一、凋亡调节基因bcl-2,bax和fas在子宫内膜异位症中的表达（论文文献综述）
何顺之[1]（2020）在《G蛋白偶联雌激素受体/miR-148a轴介导子宫内膜异位细胞凋亡的机制研究》文中认为研究背景:子宫内膜异位症（EMS）的特点是子宫内膜样组织在子宫腔外种植,是雌激素依赖的具有恶性肿瘤行为的炎症性疾病,是造成女性慢性盆腔疼痛、痛经和不孕症最常见的原因之一,在育龄期妇女中的发病率约为10%-15%。虽然子宫内膜异位症的确切发病机制尚不清楚,但大量研究表明雌激素在其发生和维持中起着至关重要的作用。除了经典的雌激素基因组效应外,还有快速的非基因组信号效应,后者由一种G蛋白偶联雌激素受体（GPER）介导,与传统的雌激素受体（ER）一起调节对雌激素的生理效应。由此推测GPER的激活可能是导致子宫内膜异位症进展的机制之一。目前,在子宫内膜异位症病因研究中,对于雌激素受体的作用研究已经非常的成熟,但是关于新型雌激素受体GPER与子宫内膜异位症临床特征关系的研究却十分有限,既往的研究主要集中在异位症患者在位内膜及异位内膜组织中GPER蛋白及mRNA的表达情况,组织的获取是有创的且患者花费较高。本研究拟同时检测异位症患者血清中GPER的mRNA的表达情况,探讨其在子宫内膜异位症发病中的作用及预测价值。众所周知,miRNA是非编码单链RNA分子,仅由20-23个核苷酸序列组成。尽管长度有限,但是普遍存在于真核细胞的生物体内,在机体中发挥重要的作用。通过与靶基因mRNA的3’端非翻译区结合,直接诱导靶基因mRNA降解或抑制其蛋白质合成,从而参与调控细胞的多种功能。miR-148a作为miRNA中的一员,是近几年来研究比较广泛的具有明显抑癌效应的一个miRNA。miR-148a通过对靶基因的调控抑制肿瘤细胞的增殖凋亡、侵袭、转移等生物学特性,进而抑制肿瘤和耐药的发生,同时对恶性肿瘤的治疗及预后也有重要的参考价值。人类白细胞抗原-G（HLA-G）是HLAIb类抗原,是一种具有多种免疫调节作用的分子,HLA-G介导免疫细胞功能的抑制,被认为是肿瘤逃避免疫监视的重要机制。子宫内膜异位症病理形态上虽然属于良性病变,但也具有侵袭、粘附等类似恶性肿瘤的生物学行为。根据生物学信息显示,HLA-G3 UTR具有结合miR-148a的作用靶点,因此,miR-148a可以靶向调节HLA-G的表达。但miR-148a在子宫内膜异位症中的作用尚未见报道。miR-148a/HLA-G是否导致了异位内膜细胞增殖、凋亡、侵袭能力的改变,是否联合GPER共同参与了子宫内膜异位症的发生和进展,这些问题也鲜有报道,值得我们去进一步的探索。同样,以往的研究主要集中在异位症患者在位内膜及异位内膜组织中miRNA的表达。由于血液中miRNA具有稳定性强、特异性好、灵敏度高等特点,是理想的生物标记物。因此本研究首次研究血清中miR-148a表达情况,探讨其在子宫内膜异位症发病中的作用及预测价值。并通过体外细胞实验,验证在GPER的参与下,miR-148a/HLA-G通路在子宫内膜异位症发病中的作用。进一步通过研究大鼠子宫内膜异位模型,在体水平探究miR-148a对异位症组织的影响。以上也正是本课题的创新点。本课题的研究内容将从以下四个部分进行阐述:第一部分:GPER的表达与子宫内膜异位症临床特征的关系第二部分:miR-148a在子宫内膜异位症患者血清中的表达及临床意义第三部分:GPER/miR-148a介导子宫内膜异位细胞的凋亡第四部分:miR-148a对大鼠子宫内膜异位症的治疗作用第一部分:GPER的表达与子宫内膜异位症临床特征的关系目的:通过检测对照组和子宫内膜异位症患者组织中GPER蛋白及mRNA、血清中mRNA的表达,研究GPER表达与子宫内膜异位症临床特征的关系,探讨其对子宫内膜异位症的诊断及治疗的价值。方法:1.研究对象:共纳入93例子宫内膜异位症患者和82例正常女性对照者。