果表明:（1）在LPS刺激期（15-21,29-35 d）,日粮中添加AAAE可显着缓解因LPS刺激导致的肉仔鸡ADG、ADFI、营养物质（DM、CP、Ca）表观代谢率、HDL-C及十二指肠VH/CD的降低,及血清ALT、LDL-C、血细胞参数（RBC、WBC、LYM、PLT）、应激激素（CORT、ACTH）的升高;（2）添加AAAE可显着缓解因LPS刺激引起的肉仔鸡肝脏IL-1β、IL-6、IgG含量和NF-κB p65、IL-1β基因表达,十二指肠IL-2含量和TLR4、IL-1β基因表达,空肠IL-6含量和My D88、NF-κB p65、IL-1β基因表达,回肠IL-1β、IL-4、IgM含量和TLR4基因表达水平以及TLR4/NF-κB信号通路中关键因子NF-κB p65和IκBα蛋白表达和磷酸化水平的升高。（3）添加AAAE显着缓解因LPS刺激导致的肉仔鸡血清CAT、SOD活性,肝脏SOD、GSH-Px活性和Nrf2、CAT、SOD、GSH-Px、HO-1基因表达,脾脏、十二指肠、空肠和回肠Nrf2、CAT、SOD、GSH-Px基因表达及回肠CAT活性的降低,并显着降低血清和组织中MDA含量。此外,AAAE增加了组织中Nrf2、HO-1和SOD蛋白表达水平,并显着降低Keap1蛋白表达水平。这些结果提示:AAAE能够增强肉仔鸡血清和组织的免疫及抗氧化能力,从而缓解LPS诱导的肉仔鸡免疫应激损伤,其作用机制可能与TLR4/NF-κB和Keap1/Nrf2通路有关。第三部分:艾蒿醇提物中黄酮的分离、纯化及其对肉仔鸡外周血淋巴细胞免疫和抗氧化功能的影响通过聚酰胺-大孔树脂联用分离纯化艾蒿醇提物中的艾蒿黄酮（Artemisia argyi flavonoids,AAF）,用于外周血淋巴细胞（Peripheral blood lymphocytes,PBLs）培养试验。试验采用单因素完全随机试验设计,共设6个AAF添加水平（0、25、50、100、200、400（?）g/m L）,每个处理6个重复。结果表明:（1）添加50和100（?）g/m L AAF可显着增强淋巴细胞活力;（2）添加100和200（?）g/m L AAF显着降低细胞培养液中IL-1β含量及PBLs中IL-1β基因表达;25、200（?）g/m L和100（?）g/m L AAF剂量组分别增加了IL-2和IgG含量。另外,添加50和100（?）g/m L AAF显着降低TLR4、NF-κB p65基因表达;（3）添加100（?）g/m L AAF显着增加细胞培养液中GSH-Px、CAT、SOD活性并降低MDA含量,而且上调淋巴细胞中Nrf2、HO-1、SOD、CAT和GSHPx基因表达。综合考虑,添加100（?）g/m L AAF对淋巴细胞免疫和抗氧化作用效果最理想。第四部分:艾蒿黄酮通过TLR4/NF-κB信号通路调节肉仔鸡外周血淋巴细胞免疫功能的机理研究在第三部分研究的基础上,采用单因素完全随机试验设计,以LPS诱导淋巴细胞建立免疫应激模型,利用NF-κB抑制剂（PDTC）,从NF-κB信号通路探究AAF对淋巴细胞遭受应激损伤的缓解作用。将PBLs随机分成6个处理（每个处理6个重复）,分别是:空白对照组、LPS处理组、AAF处理组、LPS+PDTC处理组、LPS+AAF处理组和LPS+AAF+PDTC处理组。结果显示:（1）LPS+PDTC和LPS+AAF处理均显着降低了培养液中IL-1β和IL-4含量,并显着增加IgG和IgM含量。（2）与LPS组相比,LPS+PDTC组和LPS+AAF组中TLR4、My D88、NF-κB p65、NF-κB p50、IL-1β和IL-6基因表达显着降低,且NF-κB p65的蛋白表达和IκBα磷酸化水平显着降低。这表明AAF对LPS诱导的细胞应激损伤的保护作用能够通过调控NF-κB信号通路下游的IL-1β基因表达来减少炎性因子的释放。第五部分:艾蒿黄酮通过Keap1/Nrf2信号通路调节肉仔鸡外周血淋巴细胞抗氧化功能的机理研究采用单因素完全随机试验设计,以LPS诱导淋巴细胞建立免疫应激模型,利用Nrf2抑制剂（ML385）,从Nrf2信号通路探究AAF对应激损伤的淋巴细胞的抗氧化作用。将PBLs随机分成6个处理（每个处理6个重复）,分别是:空白对照组、LPS处理组、AAF处理组、LPS+ML385处理组、LPS+AAF处理组和LPS+AAF+ML385处理组。结果显示:LPS+ML385和LPS+AAF处理显着增加LPS刺激的细胞培养液中GSH-Px和SOD活性,降低MDA含量。与LPS应激组相比,LPS+ML385和LPS+AAF组中Nrf2、HO-1、GSH-Px和SOD的基因表达均显着增加,并显着降低Keap1蛋白表达水平。这表明AAF能够通过调控Keap1/Nrf2信号通路的激活,来缓解LPS刺激对淋巴细胞的损伤。
林丹[4]（2021）在《基于葡萄糖氧化酶稳定的铂纳米粒子多酶活性及自级联抗肿瘤作用的研究》文中认为纳米酶与天然酶相比具有稳定性高、成本低、制备简单、易修饰等优点。同时,其可以利用肿瘤微环境如弱酸性和较高的H2O2含量等特点,特异性地对肿瘤细胞进行鉴别和杀伤,引起人们的广泛关注。葡萄糖氧化酶可以与细胞内的葡萄糖反应产生过氧化氢和葡萄糖酸,切断肿瘤的营养来源,然而其催化过程依赖于氧气,在低氧的肿瘤环境中其催化活性大大降低,无法实现高效抗肿瘤。而类过氧化氢纳米酶可以将肿瘤微环境中的过氧化氢转变为氧气,缓解肿瘤内部缺氧现象,因此可以将过氧化氢酶引入葡萄糖氧化进程,激活缺氧肿瘤中葡萄糖氧化酶的活性。在本研究中,我们利用铂纳米粒子的多种模拟酶活性,不仅缓解了肿瘤环境缺氧的问题,增强了葡萄糖氧化酶活性,而且还能产生活性氧实现协同抗肿瘤作用,提高抗肿瘤效果。第一章基于葡萄糖氧化酶为稳定剂的PtNPs的制备及其模拟酶活性的研究基于GOx与纳米酶的优良特性,我们制备了一种具有多重酶响应的葡萄糖氧化酶修饰的铂纳米粒子（GOx-PtNPs）。利用紫外-可见吸收光谱、Zeta电位及粒度分析仪、透射电子显微镜、X射线光电子能谱等对材料进行详细的表征,结果表明,GOx的表面基团能与PtNPs发生相互作用,从而有效稳定铂纳米粒子。进一步利用紫外-可见吸收光谱和便携式溶解氧分析仪探究了材料的多种酶性能。结果表明,GOx-PtNPs具有葡萄糖氧化酶活性和铂纳米粒子的类过氧化氢酶活性,类过氧化物酶活性和类氧化酶活性,可用于后续抗肿瘤活性研究。第二章基于葡萄糖氧化酶为稳定剂的PtNPs体外抗肿瘤活性研究鉴于第一章制备出具有多种模拟酶活性的GOx-PtNPs纳米酶,在细胞水平对GOx-PtNPs抗肿瘤活性进行研究。结果发现,GOx-PtNPs对正常细胞没有毒性,而对小鼠乳腺癌细胞（4T1）具有明显毒性,主要原因是肿瘤细胞比正常细胞代谢更加旺盛,产生更多的H2O2。在肿瘤微环境（p H 6.5）下,GOx-PtNPs可发挥其类过氧化氢酶活性产生O2缓解乏氧。另外,产生的O2在葡萄糖氧化酶的作用下,可消耗葡萄糖产生H2O2并导致体系的葡萄糖酸逐渐增加,一方面,通过消耗肿瘤环境内的葡萄糖抑制肿瘤增殖,另一方面,随着体系p H的进一步降低,该纳米酶可发挥其过氧化物酶和氧化酶的作用,将H2O2转化为毒性更强的羟基自由基,同时产生超氧阴离子进行协同抗肿瘤,构成自级联反应,可诱导4T1细胞凋亡。通过DCFH-DA对反应机制进行研究,可以观察到明显的活性氧信号,表明GOx-PtNPs通过活性氧的生成进行杀伤肿瘤作用。另外,溶血实验结果表明,生理条件下GOx-PtNPs不会引起红细胞破裂溶血,具有良好的血液相容性。第三章基于葡萄糖氧化酶为稳定剂的PtNPs体内抗肿瘤活性研究.在体外细胞研究的基础上,我们继续对GOx-PtNPs的体内毒性和抗肿瘤活性进行研究。对体内毒性进行评价后发现,不同浓度的GOx-PtNPs静脉注射14天后小鼠体重基本没有变化,另外,我们通过眼眶采血采集注射14天后的小鼠血液进行血常规分析,空白组和实验组的血常规测定结果均在正常参考值范围内,表明我们所合成的GOx-PtNPs具有良好的体内生物相容性。不同浓度GOx-PtNPs静脉注射14天后小鼠各组织器官H&E染色结果表明各组织器官均没有明显损伤,进一步验证该材料在体内具有良好的生物相容性。随后,我们发现注射GOx-PtNPs后肿瘤内H2O2浓度约为生理盐水的2.7倍,证明瘤内注射GOx-PtNPs后,GOx-PtNPs会发挥其过氧化氢酶活性和葡萄糖氧化酶活性,产生大量H2O2保证后续反应的进行。接着,通过瘤内注射生理盐水、GOx、Bare-PtNPs和GOx-PtNPs对小鼠进行抗肿瘤治疗研究材料的抗肿瘤活性,结果显示,与其他组别相比,GOx-PtNPs组可明显抑制瘤块生长,具有较好的抗肿瘤作用。
覃海燕[5]（2021）在《千日红提取物抗小鼠急性和慢性肝损伤的作用研究》文中进行了进一步梳理肝脏是腹腔内最大的实质器官,同时担任着代谢与解毒两大重要功能,是许多药物与外源性化合物的重要靶点。肝损伤是各种肝脏疾病的病变结果,也是多种严重肝脏疾病的发生、发展及最终走向肝功能衰竭的始动环节和共同途径。对乙酰氨基酚（APAP）也称为扑热息痛,是目前临床常用的一种解热镇痛药。APAP作为临床上解热镇痛药以及感冒药中最常见的成分,其过量导致的不良反应被越来越多的报道并引起广泛关注。四氯化碳（CCl4）是诱导动物慢性肝损伤模型的典型化学物质。CCl4刺激能够直接使肝细胞坏死,还可以促进肝脏炎症反应的发生、引起脂质过氧化降解以及损伤线粒体,使线粒体膜的通透性改变。因此,肝损伤已成为现今丞待解决的一重大难题。苋科植物千日红（Gomphrena globosa L.）的干燥头状花序入药,有止咳定喘、平肝明目的功效,主治支气管哮喘,急、慢性支气管炎,百日咳,肺结核咯血等症。千日红的主要成分有多糖、挥发油、黄酮及其苷类、微量元素等。现今主要用于治疗呼吸系统疾病,但越来越的研究都表明千日红含有的各种活性成分在许多领域都有良好的作用,这为千日红的开发应用提供了思路与依据。实验方法:使用水提法得到千日红水提物（Gomphrena globosa Water Extract,Gg WE）,利用APAP诱导小鼠急性肝损伤模型,通过灌胃给药的方式给予小鼠不同浓度的Gg WE,检测小鼠血清中的谷草转氨酶（Aspartate transaminase,AST）和谷丙转氨酶（Alanine aminotransferase,ALT）水平,以及肝脏中髓过氧化物酶（Myeloperoxidase,MPO）和谷胱甘肽（Glutathione,GSH）的含量。同时观察小鼠肝脏组织的病理变化,并通过Western blot检测肝脏中相关蛋白的水平表达情况。使用水提醇析法取得千日红粗提物（Gomphrena globosa Crude Extract,Gg CE）,利用CCl4诱导小鼠慢性肝损伤模型,以灌胃给药的方式给予小鼠不同浓度的Gg CE,检测小鼠血清中的AST/ALT和超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）、活性氧（Reactive oxygen species,ROS）的水平,以及肝脏中MPO、GSH和丙二醛（Malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase,GSH-Px）与总蛋白（Total Protein,TP）的含量,同时观察小鼠肝脏组织的病理变化,并通过Western blot检测肝脏中相关蛋白的水平表达情况。实验结果:在APAP诱导的小鼠急性肝损伤与CCl4诱导的小鼠慢性肝损伤中,Gg WE与Gg CE都能够降低小鼠血清中AST/ALT的水平表达,同时降低肝脏中的MPO活性并提高GSH的水平含量。此外,Gg CE还降低了小鼠血清中ROS的表达,并提高了血清中SOD以及肝脏中GSH-Px、MDA、TP的水平表达。通过观察小鼠肝脏的病理变化,并通过Western blot实验结果说明千日红提取物能够激活抗氧化及自噬相关通路,为研究千日红提取物对小鼠肝损伤的治疗作用提供了基础。实验结论:通过以上实验,我们发现对于急性肝损伤与慢性肝损伤,千日红水提物及粗提物都能够显着改善其损伤程度,对其具有有效的保护及治疗作用。作为一种药用植物,千日红的药用价值应该被更多地研究与发现。探索千日红提取物在小鼠急、慢性肝损伤中的作用表现,研究其通过抗氧化与促进自噬,从而缓解肝功能衰竭,这为千日红提取物在临床上的应用提供了理论依据。