子宫内膜异位症患者按照美国生育协会（ASRM）分期,其中Ⅰ-Ⅱ期40例,Ⅲ-Ⅳ期53例（其中15人在术前三个月给予醋酸亮丙瑞林（LA）3.75mg肌注,每28天注射一次,除此未应用其他激素类药物比如避孕药等,且在醋酸亮丙瑞林治疗期间,未行雌激素反向添加治疗。故Ⅲ-Ⅳ期异位症患者根据治疗情况进一步分为治疗组15人;其余38人未行醋酸亮丙瑞林治疗,为未治疗组）。2.应用免疫组织化学和Western blot方法检测GPER蛋白在正常对照组内膜及不同分期异位症患者的在位内膜以及异位内膜中的表达水平。3.实时定量PCR检测GPER mRNA在正常对照组和不同分期异位症患者血清中表达水平。结果:1.免疫组化及Western blot结果显示GPER蛋白在正常内膜组织、在位内膜及异位内膜中表达呈递增趋势,异位内膜及在位内膜中的表达均高于正常内膜（P<0.05）,同时异位内膜中的表达高于在位内膜（P<0.05）。2.组织中GPER mRNA表达情况:正常内膜、在位内膜以及异位内膜组织中的相对表达量亦呈递增趋势,两两比较差异均有统计学意义（P<0.05）;血清中GPER mRNA表达情况:正常对照组低于异位症患者组并有统计学意义（P<0.05）。3.GPER蛋白在子宫内膜异位症Ⅲ-Ⅳ期患者中表达量高于Ⅰ-Ⅱ期患者,二者比较有显着性差异（P<0.05）。4.Ⅲ-Ⅳ期异位症患者中,治疗组的GPER在组织中的蛋白表达、mRNA表达及血清中mRNA表达均与未经治疗的患者相比较显着降低（P<0.05）。结论:1.GPER的表达与子宫内膜异位症的发病紧密相关,与疾病的分期有一定的相关性,可能参与了疾病的进程。2.GnRHa可降调GPER的表达。第二部分:miR-148a在子宫内膜异位症患者血清中的表达及临床意义目的:通过检测正常对照组及子宫内膜异位症患者血清中miR-148a的表达,探讨miR-148a与子宫内膜异位症的发病关系、临床特征及诊断价值。方法:1.应用实时荧光定量PCR方法检测子宫内膜异位症患者及正常对照人群的血清中miR-148a的表达水平。2.绘制miR-148a用于诊断子宫内膜异位症的ROC曲线,计算曲线下面积（area under the curve,AUC）以评估miR-148a对子宫内膜异位症诊断的准确性。结果:1.实时荧光定量PCR的结果显示,内异症患者及正常对照组血清中均检测出miR-148a的表达,而在内异症患者血清中miR-148a的相对表达量显着低于对照组（P<0.05）。2.miR-148a在Ⅰ-Ⅱ期内异症患者血清的表达高于Ⅲ-Ⅳ期内异症患者血清的表达,且两组之间存在统计学差异（P<0.05）。3.GraphPad Prism8.0绘制miR-148a检测对诊断内异症的ROC曲线,AUC值为0.91（优良）,且P<0.05,差异均有统计学意义。敏感度为76.8%,特异度为91.7%,置信区间为0.86-0.96。结论:1.miR-148a的表达参与了子宫内膜异位症的发病及疾病的进程,并且与疾病的分期有相关性。2.血清中miR-148a对内异症的诊断有一定的参考价值,或可成为子宫内膜异位症潜在的诊断标志物。第三部分:GPER/miR-148a介导的子宫内膜异位细胞的凋亡目的:通过体外实验,研究miR-148a对子宫内膜异位细胞行为的影响,进一步探索GPER/miR-148a通过HLA-G靶基因对子宫内膜异位细胞增殖及凋亡的影响。方法:1.子宫内膜异位细胞系Hs832.Tc细胞株中转染miR-148amimics、anti-miR-148a,分别用于上调和沉默miR-148a的表达,采用MTT法和流式细胞术分析miR-148a的过表达或沉默对Hs832.Tc细胞增殖和凋亡的影响。2.应用caspase-3和caspase-9活性检测试剂盒及Western blot方法检测miR-148a对Hs832.Tc细胞中caspase-3和caspase-9活性以及miR-148a的过表达或沉默对Bax/Bcl-2的表达影响。3.Western blot检测白细胞抗原G（HLA-G）的表达量。4.添加GPER的抑制剂G15,用于降低GPER蛋白的表达。采用实时定量PCR检测抑制GPER后对miR-148a表达影响。5.评估抑制GPER表达后,对miR-148a介导的Hs832.Tc细胞增殖、凋亡以及HLA-G蛋白表达量的影响。结果:1.MTT 实验表明,在 miR-148amimics 转染 12h、24h 和 48h 后,Hs832.Tc细胞的增殖速率较起始时均有所降低。在转染48h后,与阴性对照组相比,miR-148a的过表达显着抑制Hs832.Tc细胞的增殖（P<0.05）;而下调miR-148a表达则可以促进Hs832Tc细胞的增殖,呈时间依赖性,在转染48h后与对照组相比出现显着增加。2.流式细胞分析结果显示上调miR-148a表达在转染48h后可以显着诱导Hs832.Tc 细胞凋亡（P<0.05）,Hs832.Tc 细胞中 caspase-3 和 caspase-9 的活性显着增加。同时检测到Bax的表达量增加,而Bcl-2的表达量则减少,Hs832Tc细胞中Bax/Bcl-2的比率大幅度上升。下调miR-148a的表达量可以使Hs832.Tc细胞中caspase-3和caspase-9活性与阴性对照组相比显着降低,Bax/Bcl-2比值也显着降低。3.miR-148a过表达可以导致Hs832.Tc细胞中人类白细胞抗原G（HLA-G）表达量降低;而抑制miR-148a的表达又可以使HLA-G的表达水平较对照组增加。4.与未用G15处理的细胞相比,G15能够显着抑制Hs832.Tc细胞的GPER蛋白表达（P<0.05）。然而,与单独上调miR-148a组相比,在Hs832.Tc细胞加入G15后可以显着增加miR-148a在细胞中的表达。5.与单独上调miR-148a组相比,使用G15抑制GPER表达后,即下调GPER表达,可导致miR-148a过表达对Hs832.Tc细胞凋亡作用明显增强。6.下调GPER可以导致caspase-3、caspase-9以及Bax/Bcl-2比值增加的趋势更加明显,与单纯过表达miR-148a相比有显着差异。miR-148a过表达引起HLA-G蛋白的表达量显着下降,而下调GPER可以使HLA-G表达量进一步下降（P<0.05）。结论:1.miR-148a可以抑制子宫内膜异位细胞系增殖能力,促进细胞凋亡,同时抑制细胞系中HLA-G的表达。2.抑制GPER,增加了 miR-148a在细胞中的表达,增强miR-148a过表达对子宫内膜异位细胞系凋亡的作用。同时可以使HLA-G表达量进一步下降。3.GPER/miR-148a/HLA-G轴影响了异位内膜细胞的增殖、凋亡。第四部分:miR-148a对大鼠子宫内膜异位症治疗作用目的:基于上述研究,本部分拟通过在体水平研究miR-148a对SD大鼠子宫内膜异位模型异位囊肿的治疗作用。方法:1.采用自体移植的方法建立大鼠内异症模型,解剖鉴定,并测量建模成功后内异症囊肿的体积。选取未行建模手术10只作为假手术组;选取建模成功的SD大鼠27只,随机分为空白组（n=9）、阴性对照组（n=9）、miR-148a组（n=9）,每组分别经尾静脉注射30μL无菌双蒸水、30μLmimic NC混合物、30μL miR-148a mimic混合物,每隔3d给药1次,共4次。2.末次给药48h后麻醉大鼠并处死,剖腹探查,测量每组SD大鼠内异症模型异位囊肿的大小,比较各组异位囊肿体积的差异。3.取下假手术组的子宫内膜及建模成功大鼠的异位内膜组织,部分组织进行免疫组化和HE染色,在组织病理学水平比较各组的差异。4.Western blot及qPCR分别检测剩余组织中E-cadherin及N-cadherin蛋白表达水平及mRNA的表达水平。结果:1.手术建模4周后,剖腹探查,采用自体移植方法可以建立大鼠子宫内膜异位症模型,其建模成功率为90%。建模成功的大鼠随机分成三组（空白组、阴性对照组、miR-148a组）,给药前各组的异位囊肿体积差异无统计学意义（P>0.05）。2.