何涛[6]（2021）在《绿原酸、木犀草素和黄精多糖对猪精液冷冻保存效果的研究》文中指出为了研究绿原酸、木犀草素和黄精多糖对猪精液冷冻保存效果的影响,筛选适宜的添加剂量。本研究以绿原酸、木犀草素和黄精多糖作为猪精液冷冻保存稀释液保护添加物,通过测定其冷冻-解冻后精子的各项指标（包括精子活力、活率,质膜、顶体和DNA完整率,线粒体、超氧化歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性等）来判定对精液保存效果的影响。并进行了绿原酸、木犀草素和黄精多糖不同配比添加试验,筛选出最适的添加剂量和配比并运用于猪精液冷冻与人工授精试验,取得以下结果:1.添加绿原酸对猪精子冷冻-解冻后各项检测指标有一定的提升作用,其中添加50μg/m L试验组效果最好（P<0.05）,但绿原酸添加浓度与冻后精子的活力活性、顶体、质膜、DNA完整率和线粒体活性之间相关性不强。其中添加15μg/m L试验组的精子活率、顶体和质膜完整率与对照组差异不显着（P>0.05）,添加剂量与猪精液冻后的精子抗氧化物酶活性有一定相关性,添加量从30μg/m L到100μg/m L,其SOD、CAT、GSH-Px活性均有提升作用（P<0.05）。其中添加50μg/m L试验组较对照组差异极显着（P<0.01）,但添加15μg/m L试验组CAT、GSH-Px活性较对照组差异不显着（P>0.05）。结果提示,猪精液冷冻稀释液中适量添加绿原酸对冻后精子活力活率,质膜、顶体和DNA完整率以及线粒体、SOD、CAT、GSH-Px活性等指标有一定的提升作用,最佳添加量为50μg/m L。2.添加木犀草素对猪精子冷冻-解冻后各项检测指标有一定的作用,添加剂量与冻后精子的活力活性、顶体、质膜和DNA完整率以及线粒体活性之间有弱的正相关性。当添加80μg/m L时,冻后精子质膜完整率较对照组差异极显着（P<0.01）,抗氧化物酶活性试验组较对照组差异显着（P<0.05）。当添加100μg/m L时,精子冻后SOD、CAT、GSH-Px活性数值又有所降低,试验组较对照组差异不显着（P>0.05）。结果提示,猪精液冷冻稀释液中适量添加木犀草素对冻后精子活力活率,质膜、顶体和DNA完整率以及线粒体、SOD、CAT、GSH-Px活性等指标有一定作用,最佳添加量为80μg/m L。3.添加黄精多糖对猪精子冷冻-冻后活力活率有一定的提高,其中添加30μg/m L、80μg/m L处理组较对照组差异显着（P<0.05）,添加15μg/m L、50μg/m L、100μg/m L处理组较对照组差异不显着（P>0.05）。其中精子的活力活率、质膜和DNA完整率峰值均出现在30μg/m L添加组,顶体完整率峰值出现在80μg/m L添加组,与50μg/m L试验组差异显着（P<0.05）,精子活率试验组与对照组差异极显着（P<0.01）。添加剂量与猪精子活率和功能完整性相关性规律不明显,其中50μg/m L、100μg/m L试验组数据较对照组差异不显着（P>0.05）。添加黄精多糖对猪精子冻后精子抗氧化物酶活性有提升作用,其中添加30μg/m L处理组较对照组差异显着（P<0.05）。精子SOD活性峰值出现在80μg/m L处理组,较对照组差异显着（P<0.05）;精子GSH-Px活性峰值出现在30μg/m L处理组,其中30μg/m L和80μg/m L处理组较对照组差异极显着（P<0.01）;但添加15μg/m L处理组SOD、CAT、GSH-Px活性较对照组差异不显着（P>0.05）。结果显示,猪精液冷冻稀释液中适量添加黄精多糖对冻后精子活力活率,质膜、顶体和DNA完整率,线粒体、SOD、CAT、GSH-Px活性等指标有一定作用,最佳添加量为30μg/m L。4.不同配伍处理组与对照组之间差异显着（P<0.05）,对猪精子冻后活率、顶体、质膜和DNA完整率均有提高作用,表明不同配伍组存在协同作用。其中组合6（即35μg/m L绿原酸加40μg/m L木犀草素加15μg/m L黄精多糖）效果最好,精子活力活率、质膜、顶体和DNA完整率最高,分别为48.9%、50.81%、50.09%、49.36%和48.13%。精子活力活率、顶体和质膜完整率各配伍处理组之间有差异,但精子DNA完整率各配伍组之间差异不显着（P>0.05）。不同配伍处理组与对照组之间差异显着（P<0.05）,表明不同配伍处理组对猪精子冻后抗氧化酶活性有提高作用,且存在一定的协同作用。其中组合6效果最好,冻后精子SOD、CAT和GSH-Px最高,分别为69.79 U/m L、3.98 U/m L和221.37 U/I,各配伍处理组之间有差异。结果显示,猪精液冷冻稀释液中添加不同配伍的绿原酸、木犀草素和黄精多糖对冻后精子活力活率,质膜、顶体和DNA完整率,线粒体、SOD、CAT、GSH-Px活性等指标有一定作用,最佳配伍组合为35μg/m L绿原酸加40μg/m L木犀草素加15μg/m L黄精多糖。5.与新鲜猪精液人工授精相比,冷冻精液在不返情率、受胎率、分娩率和窝产仔数上均有所降低。但在冷冻精液试验组中,各处理组的结果要明显优于对照组。猪精液冷冻稀释液中分别添加50μg/m L绿原酸、80μg/m L木犀草素、30μg/m L黄精多糖以及联合添加35μg/m L绿原酸、40μg/m L木犀草素、15μg/m L黄精多糖后,能够显着提高窝产仔数（P<0.05）。结果显示,与新鲜猪精液人工授精结果相比,冷冻保存精液人工授精效果仍然不理想,但各冷冻试验组中,添加50μg/m L绿原酸、80μg/m L木犀草素、30μg/m L黄精多糖以及联合添加35μg/m L绿原酸、40μg/m L木犀草素、15μg/m L黄精多糖试验组,对提高人工授精监测指标有一定作用。配伍组的窝产仔数显着高于其它冷冻组（P<0.05）。综上,在冷冻稀释液中单一添加绿原酸、木犀草素和黄精多糖对猪精液冷冻保及人工授精效果有一定作用,配伍添加效果最佳。
孙文静[7]（2021）在《地锦多糖的制备及对小鼠免疫增强活性研究》文中提出多糖是中药的重要组成部分,具有增强免疫、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抗衰老、等生物活性。多糖作为免疫增强剂对动物疾病具有增强抵抗力的作用。地锦草在我国分布范围广且药理作用广泛,具有显着的抗氧化、抗肿瘤以及抗菌抗炎的功效,有重要的临床应用和开发价值。本研究选择地锦多糖作为研究对象,从提取纯化、结构鉴定、对淋巴细胞免疫活性、对巨噬细胞功能及对小鼠巨噬细胞的抗氧化等方面初步筛选出3个效果较好的活性部位,进一步研究其体内对免疫抑制小鼠的免疫调节作用。试验Ⅰ地锦多糖的提取纯化采用一步醇沉和分步醇沉法提取粗地锦总多糖(EHPS tc)和各分级多糖EHPS60c、EHPS70c和EHPS80c。然后以脱色率、多糖保留率为指标,采用L25（56）正交设计对双氧水加入量、反应温度、p H值、反应时间等脱色条件进行优选。脱色后EHPStc经DEAE-Sephadex A-25葡聚糖凝胶柱层析,得到纯化的地锦多糖1(EHPStp-1)和地锦多糖2(EHPStp-2),分别用苯酚-硫酸法和考马斯亮兰法测定多糖和蛋白含量。结果表明,EHPStc最优脱色条件为反应温度50℃、反应时间4 h、p H值为2、双氧水加入量4%时,多糖脱色率达到71.10%,保留率为63.31%,多糖含量为74.52%。经柱层析纯化后EHPStp-1糖含量提高为95.36%,EHPStp-2糖含量提高为92.35%。因此可以看出,地锦多糖经过DEAE-Sephadex A-25葡聚糖凝胶柱的洗脱纯化可以显着提高多糖含量;经验证试验发现双氧水脱色工艺有效可行。试验Ⅱ地锦多糖的结构鉴定采用红外光谱法（IR）、紫外光谱法（UVS）、PMP柱前衍生高效液相色谱法（PMP-HPLC）、高效凝胶渗透色谱（HPGPC）法、硫酸咔唑法、刚果红法和核磁共振波谱法（NMR）等方法分析各多糖结构。结果表明,EHPStc和EHPStp-2中可能含有少量蛋白。EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2均符合多糖类物质红外光谱基本特征。EHPStp-1主要包括Glc（83.1%）、Gal（6.1%）、Glc UA（1.6%）;EHPStp-2主要包括Gal（25.6%）、Gal UA（22.2%）、Ara（16.6%）;EHPStc主要包括Glc（53.5%）、Ara（16.8%）、Gal（14.3%）。EHPStc和EHPStp-1的重均分子量分别为26.2和26.0 k Da;EHPStp-2重均分子量分别为145.6 k Da和8.9 k Da。EHPStp-1和EHPStp-2的糖醛酸含量分别为15.9%和27.9%。EHPStc和EHPStp-1均具有明显的三螺旋结构。EHPStp-1存在α构型的单糖;EHPStc存在α和β构型的单糖。经结构鉴定,水提醇沉提取物均为多糖,但多糖结构复杂,要得到具体的结构成分还需进一步检测。试验Ⅲ地锦多糖对淋巴细胞免疫活性的影响将EHPS60c、EHPS70c、EHPS80c、EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2加入到小鼠外周血淋巴细胞培养体系中,用MTT法测定其安全浓度;然后取安全浓度范围内6个多糖,分别单独或协同PHA加入到小鼠外周血淋巴细胞中,培养48 h后,测定淋巴细胞增殖(细胞A570值和最高淋巴细胞增殖率)的变化,筛选增强免疫活性的较好部位;将筛选出的3个多糖在31.25μg/m L时刺激淋巴细胞,分别在24 h、48 h和72 h收集细胞处理后,在流式细胞仪上检测各个时间点的周期分布情况和CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的变化;ELISA法测定免疫球蛋白IgA、IgG和细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN-r的含量。结果表明,多糖单独刺激时EHPStp-1在15.625μg/m L时的细胞增殖率最高,为15.099%,其次为EHPStp-2在相同浓度时,达到12.129%;多糖与PHA共同刺激时,EHPStc在15.625μg/m L时的细胞增殖率最高,为23.820%;其次为EHPStp-1在31.25μg/m L时,为20.499%。综合评价,筛选出EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2可能是增强免疫活性的较好部位。细胞周期分布结果表明,与EHPStc相比较,EHPStp-1和EHPStp-2处理细胞48 h和72 h后,SPF值和PI值显着升高。EHPStp-1和EHPStp-2处理细胞48 h后,CD4+、CD8+淋巴细胞百分率显着高于EHPStc对照组。EHPStp-1、EHPStp-2和EHPStc均能显着促进IgA、IgG和IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ的分泌。说明,地锦多糖能够有效提高小鼠淋巴细胞免疫活性,其中EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2免疫增强活性最强。试验Ⅳ地锦多糖对巨噬细胞功能的影响取安全浓度范围内5个浓度的6个多糖,分别单独或协同LPS加入到培养的小鼠腹腔巨噬细胞中,培养48 h后,测定巨噬细胞增殖的变化;检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性、NO和iNOS分泌;ELISA法测定细胞因子IL-2、IL-6、IFN-γ、MCP-1、MIP-1?