给药处理后,空白组和阴性对照组异位囊肿的体积大小差异无统计学意义（P>0.05）,但miR-148a组与空白组和阴性对照组相比,其囊肿的体积显着变小,差异有统计学意义（P<0.05）。3.在组织病理水平检测发现,与假手术组相比,空白组、阴性对照组异位囊肿含有子宫内膜的腺体和间质细胞,固有层和周围的腺体样结构界限不明显,纤维化程度高;而miR-148a组的纤维化程度减弱,腺样体结构开始丰富,腺上皮细胞呈柱状或高柱状生长,朝向正常结构改善。4.免疫组化的结果显示E-cadherin在假手术组的子宫内膜中呈强阳性表达,阳性表达率为100%,而在各模型实验组异位内膜中呈弱阳性表达,阳性表达率分别为空白组53%、阴性对照组51%、miR-148a组75%,表达差异明显（P<0.05）;而经miR-148a药物治疗组的E-cadherin表达相对于空白组和阴性对照组有所升高（P<0.05）。N-cadherin在假手术组中主要呈弱阳性表达,阳性表达率为66%;在异位症模型中呈强阳性表达,分别为:空白组92%、阴性对照组90%、miR-148a组76%,与假手术组正常内膜比较有统计学差异（P<0.05）。而miR-148a组相对于空白组和阴性对照组的N-cadherin表达明显下调,并有统计学意义（P<0.05）。5.Western blot结果显示,E-cadherin在假手术组中高表达,与假手术组相比,内异症模型空白组、阴性对照组以及miR-148a组中的E-cadherin蛋白的表达水平明显降低（p<0.05）,而miR-148a组E-cadherin蛋白的表达又明显高于内异症模型空白组和阴性对照组（p<0.05）。N-cadherin蛋白的表达结果则与E-cadherin蛋白相反,N-cadherin蛋白在假手术组中表达较低,内异症模型空白组、阴性对照组以及miR-148a组中的表达水平明显高于假手术组（p<0.05）,而miR-148a组N-cadherin蛋白的表达又明显低于内异症模型空白组和阴性对照组（p<0.05）。6.qPCR结果显示:与假手术组相比,E-cadherin mRNA在内异症模型的空白组、阴性对照组及miR-148a组中的表达水平较低（p<0.05）;而miR-148a组较空白组和阴性对照组的表达高（p<0.05）。N-cadherin mRNA的表达趋势却相反,与假手术组相比,N-cadherinmRNA在内异症模型空白组、阴性对照组及miR-148a组中的表达水平高（p<0.05）;而miR-148a组低于空白组和阴性对照组（p<0.05）。qPCR的结果与Western Blot的结果趋势一致。结论:miR-148a可以促进子宫内膜异位症内膜细胞E-cadherin的表达、抑制N-cadherin的表达,促进间质上皮转化,抑制进而逆转异位症发展从而达到治疗作用。
张爱凤[2]（2019）在《MicroRNA-138在子宫内膜异位症中的作用和机制研究》文中研究说明研究背景:子宫内膜异位症（Endometriosis,EMs）是育龄期女性中常见的妇科疾病,以疼痛、不孕、月经异常、盆腔包块为主要临床表现,严重影响女性健康和生活质量。其特征是病变广泛,形态多样;极具浸润性,可形成广泛而严重的粘连;具有激素依赖性,易于复发。近年来发病率呈明显上升趋势,在临床治疗上具有一定难度。在子宫内膜异位症的发病和疾病进展过程中,涉及黏附、入侵、增殖、侵袭、血管生成等诸多方面调控异常,发病机制目前尚不明确。核转录因子-kappaB（nuclear factor-KB,NF-κB）是一种重要的核转录因子,存在于多种细胞类型中,广泛参与多项生理和病理过程的基因调控,包括炎症、免疫、细胞增殖、凋亡和胚胎发生等。在子宫内膜异位症中,有研究人员发现NF-κB介导的信号通路可以诱导子宫内膜异位症的发生。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）是血小板衍生的生长因子,在内异位症病灶的形成过程中发挥重要作用,参与子宫内膜细胞异位定植过程中的血管形成,为子宫内膜细胞提供营养支持。MicroRNAs（miRNAs）是一类小的内源性RNA分子,长度为22-23个核苷酸且具有重要的调节功能,近年来已在真核生物中鉴定出多种发挥重要功能miRNAs,它们广泛参与细胞的增殖分化、细胞凋亡、器官发育、代谢等生理过程,同时与肿瘤细胞的生物学行为及特性密切相关。研究表明,miRNAs在子宫内膜异位症中扮演着重要的角色,研究子宫内膜异位症发生发展过程中具有重要功能的miRNA可以为子宫内膜异位症的诊断、治疗和预后提供有效的帮助。miR-138是近年来新发现miRNA家族成员,在多种不同类型的肿瘤组织中呈现低表达,具有肿瘤调控作用,但目前其在子宫内膜异位症中的研究甚少。在本研究中,我们将从子宫内膜异位症的动物模型出发,利用miRNA基因芯片筛查子宫内膜异位症中异常表达的miRNA,并通过qRT-PCR的方法证实miR-138在子宫内膜异位症中表达情况。在生物学功能方面,我们利用细胞模型研究miR-138在子宫内膜异位症中对细胞增殖、凋亡以及炎症反应的影响。在具体作用机制方面,我们通过分子生物学实验探讨miR-138在子宫内膜异位症中可能的潜在机制。具体研究如下:第一部分 MicroRNA-138在子宫内膜异位症中的表达变化研究目的:研究miR-138在子宫内膜异位症中的表达情况,检测子宫内膜异位症动物模型中炎症相关细胞的变化。研究对象:16只重症联合免疫缺陷SCID小鼠（20±2g;雌性;8-9周龄）在标准条件下（22-24℃）以12小时的光/暗循环常规饲养。通过随机化数字表的方式进行随机分组,分为实验组（Ems组）和对照组,每组8只重症联合免疫缺陷小鼠。研究方法:通过构建子宫内膜异位症动物模型,利用miRNA基因芯片的方法高通量地检测子宫内膜异位症中差异表达的miRNA,并利用实时定量 PCR（quantitative real-time PCR,qRT-PCR）方法验证 miR-138 在子宫内膜异位症中的表达情况。利用流式细胞仪检测子宫内膜异位症动物模型腹腔液中CD11b阳性细胞的数量。研究结果:1.采用miRNA基因芯片方法高通量检测了子宫内膜异位症模型小鼠中miRNAs的表达情况,发现miR-138在子宫内膜异位症组织中的表达显着低于对照组织中的表达（P<0.05）。2.选取 miR-138、miR-231、miR-177、miR-189、miR-241 以及 miR-412六种miRNAs进行qRT-PCR检测验证,与芯片检测结果一致,miR-13 8在子宫内膜异位症组织中的表达明显低于对照组织中的表达,差异具有统计学差异（P<0.05）。而 miR-231、miR-1 77、miR-1 89、miR-241 以及 miR-412在子宫内膜异位症组织以及对照组织中的表达无明显差异（P>0.05）。3.与对照组相比,子宫内膜异位症小鼠腹腔液中CD11b阳性细胞数量显着升高（P<0.05）,这说明腹腔液中巨噬细胞增多。研究结论:MiR-138在子宫内膜异位症组织中低水平表达,在子宫内膜异位症的发生发展中可能具有调节作用,并且miR-138在子宫内膜异位症中的生物学作用可能与免疫炎症反应相关。第二部分 MicroRNA-138对子宫内膜细胞生物学行为及炎症反应的影响研究目的:探索miR-138在子宫内膜异位症中的细胞生物学功能以及与炎症相关因子表达的关系。研究对象:子宫内膜干细胞（Endometrial stem cells,ESCs）、人白血病单核细胞系THP-1。研究方法:采用子宫内膜干细胞ESCs和THP-1细胞共培养的方法构建子宫内膜异位症的体外细胞模型,模拟子宫内膜异位症的细胞生存环境及状态。登录 miRBase（http://www.mirbase.org/）miRNA 数据库,查询得到miR-138成熟体的序列全长,设计合成miR-138 mimics过表达模拟物和anti-miR-138抑制剂,通过细胞转染的方法构建miR-138过表达细胞模型和miR-138干扰细胞模型。