的含量;流式细胞术分析CD14和MHC-II表达。结果表明,多糖单独刺激时EHPStp-1在31.25μg/m L时的细胞增殖率最高,为23.17%;其次为EHPStc,在31.25μg/m L时的细胞增殖率为16.42%;协同LPS刺激巨噬细胞时,EHPStp-1在31.25μg/m L时的细胞增殖率最高,为20.29%;其次为EHPS60c,在31.25μg/m L时的细胞增殖率为17.41%。在31.25～1.953μg/m L时,EHPStc和EHPStp-1促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用最强,且在31.25～15.625μg/m L时,EHPStc促进噬细胞吞噬作用显着强于EHPStp-1。EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2分别在31.25～1.953μg/m L和31.25～3.907μg/m L时,对小鼠腹腔巨噬细胞NO和iNOS分泌功能显着强于其余多糖组。EHPStp-1、EHPStp-2和EHPStc均能显着促进细胞因子的分泌。在31.25～7.813μg/m L时,EHPStp-1组对CD14和MHC-II的表达显着高于EHPStp-2组和BL组。说明,地锦多糖能够有效促进小鼠腹腔巨噬细胞功能,其中EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2免疫增强活性最强。试验Ⅴ地锦多糖对小鼠巨噬细胞的抗氧化作用取安全浓度范围内5个浓度的EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2,加入到培养的小鼠腹腔巨噬细胞中,培养48 h后,ELSIA法测定EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2对小鼠巨噬细胞的SOD、GSH-PX、MDA及MPO含量。结果表明,EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2均可显着提高小鼠SOD酶、GSH-PX酶活性,其中EHPStp-1组地锦多糖SOD酶、GSH-PX酶活力显着高于其他多糖组。EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2在7.813～31.25μg/m L均能显着降低MDA含量,减少体内脂质过氧化程度。EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2作用小鼠巨噬细胞后MPO酶活力均有显着降低。其中31.25μg/m L组MPO酶活力显着低于其他多糖组。说明,EHPStc、EHPStp-1和EHPStp-2具有显着的抗氧化作用,以减轻动物机体自由基损伤,保护动物机体,增强免疫功能。试验Ⅵ地锦多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用建立环磷酰胺（CTX）小鼠免疫抑制模型,测定EHPStc和EHPStp-1对免疫抑制小鼠的免疫调节作用。小鼠随机分为5组（n=10）。分别为正常对照组（NC）、模型对照组（MC）、EHPStc组、EHPStp-1组、阳性对照组（PC组）。NC组小鼠,每天灌胃给予生理盐水,2个多糖组小鼠每天灌胃150 mg/kg EHPStc和EHPStp-1,PC组小鼠给予左旋咪唑（100 mg/kg）。实验持续24 d。第15、16、17 d腹腔注射100 mg Cy/kg bw,对小鼠进行免疫抑制造模。NC组和MC组灌胃0.1 m L/10g生理盐水。结果显示,EHPStc和EHPStp-1在大多时间点能促进T淋巴细胞增殖、促进淋巴细胞进入S期和G2/M期,提高CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的百分率,提高血清中免疫球蛋白和细胞因子水平,提高小鼠免疫器官指数及脾脏抗氧化指标。说明,EHPStc和EHPStp-1能够有效提高免疫抑制小鼠细胞免疫、体液免疫能力。综合评价EHPStp-1免疫增强活性最强。本研究首先通过对地锦多糖提取脱色纯化后,获得总多糖和各分级多糖,利用小鼠外周血淋巴细胞、巨噬细胞和免疫抑制小鼠检测了多糖的淋巴细胞免疫活性、巨噬细胞功能和抗氧化能力及其对免疫抑制小鼠的免疫调节作用,发现地锦多糖具有显着的免疫增强作用。本研究为地锦草等中药多糖在防治动物疾病中的推广应用提供了理论依据。
李祯[8]（2021）在《枸芪粗提物对川藏黑猪脂质抗氧化性的影响》文中指出随着国家减抗替抗工作的开展,开发能够替代抗生素的绿色健康的饲料添加剂成为重中之重的任务,众多研究发现天然绿色植物尤其是食药同源类植物对促进动物健康生长、提高机体抗氧化能力有显着效果。动物生产中诸多因素都会引起细胞脂质过氧化,导致生物膜损伤,阻碍正常生理生化功能,从而危害动物健康。因此,在动物饲料中添加天然植物成分,以此提高动物脂质抗氧化能力具有很强的可行性。经过实验室前期筛选,本研究选取食药同源类植物枸杞和黄芪的提取物——枸芪粗提物作为饲料添加剂,以地方猪种川藏黑猪为实验对象,研究枸芪粗提物对川藏黑猪脂质抗氧化性能的影响,具体从川藏黑猪背最长肌的脂质含量、抗氧化指标两方面探究脂质抗氧化性能与肉品质、生长性能之间的联系。为此,本试验选取175日龄体重为（70±2）kg的健康川藏黑猪50头,随机分为对照组和试验组,每组5个重复,每个重复5头猪。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂基础日粮并添加0.1%的枸芪粗提物。饲养期90天后屠宰,于胴体左侧倒数第三和第四肋骨间取背最长肌检测猪肉品质、抗氧化指标,并进行高通量转录组分析。结果表明:（1）生长性能:试验组出栏重、平均日增重、平均日采食量均显着提高（P<0.05）,分别约为对照组的1.06倍、1.19倍、1.13倍。（2）猪肉品质:与对照组相比,试验组肉色和大理石纹评分分别比对照组显着提高19%和52%（P<0.05）;试验组维生素E和粗脂肪含量分别是对照组的2.3倍和1.1倍（P<0.05）;试验组不饱和脂肪酸总量是对照组的1.9倍（P<0.05）。（3）猪肉脂质抗氧化指标:试验组CAT活力、GPX活力分别是对照组的1.1倍和1.3倍（P<0.05）;试验组GSH含量是对照组的1.5倍（P<0.05）,GSH/GSSG比值是对照组的1.6倍（P<0.05）,对照组GSSG含量是试验组的1.1倍（P<0.05）。试验组LPO含量、MDA含量显着降低（P<0.05）,对照组LPO含量、MDA含量分别是试验组的1.4倍和1.1倍（P<0.05）。（4）猪肉高通量转录组数据分析发现GCLC、GSS、GPX4、CAT、LOX等与氧化应激相关基因表达有显着变化,通过GO和KEGG分析发现,主要集中在谷胱甘肽代谢信号通路中。通过ELISA检测发现,试验组GCLC、GSS、GPX4的含量分别显着高于对照组12%、8%和16%（P<0.05）。结论:在基础饲粮中添加0.1%的枸芪粗提物可以改善谷胱甘肽代谢,增强脂质抗氧化能力,促进川藏黑猪健康生长,提高其猪肉品质。
王文平[9]（2021）在《重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ的毒性评价及重楼皂苷Ⅰ的肝毒性机制探究》文中研究指明研究目的:药源性肝损伤是一项严重的公共卫生问题,据调查统计,我国药源性肝损伤的发病率逐年升高;重楼是一种临床常用中药,因其抗肿瘤活性日益受到重视。重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ是重楼中3种重要的皂苷类成分,越来越多的研究和报道显示其对多种肿瘤细胞均具有杀伤作用。但重楼在抗肿瘤作用的同时毒副作用研究较少,尤其是其单体类成分。本研究围绕重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ的潜在毒性及其作用机制进行深入的探索。以期为中药重楼的临床合理应用以及基于重楼皂苷单体的药物研发提供借鉴和参考。研究方法:（1）从细胞、模式生物-斑马鱼、动物3个层面进行了重楼皂苷单体的毒性评价。首先选择了 9种细胞考察了重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ的细胞毒性情况,包括3种肝细胞（HepaRG、HL-7702和WRL-68细胞）,3种肾细胞（HK-2、HKC和293T细胞）和3种心脏细胞（H9c2、HUVEC和HCMEC细胞）;利用模式生物-斑马鱼模型考察不同浓度重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ对斑马鱼生存率的影响,确定了 LC50、LC10与最大非致死浓度（MNLC）;体视荧光显微镜观察重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ给药前后肝脏、肾脏和心脏的形态,统计斑马鱼的肾脏水肿率、心率和心包水肿率。利用Image-Pro Plus 5.1.0软件统计给予重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ前后斑马鱼肝脏面积和荧光强度、肾脏面积和荧光强度、心脏SV-BA距离,评价重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ的潜在肝、肾、心毒性;通过HE染色和TUNEL染色观察斑马鱼给药前后肝组织病理情况及肝细胞凋亡情况;通过小鼠的急性毒性实验,得出LC50值。然后进行小鼠血清生化检测和组织病理切片分析。各个层面数据相互支持,补充验证,使研究基础更加全面可靠,结论更加合理。（2）选用HepaRG细胞研究重楼皂苷Ⅰ的肝细胞毒性机制。利用酶标仪、流式细胞仪、倒置荧光显微镜等对HepaRG细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放、DAPI染色、活性氧（ROS）、线粒体膜电位（MMP）、细胞凋亡及细胞周期等进行测定,利用Western blot对凋亡相关蛋白进行检测;选用HUVEC细胞研究重楼皂苷Ⅰ的心血管毒性机制。从抑制新血管生成和促进心血管细胞凋亡两个方面评价了重楼皂苷Ⅰ的血管毒性机制。进行了LDH释放、细胞迁移、细胞凋亡、DAPI染色、细胞周期以及体外血管生成等研究,测定了近30个相关蛋白的表达。（3）利用TMT标记定量蛋白质组学技术检测给药组和对照组小鼠肝脏组织中的差异蛋白,对差异蛋白进行GO及Pathway通路富集分析;利用STRING11.0构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络;采用IPA软件进一步筛选出与表型相关的潜在生物标志物;利用Q300靶向代谢组学技术研究给药组和对照组小鼠血清样本中内源性代谢物的变化情况。采用PCA、OPLS-DA等分析小鼠内源性代谢物的轮廓变化。比较给药前后小鼠血清样本代谢谱的差异,寻找与重楼皂苷Ⅰ致肝毒性相关的代谢差异物及代谢调控网络。使用Cytoscape对蛋白组学和代谢组学做关联分析。采用PCR和Western blot技术对肝毒性机制中的关键蛋白进行进一步的验证。研究结果:（1）重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ毒性实验结果:重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ均具有明显的细胞毒性,能显着的促进H9c2细胞外其余8种细胞的凋亡,且呈现浓度和时间依赖性。