利用MTT实验、LDH实验、细胞凋亡实验探索miR-138过表达或干扰对子宫内膜异位症细胞增殖、细胞毒性以及凋亡能力的影响;利用酶联免疫吸附测定实验（Enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA）探索miR-138过表达或干扰对子宫内膜异位症细胞炎症相关因子表达的影响。研究结果:1.转染miR-138 mimics后,miR-138在细胞中的相对表达量显着上调（P<0.05）,可以成功构建miR-1 38过表达的子宫内膜细胞模型;转染anti-miR-138后,miR-138在细胞中的相对表达量显着下调（P<0.05）,可成功构建miR-138低表达的子宫内膜细胞模型。2.miR-138的上调抑制了子宫内膜细胞的增殖并提高了 LDH活性,且均具有统计学差异（P<0.05）,miR-138的上调可明显促进子宫内膜细胞的凋亡,与凋亡相匹配,miR-138的上调可明显提高caspase-3和caspase-9的表达水平,且均具有统计学差异（P<0.05）。3.miR-138的下调促进了子宫内膜细胞的增殖并抑制了 LDH活性,且均具有统计学差异（P<0.05）,miR-138的下调可明显抑制子宫内膜细胞的凋亡,与此同时,miR-138的下调可明显降低caspase-3和caspase-9的表达水平,且均具有统计学差异（P<0.05）。4.miR-138上调可显着抑制子宫内膜异位症细胞模型中炎症相关因子TNF-α、IL-1β、IL-6 以及 IL-18 的表达（P<0.05）;反之,miR-138 的下调则能够促进子宫内膜异位症细胞模型中炎症反应因子TNF-α、IL-1β、IL-6以及IL-18的表达（P<0.05）。研究结论:MiR-138可以显着抑制子宫内膜细胞的增殖,促进子宫内膜细胞的凋亡;并可调控子宫内膜异位症细胞模型中炎症相关因子的表达。由此推断,miR-138在子宫内膜异位症中对细胞增殖、凋亡及免疫炎症反应等具有重要调节作用。第三部分 MicroRNA-138对子宫内膜细胞生物学行为及炎症反应影响的分子调控机制研究目的:探索miR-138在子宫内膜异位症中的下游靶基因,研究miR-138在子宫内膜异位症细胞模型中发挥细胞功能可能的分子作用机制。研究对象:由子宫内膜干细胞（Endometrial stem cells,ESCs）和人白血病单核细胞系THP-1共同培养构建的子宫内膜异位症体外细胞模型。研究方法:利用生物信息学预测miR-138下游可能的靶基因。细胞免疫荧光实验验证miR-138对靶基因蛋白表达的调控作用。通过细胞转染的方法构建miR-138过表达细胞模型和miR-138干扰细胞模型。利用免疫印迹的方法（Western Blot）检测miR-138对Bax,NF-κB和VEGF蛋白表达的影响。利用NF-κB抑制剂及表达载体对NF-κB蛋白功能进行恢复,观察NF-κB对miR-138的回复作用。利用VEGF抑制剂及表达载体对VEGF蛋白功能进行恢复,观察VEGF对miR-138的回复作用。研究结果:1.生物信息学预测的方法发现miR-138可以靶向作用于p65基因mRNA的3’-非翻译区。细胞免疫荧光实验显示miR-138表达的上调可以明显抑制THP-1细胞中NF-κB P65蛋白亚型的表达。2.上调miR-138可以抑制NF-κB信号通路中Bax,NF-κB和VEGF蛋白表达水平,差异具有统计学意义（P<0.05）;下调miR-138的表达可以促进NF-κB信号通路中Bax,NF-κB和VEGF蛋白表达水平,差异具有统计学意义（P<0.05）。3.单独上调miR-138可显着抑制TNF-α、IL-1β、IL-6以及IL-18的表达,抑制子宫内膜细胞的增殖,促进细胞凋亡,且均具有统计学差异（P<0.05）。在上调miR-13 8表达的同时过表达NF-κB蛋白或VEGF蛋白,与单独上调miR-138相比,Bax、NF-κB和VEGF蛋白的表达抑制作用部分得到解除,TNF-α、IL-1β、IL-6以及IL-18的表达显着上调,细胞的增殖和凋亡也得到一定程度的恢复,且均具有统计学差异（P<0.05）。4.单独下调miR-138可以显着促进TNF-α、IL-1β、IL-6以及IL-18的表达,促进子宫内膜细胞的增殖,抑制细胞凋亡,且均具有统计学差异（P<0.05）;下调miR-138表达的同时加入NF-κB抑制剂或VEGF抑制剂处理细胞,与单独下调miR-138相比,TNF-α IL-1β、IL-6以及IL-18的表达显着降低,细胞的增殖和凋亡得到一定程度的恢复,且均具有统计学差异（P<0.05）。研究结论:miR-138可以靶向作用于p65基因mRNA的3’-非翻译区,从而负向调控NF-κB P65蛋白亚型的表达。在子宫内膜异位症中miR-138可以通过NF-κB/VEGF信号通路对细胞的增殖、凋亡以及炎症反应产生作用。因此,miR-138在子宫内膜异位症中的发生发展具有重要调控作用。
孙林英[3]（2019）在《长链非编码RNA-NA正向调控NR4A1影响子宫内膜癌生物学行为及其机制研究》文中指出子宫内膜癌（endometrioid endometrial carcinoma,EEC）是女性生殖系统常见的三大恶性肿瘤之一,是发生于子宫内膜的一种上皮来源的恶性肿瘤,近年来其发病率呈逐年上升。根据临床病理分型,子宫内膜癌分为Ⅰ型（激素依赖型）和Ⅱ型（激素非依赖型）,Ⅰ型主要是子宫内膜腺癌,占所有病例的80%-90%;Ⅱ型包括浆液性及透明细胞癌,因此本研究的主要研究对象为Ⅰ型子宫内膜癌。目前子宫内膜癌的治疗方式包括手术、放疗、化疗及综合治疗等多种方式。全面彻底了解该疾病的发病机制,有助于疾病的诊断及治疗,因此明确其发病机制就显得十分必要。长链非编码RNA（long noncoding RNA）是一类长度超过200个核苷酸、缺少特异完整的开放阅读框、无蛋白质编码功能,但具有调控基因表达作用的非编码RNA。长链非编码RNA于2002年在小鼠体内首次经测序发现,随着研究的深入发现其在细胞增殖、分化和物质代谢等方面具有调控作用,且参与人类许多癌症疾病的病理过程。异常表达lncRNA影响肿瘤的进展,且其作为诊断或预后标志物,在胃癌、结直肠癌、乳腺癌、肺癌等疾病进展中均具有重要作用。然而,在子宫内膜癌中,长链非编码RNA的生物学功能和分子机制尚未得到广泛研究,因此研究lncRNA在子宫内膜癌中的作用显得十分重要。核受体 NR4A1（Nuclear receptor subfamily 4,group A,member 1）是核受体NR4A家族的一员,参与细胞的增殖、凋亡调控,在肿瘤发生、血管重塑以及类固醇合成等重要生命活动过程中发挥重要作用。研究显示NR4A1作为肿瘤抑癌基因,在肿瘤的进展中发挥重要作用。在造血系统中,NR4A1和Norl双敲除的小鼠可以发展为急性髓性白血病（AML）;在某些类型的淋巴瘤细胞中NR4A1过度表达,且诱导细胞凋亡并抑制这些细胞来源的肿瘤在小鼠中的生长。有研究表明NR4A1也可减缓LNCaP前列腺癌细胞的生长。同时研究表明NR4A1在肿瘤迁移中具有一定的作用,在表达ER的ZR-75-1乳腺癌细胞和具有祖细胞特征的PMC42乳腺癌细胞中,异位NR4A1表达可以抑制细胞迁移。那么,在子宫内膜癌中,NR4A1是否和肿瘤的进展具有一定的相关性,目前尚未有文献报道。近年来随着对lncRNA的研究发现,lncRNA是转录和翻译过程中的重要调控因子,在细胞功能方面具有重要作用,比如染色质重塑、转录及转录后发育调控等。在发挥功能时,lncRNA通过不同的作用途径、方式实现基因表达的调控,包括顺式调节与反式调节方式。另外,lncRNA可以借助蛋白质与microRNA网络这两种不同途径来发挥具体的作用。概括起来,lncRNA主要从表观遗传学调控、转录调控及转录后调控来实现其对基因的表达调控作用。