对于H9c2细胞,3种皂苷均呈现出低剂量促进增殖,高剂量抑制增殖的作用;斑马鱼实验结果:重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ对斑马鱼的LC50分别为121、213、570 ng/mL,LC10分别为109、178、456ng/mL,MNLC分别为99、146、357ng/mL;毒性器官评价方面,重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ对斑马鱼具有显着的肝脏毒性,能明显降低斑马鱼肝脏面积和荧光强度;重楼皂苷Ⅰ能显着影响斑马鱼的心率,提示其具有心血管毒性;重楼皂苷Ⅰ和Ⅶ能降低斑马鱼肾脏面积和荧光强度,具有一定的肾毒性,但3种皂苷均未造成肾水肿;斑马鱼病理切片显示重楼皂苷Ⅰ给药组的肝组织出现空泡和严重的肝细胞坏死;TUNEL染色结果显示重楼皂苷Ⅰ给药组出现了肝细胞凋亡;动物实验结果:小鼠体内实验发现,重楼皂苷Ⅰ具有体内毒性,其LC50为24.5 mg/kg;给药组血清中ALT、AST显着升高,SOD降低;给药组病理切片显示出显着的肝细胞损伤和脂肪样变性以及一定的心脏毒性。（2）重楼皂苷Ⅰ肝细胞毒性机制:重楼皂苷Ⅰ显着升高了 HepaRG细胞中ROS水平,引起MMP下降,Cyt c从线粒体向胞浆中释放,早期及晚期凋亡细胞增多,LDH的释放量升高。改变了周期蛋白P21、cyclinA、cyclinE和CDK2的表达,诱导细胞周期阻滞。并且明显激活了凋亡通路蛋白Fas、P53、caspase-3、caspase-8、caspase-9的表达,且呈现剂量依赖关系;重楼皂苷Ⅰ血管毒性机制:重楼皂苷Ⅰ显着促进了心血管细胞LDH的释放,抑制细胞迁移和血管生成,改变周期分布,诱导细胞凋亡。给药后的细胞中VEGFR2、p-VEGFR2、Src、p-Src、PI3K、Src、P38、PLCy 等近 30 种蛋白的表达均发生了改变。（3）蛋白组学结果:共筛选出302个差异蛋白,其中上调蛋白182个,下调蛋白120个。差异蛋白具有氧化还原酶活性、催化活性等分子功能,参与了脂肪酸代谢、有机酸的代谢、药物代谢、氧化还原过程等生物过程。主要分布在细胞质和细胞内膜结合细胞器包括线粒体、内质网等;Pathway结果显示,差异蛋白在细胞色素P450酶对药物的代谢、细胞色素P450对外源物质的代谢、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（PPARγ）等途径上富集程度较高;PPI网络分析发现差异蛋白主要聚集在三个功能区域,包括细胞色素P450酶、脂质代谢过程、氧化还原过程;IPA商业数据库筛选出9个与肝毒性相关的差异蛋白作为潜在生物标志物;代谢组学结果:给药组代谢物轮廓明显偏离对照组;通过多维和单维的差异代谢物的交集,筛选并初步鉴定出97种差异代谢物,25条代谢通路。结果归纳显示重楼皂苷Ⅰ造成了体内5个方面的代谢异常,包括氨基酸代谢、脂肪酸代谢、谷胱甘肽代谢、能量代谢、蛋白质合成;其中D-谷氨酰胺与D-谷氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,花生四烯酸代谢,氨酰tRNA生物合成等代谢通路影响值相对较高;代表性差异代谢物为花生四烯酸、焦谷氨酸、乙醇酸、酰基肉碱等。对全文中研究的重楼皂苷Ⅰ的肝毒性情况进行了综合分析,总结并推测了重楼皂苷Ⅰ造成肝毒性的机制。采用qPCR及Western blot验证了关键蛋白Bax、CYP1A2、P53、Fas的表达,对推测的肝损伤机制进行了初步验证。研究结论:（1）细胞实验研究发现重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ均具有肝脏、肾脏、心血管细胞毒性;斑马鱼实验研究确定了 3种皂苷中毒性最强的为重楼皂苷Ⅰ,毒性最明确的毒性靶部位是肝脏和心血管;斑马鱼肝脏病理切片、TUNEL染色,小鼠生化指标、病理切片检测进一步验证了重楼皂苷Ⅰ的肝脏和心脏毒性;（2）重楼皂苷Ⅰ肝细胞毒性机制为ROS应激通路和死亡受体通路介导的细胞凋亡;心血管毒性主要作用通路为VEGFR2激活的下游PI3K/AKT/mTOR、Src/eNOS、PLCy/ERK/MEK、P38信号通路,JAK2/STAT3信号传导通路和Bcl-2家族介导的凋亡通路,从诱导心血管细胞凋亡和抑制新生血管两方面产生心血管毒性。（3）蛋白质组学和代谢组学实验结果结合全文数据推测重楼皂苷Ⅰ诱导的肝毒性机制可能为CYP450酶和脂质代谢介导的线粒体功能障碍为主体的肝细胞损伤。药物影响了:①多种CYP450酶。主要包括Ⅰ相代谢酶CYP1A1、CYP1A2和Ⅱ相代谢酶GSTA3和UGT1A1表达紊乱,呈现下调趋势。药物在体内的水解、代谢过程被减慢,随着作用时间的延长,药物毒性反应增加。未被代谢的药物作用可能作用于线粒体,造成线粒体功能障碍;也很有可能是Ⅱ相药物代谢酶下调,产生的毒性代谢中间产物作用于线粒体,进一步产生了肝脏毒性;②脂质代谢。线粒体损伤后β-氧化的功能受到影响,体内的游离脂肪酸不能被氧化而转化成甘油三脂,导致了体内脂质的蓄积。同时ATP合成减少,供能障碍。脂质蓄积还能产生脂毒性进一步影响线粒体功能,产生过量ROS;③线粒体氧化应激。过量的ROS生成诱导线粒体氧化应激,释放Cyt c,升高Bax,降低Bcl-2,进而激活caspase家族导致肝细胞凋亡。Western blot验证结果显示药物代谢酶CYP1A2显着下调以及凋亡关键蛋白Bax表达上调。qPCR结果显示凋亡相关基因P53、Bax以及Fas的表达均显着上调,验证实验佐证了机制推论的合理性。
朱星樽[10]（2021）在《花羔红点鲑氨氮应激生理解毒机制研究》文中认为饲料驱动下的水产养殖体系,大约75%的输入性氮并没有被养殖动物所利用吸收,而是随排泄物进入养殖水体中,在环境微生物的氨化作用下产生大量有毒的氨氮,导致鱼类氨氮中毒频繁发生。在漫长的进化过程中,鱼类逐渐分化出多种应答氨氮的生理解毒策略,其中,绝大多数鱼类主要依赖于谷氨酰胺合成和尿素循环。在哺乳类动物中的研究表明,氨氮解毒关键酶缺陷是造成机体氨氮耐受力差异的关键因素,也是开展精准营养的调控的关键靶点。花羔红点鲑是一种中小型冷水稀有鱼类,其环境氨氮耐受力较差,随着集约化养殖规模的不断扩大,常态化的氨氮暴露对花羔红点鲑的生长、繁殖及存活造成了极大的影响,已严重影响了鱼的产量与品质。本论文以花羔红点鲑为研究对象,拟通过一系列的量化研究,试图查明导致花羔红点鲑氨氮耐受力低下的原因,为遗传选育及人工配合饲料的研发提供新契机。本论文首先探究了氨氮暴露对花羔红点鲑的毒性作用。实验共设置2个处理组:对照组[0.01 mg/L总氨氮（TA-N）,非离子氨（UIA-N）<0.001 mg/L]和氨氮组（1/2 96 h半致死浓度:12.33 mg/L TA-N,0.19 mg/L UIA-N）,开展为期28d的慢性氨氮胁迫实验。结果发现,氨氮组实验鱼大脑中氨浓度达到峰值时显着增加了15倍（1 d）,但达到峰值的时间晚于肝脏（12 h）;大脑中谷氨酰胺达到峰值时的浓度为35.33μmol/g,远高于哺乳类的致死浓度1μmol/g;肝脏中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶及谷胱甘肽还原酶活性呈逐渐降低趋势,1 d后达到稳定;肝脏中溶菌酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶活性及头肾巨噬细胞呼吸爆发于1 d后显着降低;1 h后,氨氮组实验鱼大脑和肝脏中氨和谷氨酰胺浓度显着高于对照组,而肝脏中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽还原酶、溶菌酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶活性及呼吸爆发显着低于对照组。结果说明,氨氮暴露会造成花羔红点鲑肝脏和大脑中氨和谷氨酰胺积累,导致氧化损伤和免疫抑制。然而,谷氨酰胺在花羔红点鲑肝脏和大脑中的积累,并不是导致其中毒死亡的直接原因,相反,谷氨酰胺合成很可能是花羔红点鲑氨氮解毒的重要途径。为了弄清谷氨酰胺合成途径在花羔红点鲑氨氮解毒过程中扮演的角色,采用腹腔注射甲硫氨酸亚砜亚胺（谷氨酰胺合成酶抑制剂）的生理学手段,设置了4个处理组:Na Cl组实验鱼通过腹腔注射0.9%氯化钠;NH3组实验鱼通过腹腔注射半致死浓度的醋酸铵（每克鱼2.5μg）;NH3+MSO组实验鱼通过腹腔注射半致死剂量的醋酸铵和甲硫氨酸亚砜亚胺（每克鱼2.0μg）;MSO组注射实验鱼通过腹腔注射甲硫氨酸亚砜亚胺（2.0μg/g鱼）,急性毒性实验持续96 h。结果发现,NH3组实验鱼白细胞数、丙二醛含量、肝脏中TNF、IL 1和IL 8基因m RNA表达量升高,而血清葡萄糖含量、总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、过氧化物酶、谷胱甘肽过氧化物酶、溶菌酶活性、补体、免疫球蛋白G含量、吞噬指数、肝脏中SOD、CAT和GPx基因m RNA表达量降低;NH3组实验鱼肝脏中谷氨酰胺合成酶和谷氨酰胺酶活性显着高于NH3+MSO组和MSO组;NH3+MSO组存活率最低。结果说明:氨氮中毒会导致花羔红点鲑血液恶化、氧化应激、免疫抑制及炎症;花羔红点鲑氨氮解毒依赖于谷氨酰胺合成途径,尿素循环在氨氮解毒过程中并未发挥作用。为了探寻尿素循环未参与花羔红点鲑氨氮解毒的原因,设置了3个处理组:对照组通过腹腔注射0.9%氯化钠;低氨氮组按照每克体重1.25μg的浓度经腹腔注射0.5 m L醋酸铵（1/2 96 h半致死浓度）;高氨氮组实验鱼按照每克体重2.50μg的浓度经腹腔注射0.5 m L醋酸铵（96 h半致死浓度）,急性毒性实验持续96 h。结果发现,随着醋酸铵含量的升高,血浆谷氨酰胺、谷氨酸、精氨酸及鸟氨酸含量显着升高,而瓜氨酸和天冬氨酸含量显着降低;高氨氮组肝脏中精氨琥珀酸合酶、精氨琥珀酸裂解酶、谷氨酰胺合成酶及谷氨酰胺酶活性显着最高,而氨甲酰磷酸合成酶、鸟氨酸转氨酶及精氨酸酶活性最低,尤其是精氨酸酶活性仅为对照组的6%;肝脏细胞经吖啶橙染色后,高氨氮组检测到不规则的致密浓染的黄绿色荧光信号。结果说明:花羔红点鲑可能存在尿素循环障碍,与精氨酸酶活性的缺失密切相关。为了弄清花羔红点鲑是否存在精氨酸酶缺陷,通过向饲料中添加不同水平精氨酸（激活剂）和赖氨酸（抑制剂）,筛选出花羔红点鲑精氨酸酶激活及抑制模型,在此基础上对精氨酸酶缺陷开展生理学研究。实验由两个阶段构成:第一阶段,配置七组实验饲料:对照组、3个精氨酸水平（1.00、2.00及3.00%）及3个赖氨酸水平（1.00、2.00和3.00%）,开展为期10周的营养调控实验。结果发现,2.00%和3.00%精氨酸组实验鱼增重显着高于对照组,同样,2.00%和3.00%赖氨酸组显着高于对照组;饲料中添加3.00%赖氨酸显着提高实验鱼的白细胞数;实验鱼血清超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、溶菌酶活性及补体含量随着饲料中精氨酸含量的提高显着升高,而随着饲料中赖氨酸含量的提高显着降低。基于上述指标综合分析,2.00%精氨酸组作为精氨酸酶激活模型（激活组）,而3.00%赖氨酸组作为精氨酸酶抑制模型（抑制组）。第二阶段,共设置3个组:对照组、激活组及抑制组,向腹腔中注射半致死浓度（2.5μg/g鱼）醋酸铵,急性实验持续96 h。结果发现,抑制组累计死亡率与对照组无显着性差异,均显着低于激活组;激活组肝脏中精氨酸酶和氨甲酰磷酸合成酶含量显着高于抑制组,而氨和谷氨酰胺含量相反;激活组谷氨酰胺合成酶和谷氨酰胺酶含量与对照组无显着性差异。结果说明,花羔红点鲑氨氮解毒过程中尿素循环障碍与精氨酸酶缺陷有关,然而,分子机制尚不清楚。为了进一步探讨花羔红点鲑氨氮解毒的分子机制,采用比较转录组分析技术,共设置了2个处理组:对照组通过腹腔注射0.9%氯化钠,氨氮组按照每克体重2.50μg的浓度经腹腔注射0.5 m L醋酸铵（96 h半致死浓度）。急性毒性实验持续96 h。结果发现,测序共获得225.54 Gb有效数据,通过组装获得74 502条非冗余基因;对非冗余基因进行功能注释,获得25921条注释结果;检测到650个差异表达基因,主要集中在蛋白/氨基酸代谢、TCA循环及氨氮代谢信号通路等;氨氮组肝脏中精氨酸酶活性仅达到对照组的5.5%。结果说明,参与花羔红点鲑氨氮解毒的生理途径主要包括:减少蛋白质分解、部分氨基酸分解形成丙氨酸、谷氨酰胺合成;尿素循环在氨氮解毒过程中没有发挥作用的原因与精氨酸酶缺陷有关。为了弄清氨氮胁迫是否会引起花羔红点鲑精氨酸酶编码基因的DNA甲基化变异,采用c DNA末端快速扩增技术、染色体步移技术及基于亚硫酸氢盐处理的位点特异胞嘧啶DNA甲基化分析技术,共设置了2个处理组:对照组通过腹腔注射0.9%氯化钠,氨氮组按照每克体重2.50μg的浓度经腹腔注射0.5 m L醋酸铵（96 h半致死浓度）。急性毒性实验持续96 h。结果发现,花羔红点鲑精氨酸酶1基因的全长为1014 bp,共编码338个氨基酸;精氨酸酶1基因核心启动子区域存在CpG岛,含CG位点16个,氨氮胁迫下,精氨酸酶1基因核心启动子区域CpG岛的甲基化程度显着高于对照组。表明氨氮胁迫会导致花羔红点鲑肝脏中精氨酸酶1编码基因的DNA的甲基化升高变异。
二、地锦草提取物对小鼠血液过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、地锦草提取物对小鼠血液过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响（论文提纲范文）
（1）铁皮石斛黄酮干预力竭运动模型大鼠肝脏氧化应激及自噬水平的变化（论文提纲范文）
| 0引言Introduc■on |
| 1 材料和方法Materials and methods |
| 1.1 设计 |
| 1.2 时间及地点 |
| 1.3 材料 |
| 1.4 方法 |
| 1.4.1 动物分组及给药量 |
| 1.4.2 运动方案 |
| 1.4.3 样本采集 |
| 1.4.4 苏木精-伊红染色观察肝脏组织病理学变化 |
| 1.4.5 血清指标的测定 |
| 1.4.6 肝脏组织Beclin1、Atg7、LC3-Ⅱ、p62、Rab7表达水平的测定 |
| 1.5 主要观察指标 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果Results |
| 2.1 实验动物数量分析 |
| 2.2 肝脏组织病理学变化见图1。 |
| 2.3 各组大鼠血清ALT、AST活性变化 |
| 2.4 各组大鼠氧化应激指标的变化 |
| 2.5 各组大鼠肝组织Beclin1、Atg7、LC3-Ⅱ、p62和Rab7m RNA检测结果 |
| 2.6 各组大鼠肝组织Beclin1、Atg7、LC3-Ⅱ、p62和Rab7蛋白表达 |
| 3 讨论Discussion |
| 3.1 铁皮石斛黄酮对大鼠血清ALT、AST活性的影响 |
| 3.2 铁皮石斛黄酮对大鼠血清氧化应激指标的影响 |
| 3.3 铁皮石斛黄酮对大鼠肝脏组织Beclin1表达的影响 |
| 3.4 铁皮石斛黄酮对大鼠肝脏组织Atg7表达的影响 |
| 3.5 铁皮石斛黄酮对大鼠肝脏组织LC3-Ⅱ表达的影响 |
| 3.6 铁皮石斛黄酮对大鼠肝脏组织p62表达的影响 |
| 3.7 铁皮石斛黄酮对大鼠肝脏组织Rab7表达的影响 |
（2）黑沙蒿多糖对肉仔鸡免疫应激的缓解作用及其机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略语表 |
| 1 前言 |
| 1.1 免疫应激对动物的影响 |
| 1.2 免疫应激的调节机制 |
| 1.3 黑沙蒿及其提取物的研究现状 |
| 1.4 黑沙蒿多糖的生物学功能 |
| 1.4.1 黑沙蒿多糖对动物生长性能的影响 |
| 1.4.2 黑沙蒿多糖对动物免疫功能的影响 |
| 1.4.3 黑沙蒿多糖对动物抗氧化功能的影响 |
| 1.4.4 黑沙蒿多糖对动物胃肠道的影响 |
| 1.4.5 黑沙蒿多糖对动物糖代谢及脂代谢的影响 |
| 1.5 研究的目的与意义 |
| 1.6 研究内容和技术路线 |
| 1.6.1 研究内容 |
| 1.6.2 技术路线 |
| 2 试验研究 |
| 2.1 黑沙蒿多糖的提取优化、分离纯化、结构表征和体外活性的研究 |
| 2.1.1 引言 |
| 2.1.2 材料与方法 |
| 2.1.3 结果与分析 |
| 2.1.4 讨论 |
| 2.1.5 小结 |
| 2.2 黑沙蒿多糖对肉仔鸡免疫和抗氧化功能的影响 |
| 2.2.1 引言 |
| 2.2.2 材料与方法 |
| 2.2.3 结果与分析 |
| 2.2.4 讨论 |
| 2.2.5 小结 |
| 2.3 黑沙蒿多糖对肉仔鸡免疫应激的缓解作用及其分子调控机理研究 |
| 2.3.1 引言 |
| 2.3.2 材料与方法 |
| 2.3.3 结果与分析 |
| 2.3.4 讨论 |
| 2.3.5 小结 |
| 2.4 黑沙蒿多糖对肉仔鸡外周血淋巴细胞免疫应激的缓解作用 |
| 2.4.1 引言 |
| 2.4.2 材料与方法 |
| 2.4.3 结果与分析 |
| 2.4.4 讨论 |
| 2.4.5 小结 |
| 2.5 黑沙蒿多糖通过TLR4/NF-κB途径对肉仔鸡外周血淋巴细胞免疫应激的缓解作用及其机理研究 |
| 2.5.1 引言 |
| 2.5.2 材料与方法 |
| 2.5.3 结果与分析 |
| 2.5.4 讨论 |
| 2.5.5 小结 |
| 2.6 黑沙蒿多糖通过Nrf2/Keap1 途径对肉仔鸡外周血淋巴细胞免疫应激的缓解作用及其机理研究 |
| 2.6.1 引言 |
| 2.6.2 材料与方法 |
| 2.6.3 结果与分析 |
| 2.6.4 讨论 |
| 2.6.5 小结 |
| 3 论文总体讨论与结论 |
| 3.1 总体讨论 |
| 3.1.1 黑沙蒿多糖的制备条件及其结构表征 |
| 3.1.2 黑沙蒿多糖对肉仔鸡免疫应激的缓解作用及其机理 |
| 3.2 总体结论 |
| 3.3 创新点 |
| 3.4 有待进一步研究的问题 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（3）艾蒿醇提物对脂多糖刺激的肉仔鸡生长、免疫和抗氧化功能的影响及其机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略语表 |
| 1 前言 |
| 1.1 植物醇提物的生物学功能 |
| 1.1.1 植物醇提物的抗氧化作用 |
| 1.1.2 植物醇提物的免疫调节作用 |
| 1.1.3 植物醇提物的其它作用 |
| 1.1.4 植物醇提物在畜禽生产中的应用 |
| 1.2 艾蒿及其生物学功能 |
| 1.2.1 艾蒿概述 |
| 1.2.2 艾蒿的化学成分 |
| 1.2.3 艾蒿的生物学功能 |
| 1.3 本论文研究的目的意义 |
| 1.4 本论文研究的总体思路 |
| 1.4.1 技术路线 |
| 1.4.2 主要研究内容 |
| 2 试验研究 |
| 2.1 艾蒿醇提物对肉仔鸡血清免疫和抗氧化指标的影响 |
| 2.1.1 引言 |
| 2.1.2 材料与方法 |
| 2.1.3 结果与分析 |
| 2.1.4 讨论 |
| 2.1.5 小结 |
| 2.2 艾蒿醇提物对LPS刺激的肉仔鸡生长、营养代谢率、血液相关指标及肠道形态的影响 |
| 2.2.1 引言 |
| 2.2.2 材料与方法 |
| 2.2.3 结果与分析 |
| 2.2.4 讨论 |
| 2.2.5 小结 |
| 2.3 艾蒿醇提物对LPS刺激的肉仔鸡免疫和抗氧化功能的影响及其调控机理的研究 |
| 2.3.1 引言 |
| 2.3.2 材料与方法 |
| 2.3.3 结果与分析 |
| 2.3.4 讨论 |
| 2.3.5 小结 |
| 2.4 艾蒿黄酮的分离、纯化及其对肉仔鸡外周血淋巴细胞免疫和抗氧化功能的影响 |
| 2.4.1 引言 |
| 2.4.2 材料与方法 |
| 2.4.3 结果与分析 |
| 2.4.4 讨论 |
| 2.4.5 小结 |
| 2.5 艾蒿黄酮通过TLR4/NF-κB信号通路调节肉仔鸡外周血淋巴细胞免疫功能的机理研究 |
| 2.5.1 引言 |
| 2.5.2 材料与方法 |
| 2.5.3 结果与分析 |
| 2.5.4 讨论 |
| 2.5.5 小结 |
| 2.6 艾蒿黄酮通过Keap1/Nrf2 信号通路调节肉仔鸡外周血淋巴细胞抗氧化功能的机理研究 |
| 2.6.1 引言 |
| 2.6.2 材料与方法 |
| 2.6.3 结果与分析 |
| 2.6.4 讨论 |
| 2.6.5 小结 |
| 3 总体讨论与结论 |
| 3.1 总体讨论 |
| 3.1.1 艾蒿醇提物对肉仔鸡免疫功能的影响及其作用机理 |
| 3.1.2 艾蒿醇提物对肉仔鸡抗氧化功能的影响及作用机理 |
| 3.2 总体结论 |
| 3.3 创新点 |
| 3.4 有待进一步解决的问题 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（4）基于葡萄糖氧化酶稳定的铂纳米粒子多酶活性及自级联抗肿瘤作用的研究（论文提纲范文）
| 英文缩写字表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 基于葡萄糖氧化酶为稳定剂的PtNPs的制备及其模拟酶活性的研究 |
| 引言 |
| 1.1 实验仪器与试剂 |
| 1.1.1 主要实验仪器 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.1.3 主要溶液配制 |
| 1.2 实验部分 |
| 1.2.1 GOx-PtNPs的合成 |
| 1.2.2 未加稳定剂稳定的裸铂纳米粒子(Bare-PtNPs)的合成 |
| 1.2.3 GOx-PtNPs基本性能的研究 |
| 1.2.4 GOx-PtNPs葡萄糖氧化酶活性的研究 |
| 1.2.5 GOx-PtNPs模拟氧化酶活性的研究 |
| 1.2.6 GOx-PtNPs过氧化物模拟酶活性的研究 |
| 1.2.7 GOx-PtNPs过氧化氢模拟酶活性的研究 |
| 1.3 结果与讨论 |
| 1.3.1 GOx-PtNPs的表征 |
| 1.3.2 GOx-PtNPs葡萄糖氧化酶活性的研究 |
| 1.3.3 GOx-PtNPs模拟氧化酶活性的研究 |
| 1.3.4 GOx-PtNPs过氧化物模拟酶活性的研究 |
| 1.3.5 GOx-PtNPs过氧化氢模拟酶活性的研究 |
| 1.4 本章小结 |
| 第二章 基于葡萄糖氧化酶为稳定剂的PtNPs体外抗肿瘤活性研究 |
| 引言 |
| 2.1 实验仪器与试剂 |
| 2.1.1 主要实验仪器 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要溶液配制 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 GOx-PtNPs对不同细胞的体外毒性研究 |
| 2.2.2 细胞活性和细胞毒性检测 |
| 2.2.3 细胞凋亡检测 |
| 2.2.4 过氧化氢(H_2O_2)及其与GOx-PtNPs协同对肿瘤细胞的体外毒性研究 |
| 2.2.5 细胞内活性氧检测 |
| 2.2.6 GOx-PtNPs的体外溶血实验 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 GOx-PtNPs对不同细胞的体外毒性研究 |
| 2.3.2 细胞活性和细胞毒性检测 |
| 2.3.3 细胞凋亡检测 |
| 2.3.4 过氧化氢(H_2O_2)及其与GOx-PtNPs协同对肿瘤细胞的体外毒性研究 |
| 2.3.5 细胞内活性氧检测 |
| 2.3.6 GOx-PtNPs的体外溶血实验 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 基于葡萄糖氧化酶为稳定剂的PtNPs体内抗肿瘤活性研究 |
| 引言 |
| 3.1 实验仪器与试剂 |
| 3.1.1 主要实验仪器 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 主要溶液配制 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 GOx-PtNPs体内安全性评价 |
| 3.2.2 GOx-PtNPs肿瘤内过氧化氢浓度测定 |
| 3.2.3 GOx-PtNPs体内抗肿瘤活性评价 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 GOx-PtNPs体内安全性评价 |
| 3.3.2 GOx-PtNPs肿瘤内过氧化氢浓度测定 |
| 3.3.3 GOx-PtNPs体内抗肿瘤活性评价 |
| 3.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 纳米材料的模拟酶活性及其在医学中的应用 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（5）千日红提取物抗小鼠急性和慢性肝损伤的作用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 肝损伤的研究进展 |
| 1.1 肝损伤概述 |
| 1.2 急性肝损伤 |
| 1.3 慢性肝损伤 |
| 第二章 肝损伤与氧化应激和自噬 |
| 2.1 肝损伤与氧化应激 |
| 2.2 肝损伤与自噬 |
| 第三章 药用植物千日红的研究进展 |
| 3.1 千日红的主要成分 |
| 3.2 千日红的药理作用 |
| 3.3 千日红的应用与开发 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第一章 千日红水提物对APAP诱导的小鼠急性肝损伤的作用研究 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.2 结果与分析 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 第二章 千日红粗提物对CCl_4诱导的小鼠慢性肝损伤的作用研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（6）绿原酸、木犀草素和黄精多糖对猪精液冷冻保存效果的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 缩略词中英文对照表 |
| SUMMARY |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 精液的组成 |
| 1.2 精子的生物学特性 |
| 1.2.1 精子的结构 |
| 1.2.2 精子的功能 |
| 1.3 精液冷冻保存的机理 |
| 1.3.1 精液冷冻保存的理论基础 |
| 1.3.2 精液冷冻保存对精子的损伤原理 |
| 1.3.3 精液冷冻保存对精子的损伤途径 |
| 1.4 猪精液冷冻保存研究进展 |
| 1.4.1 猪精液冷冻保存简史 |
| 1.4.2 猪精液冷冻类型 |
| 1.4.3 猪精液冷冻稀释液 |
| 1.4.4 精液冷冻保护剂 |
| 1.5 精液质量评定 |
| 1.5.1 精子活力 |
| 1.5.2 精子活率 |
| 1.5.3 精子质膜完整性 |
| 1.5.4 精子顶体完整性 |
| 1.5.5 精子DNA完整性 |
| 1.5.6 精子线粒体活性 |
| 1.5.7 精子抗氧化性 |
| 1.6 绿原酸的研究进展 |
| 1.6.1 绿原酸简介 |
| 1.6.2 绿原酸的主要作用 |
| 1.7 木犀草素研究进展 |
| 1.7.1 木犀草素简介 |
| 1.7.2 木犀草素的主要作用 |
| 1.8 黄精多糖研究进展 |
| 1.8.1 黄精多糖简介 |
| 1.8.2 黄精多糖的主要作用 |
| 第二章 绿原酸对猪精液冷冻保存效果的研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 主要试剂及耗材 |
| 2.2.2 主要仪器及设备 |
| 2.2.3 试验溶液的配制 |
| 2.2.4 精液样品的采集与筛选 |
| 2.2.5 精液的平衡与稀释 |
| 2.2.6 精液的冷冻和解冻 |
| 2.2.7 解冻后精子质量评定 |
| 2.2.8 统计分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 绿原酸对猪精液冷冻保存后精子活力和活率的影响 |
| 2.3.2 绿原酸对猪精液冷冻保存后精子质膜完整性的影响 |
| 2.3.3 绿原酸对猪精液冷冻保存后精子顶体完整性的影响 |
| 2.3.4 绿原酸对猪精液冷冻保存后精子DNA完整性的影响 |
| 2.3.5 绿原酸对猪精液冷冻保存后精子线粒体活性的影响 |
| 2.3.6 绿原酸对猪精液冷冻保存后精子抗氧化酶活性的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 木犀草素对猪精液冷冻保存效果的研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 主要试剂及耗材 |
| 3.2.2 主要仪器及设备 |
| 3.2.3 溶液配制 |
| 3.2.4 精液样品采集 |
| 3.2.5 精液的平衡与稀释 |
| 3.2.6 精液的冷冻和解冻 |
| 3.2.7 解冻后精子质量评定 |
| 3.2.8 统计分析 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 木犀草素对冷冻保存猪精子活力和活率的影响 |
| 3.3.2 木犀草素对冷冻保存猪精子质膜完整性的影响 |
| 3.3.3 木犀草素对猪精液冷冻保存后精子顶体完整性的影响 |
| 3.3.4 木犀草素对猪精液冷冻保存后精子DNA完整性的影响 |
| 3.3.5 木犀草素对猪精液冷冻保存后精子线粒体活性的影响 |
| 3.3.6 木犀草素对猪精液冷冻保存后精子抗氧化酶活性的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 黄精多糖对猪精液冷冻保存效果的研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 主要试剂及耗材 |
| 4.2.2 主要仪器及设备 |
| 4.2.3 溶液配制 |
| 4.2.4 精液样品采集 |
| 4.2.5 精液的平衡与稀释 |
| 4.2.6 精液的冷冻和解冻 |
| 4.2.7 解冻后精子质量评定 |
| 4.2.8 统计分析 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 黄精多糖对冷冻保存猪精子活力和活率的影响 |
| 4.3.2 黄精多糖对冷冻保存猪精子质膜完整性的影响 |
| 4.3.3 黄精多糖对猪精液冷冻保存后精子顶体完整性的影响 |
| 4.3.4 黄精多糖对猪精液冷冻保存后精子DNA完整性的影响 |
| 4.3.5 黄精多糖对猪精液冷冻保存后精子线粒体活性的影响 |
| 4.3.6 黄精多糖对猪精液冷冻保存后精子抗氧化酶活性的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 不同配伍对猪精液冷冻保存效果的研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 主要试剂及耗材 |
| 5.2.2 主要仪器及设备 |
| 5.2.3 溶液配制 |
| 5.2.4 精液样品采集 |
| 5.2.5 精液的平衡与稀释 |
| 5.2.6 精液的冷冻和解冻 |
| 5.2.7 解冻后精子质量评定 |
| 5.2.8 试验设计 |
| 5.2.9 统计分析 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 不同配伍对冷冻保存猪精子活力和活率的影响 |
| 5.3.2 不同配伍对冷冻保存猪精子质膜完整性的影响 |
| 5.3.3 不同配伍对猪精液冷冻保存后精子顶体完整性的影响 |
| 5.3.4 不同配伍对猪精液冷冻保存后精子DNA完整性的影响 |
| 5.3.5 不同配伍对猪精液冷冻保存后精子线粒体活性的影响 |
| 5.3.6 不同配伍对猪精液冷冻保存后精子抗氧化酶活性的影响 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 不同处理对猪精液人工授精的研究 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 材料与方法 |
| 6.2.1 主要试剂及耗材 |
| 6.2.2 主要仪器及设备 |
| 6.2.3 溶液配制 |
| 6.2.4 精液样品采集 |
| 6.2.5 精子冷冻保存 |
| 6.2.6 精液人工授精 |
| 6.2.7 不返情率 |
| 6.2.8 受胎率 |
| 6.2.9 分娩率及窝产仔数 |
| 6.2.10 统计分析 |
| 6.3 结果与分析 |
| 6.3.1 不同处理对猪人工授精不返情率的影响 |
| 6.3.2 不同处理对猪人工授精受胎率的影响 |
| 6.3.3 不同配伍对猪人工授精分娩率的影响 |
| 6.3.4 不同配伍对猪人工授精窝产仔数的影响 |
| 6.4 讨论 |
| 6.5 小结 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 在读期间发表论文和研究成果 |
| 导师简介 |
（7）地锦多糖的制备及对小鼠免疫增强活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 地锦草的研究进展 |
| 1.1.1 地锦草的化学成分 |
| 1.1.2 地锦草的药理作用 |
| 1.1.3 地锦草的临床应用 |
| 1.2 多糖的研究进展 |
| 1.2.1 多糖的生物活性 |
| 1.2.2 多糖结构的研究 |
| 1.2.3 多糖的提取及分离纯化 |
| 1.2.4 多糖在动物生产中的应用 |
| 1.3 本研究的目的意义 |
| 第二章 地锦多糖的提取与脱色纯化 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 药材 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 地锦样品的前处理 |
| 2.2.2 地锦多糖的提取 |
| 2.2.3 地锦多糖的含量测定 |
| 2.2.4 地锦多糖中蛋白含量测定 |
| 2.2.5 地锦多糖双氧水脱色的最佳条件的优化 |
| 2.2.6 地锦多糖的纯化 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 地锦多糖的提取结果 |
| 2.3.2 地锦多糖的纯化结果 |
| 2.3.3 地锦多糖双氧水脱色的单因素试验结果 |
| 2.3.4 地锦多糖双氧水脱色的正交试验结果 |
| 2.3.5 地锦多糖双氧水脱色的验证试验结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 地锦多糖的提取方法 |
| 2.4.2 多糖的含量测定方法 |
| 2.4.3 地锦多糖的双氧水脱色 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 地锦多糖的结构鉴定 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 地锦多糖 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 主要仪器 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 地锦多糖的紫外光谱分析 |
| 3.2.2 地锦多糖的红外光谱分析 |
| 3.2.3 地锦多糖的单糖组成分析 |
| 3.2.4 地锦多糖的分子量检测 |
| 3.2.5 地锦多糖的糖醛酸含量测定 |
| 3.2.6 地锦多糖的刚果红试验 |
| 3.2.7 地锦多糖的核磁共振波谱测定 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 地锦多糖的紫外光谱分析结果 |
| 3.3.2 地锦多糖的红外光谱分析结果 |
| 3.3.3 地锦多糖的单糖组成结果 |
| 3.3.4 地锦多糖的分子量结果 |
| 3.3.5 地锦多糖的糖醛酸含量结果 |
| 3.3.6 地锦多糖的刚果红试验结果 |
| 3.3.7 地锦多糖的核磁试验结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 多糖的光谱分析 |
| 3.4.2 多糖的分子量及及糖醛酸分析 |
| 3.4.3 多糖的核磁分析 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞免疫活性的影响 |
| 4.1 材料 |
| 4.1.1 地锦多糖 |
| 4.1.2 试验动物 |
| 4.1.3 主要试剂 |
| 4.1.4 主要仪器 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 小鼠外周血淋巴细胞的分离和培养 |
| 4.2.2 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞最大安全浓度的测定 |
| 4.2.3 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞增殖的影响 |
| 4.2.4 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞周期的影响 |
| 4.2.5 地锦多糖对小鼠外周血CD4~+、CD8~+T淋巴细胞亚群的影响 |
| 4.2.6 地锦多糖对小鼠淋巴细胞免疫球蛋白IgA、IgG的影响 |
| 4.2.7 地锦多糖对小鼠淋巴细胞细胞因子分泌的影响 |
| 4.2.8 数据分析 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞最大安全浓度的测定 |
| 4.3.2 地锦多糖单独刺激时各组淋巴细胞增殖的结果 |
| 4.3.3 地锦多糖协同PHA刺激时淋巴细胞增殖的结果 |
| 4.3.4 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞周期的影响结果 |
| 4.3.5 地锦多糖对CD4~+、CD8~+T 淋巴细胞亚群的影响结果 |
| 4.3.6 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞免疫球蛋白IgA、IgG的影响结果 |
| 4.3.7 地锦多糖对小鼠外周血淋巴细胞细胞因子分泌的影响结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 地锦多糖对细胞生长的影响 |
| 4.4.2 地锦多糖对淋巴细胞增殖的影响 |
| 4.4.3 地锦多糖对淋巴细胞周期的影响 |
| 4.4.4 地锦多糖对CD4~+、CD8~+T 淋巴细胞亚群的影响 |
| 4.4.5 地锦多糖对淋巴细胞细胞因子分泌的影响 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响 |
| 5.1 材料 |
| 5.1.1 地锦多糖 |
| 5.1.2 试验动物 |
| 5.1.3 主要试剂 |
| 5.1.4 主要仪器 |
| 5.2 方法 |
| 5.2.1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离和培养 |
| 5.2.2 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞最大安全浓度的测定 |
| 5.2.3 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞增殖的影响 |
| 5.2.4 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响 |
| 5.2.5 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO和iNOS生成的影响 |
| 5.2.6 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞细胞因子的影响 |
| 5.2.7 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞CD14和MHC-II表达 |
| 5.2.8 数据分析 |
| 5.3 结果 |
| 5.3.1 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞最大安全浓度的测定 |
| 5.3.2 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞增殖的影响结果 |
| 5.3.3 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响结果 |
| 5.3.4 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO和iNOS生成的影响结果 |
| 5.3.5 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞细胞因子的影响结果 |
| 5.3.6 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞CD14和MHC-II表达的影响结果 |
| 5.4 讨论 |
| 5.4.1 地锦多糖对巨噬细胞增殖的影响 |
| 5.4.2 地锦多糖对巨噬细胞吞噬能力的影响 |
| 5.4.3 地锦多糖对巨噬细胞分泌NO和iNOS生成的影响 |
| 5.4.4 地锦多糖对巨噬细胞细胞因子的影响 |
| 5.4.5 地锦多糖对巨噬细胞CD14和MHC-II表达的影响 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的抗氧化作用研究 |
| 6.1 材料 |
| 6.1.1 地锦多糖 |
| 6.1.2 试验动物 |
| 6.1.3 主要仪器 |
| 6.1.4 主要试剂 |
| 6.2 方法 |
| 6.2.1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离和培养 |
| 6.2.2 小鼠腹腔巨噬细胞形态学观察 |
| 6.2.3 地锦多糖对H_2O_2诱导的巨噬细胞氧化损伤细胞存活率影响 |
| 6.2.4 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞抗氧化作用的测定 |
| 6.2.5 数据分析 |
| 6.3 结果 |
| 6.3.1 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞形态的影响 |
| 6.3.2 地锦多糖对H_2O_2诱导的小鼠腹腔巨噬细胞氧化损伤细胞存活率影响 |
| 6.3.3 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞SOD酶活力的影响 |
| 6.3.4 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞GSH-PX酶活力的影响 |
| 6.3.5 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞MDA含量的影响 |
| 6.3.6 地锦多糖对小鼠腹腔巨噬细胞MPO酶活力的影响 |
| 6.4 讨论 |
| 6.4.1 地锦多糖对巨噬细胞SOD酶活力的影响 |
| 6.4.2 地锦多糖对巨噬细胞GSH-PX酶活力的影响 |
| 6.4.3 地锦多糖对巨噬细胞MDA含量的影响 |
| 6.4.4 地锦多糖对巨噬细胞MPO酶活力的影响 |
| 6.5 小结 |
| 第七章 地锦多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用研究 |
| 7.1 材料 |
| 7.1.1 地锦多糖 |
| 7.1.2 试验动物 |
| 7.1.3 主要仪器 |
| 7.1.4 主要试剂 |
| 7.2 方法 |
| 7.2.1 动物分组及处理 |
| 7.2.2 地锦多糖对免疫抑制小鼠免疫器官指数分析 |
| 7.2.3 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾细胞增殖和腹腔巨噬细胞增殖的影响 |
| 7.2.4 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞周期的影响 |
| 7.2.5 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞CD4~+、CD8~+T亚群的影响 |
| 7.2.6 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞免疫球蛋白的影响 |
| 7.2.7 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞细胞因子分泌的影响 |
| 7.2.8 地锦多糖对免疫抑制小鼠抗氧化作用指标的测定 |
| 7.2.9 数据分析 |
| 7.3 结果 |
| 7.3.1 地锦多糖对免疫抑制小鼠免疫器官指数分析 |
| 7.3.2 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾细胞增殖和腹腔巨噬细胞增殖的结果 |
| 7.3.3 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞周期的影响结果 |
| 7.3.4 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞CD4~+、CD8~+T亚群的影响结果 |
| 7.3.5 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞免疫球蛋白IgA、IgG的影响结果 |
| 7.3.6 地锦多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞细胞因子分泌的影响结果 |
| 7.3.7 地锦多糖对免疫抑制小鼠抗氧化活性的影响结果 |
| 7.4 讨论 |
| 7.4.1 多糖对免疫抑制小鼠周期和CD4+、CD8+的影响 |
| 7.4.2 多糖对免疫抑制小鼠细胞因子和免疫球蛋白的影响 |
| 7.5 小结 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）枸芪粗提物对川藏黑猪脂质抗氧化性的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 脂质过氧化与危害 |
| 1.2 机体中的抗氧化物质 |
| 1.3 谷胱甘肽代谢信号通路 |
| 1.4 天然植物对动物抗氧化性能的促进作用 |
| 1.5 研究目的与意义 |
| 1.6 研究内容与技术路线 |
| 第二章 枸芪粗提物对川藏黑猪生长性能和肉品质的影响 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 枸芪粗提物对川藏黑猪脂质抗氧化性能的影响 |
| 3.1 材料 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 枸芪粗提物对川藏黑猪脂质抗氧化机制的调控 |
| 4.1 材料 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 结论和创新点 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 创新点 |
| 5.3 有待进一步研究的问题 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 硕士期间发表的文章 |
（9）重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ的毒性评价及重楼皂苷Ⅰ的肝毒性机制探究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 重楼的药效成分、药理作用和不良反应研究现状 |
| 1 药效成分 |
| 2 药理作用 |
| 3 不良反应研究现状 |
| 4 总结与讨论 |
| 参考文献 |
| 综述二 中药药源性肝损伤机制研究进展 |
| 1 CYP代谢 |
| 2 线粒体稳态 |
| 3 氧化损伤 |
| 4 细胞凋亡 |
| 5 胆汁淤积 |
| 6 Ca~(2+)浓度平衡破坏 |
| 7 免疫激活介导的炎症因子释放 |
| 8 特异反应 |
| 9 总结与讨论 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 技术路线图 |
| 第一章 重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ的体内外毒性评价 |
| 第一节 重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ的细胞毒性实验 |
| 1 概述 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 第二节 模式生物-斑马鱼评价重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ的毒性 |
| 1 概述 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 第三节 重楼皂苷Ⅰ的小鼠毒性实验研究 |
| 1 概述 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 第四节 小结与讨论 |
| 1 重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ的细胞毒性实验 |
| 2 模式生物-斑马鱼评价重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ的毒性 |
| 3 重楼皂苷Ⅰ的小鼠毒性实验研究 |
| 本章总结与讨论 |
| 第二章 重楼皂苷Ⅰ的细胞毒性机制研究 |
| 第一节 肝细胞毒性机制研究 |
| 1 概述 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 第二节 心血管细胞毒性机制研究 |
| 1 概述 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 第三节 小结与讨论 |
| 1 肝细胞毒性机制研究 |
| 2 心血管毒性机制研究 |
| 本章总结 |
| 第三章 基于蛋白组学和代谢组学探索重楼皂苷Ⅰ的体内肝毒性机制 |
| 第一节 TMT标记定量蛋白质组学 |
| 1 概述 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 生物信息分析 |
| 6 机制分析 |
| 7 PPI网络 |
| 8 潜在生物标志物 |
| 第二节 Q300靶向代谢组学 |
| 1 概述 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 通路富集 |
| 6 通路分析 |
| 7 潜在生物标志物 |
| 第三节 小结与讨论 |
| 1 TMT标记定量蛋白质组学 |
| 2 Q300靶向代谢组学 |
| 3 蛋白组学-代谢组学关联分析 |
| 第四节 重楼皂苷Ⅰ肝毒性机制验证 |
| 1 动物组织Western blot验证 |
| 2 斑马鱼qPCR实验验证 |
| 3 小结与讨论 |
| 结语 |
| 1 重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ的体内外毒性评价 |
| 2 重楼皂苷Ⅰ的细胞毒性机制研究 |
| 3 重楼卓苷Ⅰ的蛋白组学和代谢组学研究 |
| 4 重楼皂苷Ⅰ肝毒性机制推测与分析 |
| 5 不足与展望 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）花羔红点鲑氨氮应激生理解毒机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献综述:鱼类应对氨氮胁迫的响应机制研究进展 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 养殖水体中氨氮的来源及危害 |
| 1.2.1 养殖水体中氨氮的来源 |
| 1.2.2 养殖水体中氨氮的危害 |
| 1.3 氨氮暴露对鱼类的毒性作用 |
| 1.3.1 行为变化 |
| 1.3.2 生理变化 |
| 1.3.3 生长性能 |
| 1.4 鱼类氨氮解毒机制的研究进展 |
| 1.4.1 减少蛋白质(或氨基酸)分解代谢 |
| 1.4.2 部分氨基酸分解形成丙氨酸 |
| 1.4.3 激活氨排泄 |
| 1.4.4 挥发氨 |
| 1.4.5 谷氨酰胺合成 |
| 1.4.6 尿素循环 |
| 1.4.7 提高内源氨的耐受性 |
| 1.5 氨氮胁迫下营养调控的研究进展 |
| 1.5.1 蛋白质和氨基酸 |
| 1.5.2 脂质 |
| 1.5.3 免疫增强剂 |
| 1.6 环境胁迫下DNA甲基化的研究进展 |
| 1.6.1 DNA甲基化概述 |
| 1.6.2 环境胁迫下鱼类DNA甲基化的研究 |
| 1.7 本研究的目的和意义 |
| 第二章 氨氮暴露对花羔红点鲑的毒性作用研究 |
| 2.1 研究背景 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 氯化铵暴露96h半致死浓度(LC_(50))确定 |
| 2.2.2 实验设计及取样 |
| 2.2.3 组织中氨及氨基酸含量测定 |
| 2.2.4 酶活性测定 |
| 2.2.5 免疫应答指标测定 |
| 2.2.6 统计分析 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论 |
| 第三章 花羔红点鲑氨氮解毒途径的研究 |
| 3.1 研究背景 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 腹腔注射醋酸铵96h半致死浓度确定 |
| 3.2.2 实验设计与取样 |
| 3.2.3 血液测定 |
| 3.2.4 组织中谷氨酰胺含量测定 |
| 3.2.5 酶活性检测 |
| 3.2.6 免疫应答指标测定 |
| 3.2.7 总RNA提取和cDNA合成 |
| 3.2.8 实时荧光定量PCR |
| 3.2.9 统计分析 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 结论 |
| 第四章 尿素循环在花羔红点鲑氨氮解毒过程中的作用研究 |
| 4.1 研究背景 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 实验设计与取样 |
| 4.2.2 组织中氨及氨基酸含量测定 |
| 4.2.3 氨氮代谢酶活性分析 |
| 4.2.4 凋亡细胞的吖啶橙荧光检测 |
| 4.2.5 统计分析 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 结论 |
| 第五章 精氨酸酶在花羔红点鲑氨氮解毒过程中的作用研究 |
| 5.1 研究背景 |
| 5.2 材料和方法 |
| 5.2.1 动物、实验设计及取样 |
| 5.2.2 生化成分分析 |
| 5.2.3 血液测定 |
| 5.2.4 酶活性测定 |
| 5.2.5 免疫应答指标测定 |
| 5.2.6 统计分析 |
| 5.3 结果 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 结论 |
| 第六章 花羔红点鲑氨氮解毒的转录组证据 |
| 6.1 研究背景 |
| 6.2 材料与方法 |
| 6.2.1 实验设计及取样 |
| 6.2.2 总RNA提取 |
| 6.2.3 样品cDNA文库构建及测序 |
| 6.2.4 测序及质控 |
| 6.2.5 功能基因注释 |
| 6.2.6 差异表达基因分析 |
| 6.2.7 差异表达基因功能注释及富集分析 |
| 6.2.8 实时荧光定量PCR |
| 6.2.9 氨氮代谢酶活性分析 |
| 6.2.10 统计分析 |
| 6.3 结果 |
| 6.4 讨论 |
| 第七章 氨氮胁迫对花羔红点鲑精氨酸酶编码基因DNA甲基化的影响 |
| 7.1 研究背景 |
| 7.2 材料与方法 |
| 7.2.1 实验设计及取样 |
| 7.2.2 cDNA末端快速扩增(RACE) |
| 7.2.3 染色体步移 |
| 7.2.4 DNA甲基化分析 |
| 7.3 结果 |
| 7.3.1 精氨酸酶1基因序列全长分析 |
| 7.3.2 精氨酸酶1基因甲基化分析 |
| 7.4 讨论 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
四、地锦草提取物对小鼠血液过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响（论文参考文献）
- [1]铁皮石斛黄酮干预力竭运动模型大鼠肝脏氧化应激及自噬水平的变化[J]. 王思涵,陈俊吉,莫伟彬. 中国组织工程研究, 2022(20)
- [2]黑沙蒿多糖对肉仔鸡免疫应激的缓解作用及其机理研究[D]. 邢媛媛. 内蒙古农业大学, 2021(01)
- [3]艾蒿醇提物对脂多糖刺激的肉仔鸡生长、免疫和抗氧化功能的影响及其机理研究[D]. 杨硕. 内蒙古农业大学, 2021(01)
- [4]基于葡萄糖氧化酶稳定的铂纳米粒子多酶活性及自级联抗肿瘤作用的研究[D]. 林丹. 福建医科大学, 2021(02)
- [5]千日红提取物抗小鼠急性和慢性肝损伤的作用研究[D]. 覃海燕. 吉林大学, 2021(01)
- [6]绿原酸、木犀草素和黄精多糖对猪精液冷冻保存效果的研究[D]. 何涛. 甘肃农业大学, 2021(01)
- [7]地锦多糖的制备及对小鼠免疫增强活性研究[D]. 孙文静. 西北农林科技大学, 2021(01)
- [8]枸芪粗提物对川藏黑猪脂质抗氧化性的影响[D]. 李祯. 北京农学院, 2021(08)
- [9]重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ的毒性评价及重楼皂苷Ⅰ的肝毒性机制探究[D]. 王文平. 北京中医药大学, 2021(02)
- [10]花羔红点鲑氨氮应激生理解毒机制研究[D]. 朱星樽. 东北师范大学, 2021(09)