本研究的Lnc-NA和核受体NR4Al在同一染色体相邻的位置,Lnc-NA在众多生殖相关器官中高表达,NR4A1是一个在肿瘤发生发展过程中发挥重要作用的基因,由于前期研究显示,lncRNA可通过结合邻近基因并调节邻近基因的表达发挥作用,因此我们设想Lnc-NA和NR4A1是否可能在子宫内膜癌的发生发展中起一定的作用。预实验结果显示子宫内膜癌中Lnc-NA和NR4A1的表达均降低且有相关性,提示Lnc-NA在子宫内膜癌发生发展中可能起到一定的作用,NR4A1也可能参与其中。研究目的明确Lnc-NA在子宫内膜癌中的作用,探讨Lnc-NA作用的具体分子机制,为临床子宫内膜癌的治疗提供新的思路和靶点。研究方法1.收集山东大学附属省立医院经手术切除的子宫内膜癌组织标本30例,经病理医师再次确诊后,使用荧光定量PCR技术检测子宫内膜癌组织及癌旁组织中Lnc-NA和NR4A1的表达,分析Lnc-NA、NR4A1在癌与癌旁中的表达差异情况及Lnc-NA与NR4A1的相关性。2.通过网络软件分析Lnc-NA的可靠性,确认其是lncRNA的准确性。3.通过软件预测Lnc-NA和NR4A1的位置关系及可能的结合位点,并通过荧光素酶报告基因实验证实结合位点的存在。4.应用荧光定量PCR分析子宫内膜癌细胞系Ishikawa、KLE、RL95-2、HEC-1-b和正常子宫内膜细胞系ESC的Lnc-NA的表达量,筛选出本底低表达和高表达Lnc-NA的子宫内膜癌细胞系,构建Lnc-NA过表达质粒和shRNA质粒,通过质粒转染方法分别上、下调本底低、高表达细胞系中Lnc-NA的表达,并筛选出相应的稳定转染过、降表达Lnc-NA的细胞系,随后用荧光定量PCR鉴定转染效果。5.运用CCK8增殖、凋亡、Transwell侵袭及迁移实验检测Lnc-NA对子宫内膜癌细胞的增殖、凋亡、侵袭及迁移能力的影响。6.利用western-blot实验检测上下调细胞中NR4A1、凋亡相关蛋白（Bcl2、Bax）及迁移相关蛋白MMP2/9的表达情况。7.在稳定转染过表达Lnc-NA的子宫内膜癌细胞系Ishikawa中同时转染sh-NR4A1质粒,下调NR4A1的表达,并应用CCK8增殖、凋亡、侵袭及迁移实验验证NR4Al在Lnc-NA介导的细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移中的作用,并通过western-blot实验检测凋亡相关蛋白（Bc12、Bax）及迁移相关蛋白MMP2/9的表达情况。8.应用western blot实验检测子宫内膜癌细胞系Ishikawa、KLE、RL95-2、HEC-1-b细胞系中蛋白NR4A1的表达情况,构建NR4A1过表达质粒,通过质粒转染,上调本底低表达NR4A1的细胞系中NR4A1的表达;并通过CCK8增殖、凋亡、侵袭及迁移实验检测NR4A1对子宫内膜癌细胞的增殖、凋亡、侵袭及迁移能力的影响,同时利用western-blot实验检测凋亡相关蛋白（Bcl2、Bax）及迁移相关蛋白MMP2/9的表达情况。9.运用Western-blot实验检测上、下调Lnc-NA后caspase凋亡信号通路相关蛋白 Caspase9、Caspase-3（8G10）、Caspase-7（ASP198）、Caspase-7（D2Q3L）、PARP 及（ASP124）PARP 的表达情况。研究结果1.和正常癌旁组织相比较,人体子宫内膜癌组织中Lnc-NA低表达;和正常癌旁组织相比较,人体子宫内膜癌组织中NR4A1低表达;Lnc-NA和NR4A1的表达呈正相关（r=0.454,P=0.0191）。2.Lnc-NA的确是非编码RNA,且Lnc-NA直接结合NR4A1的启动子上游序列。3.在子宫内膜癌细胞系Ishikawa、KLE、RL95-2、HEC-1-b 中,KLE、HEC-1-b细胞系中Lnc-NA高表达,而RL95-2、Ishikawa细胞系中Lnc-NA低表达。4.子宫内膜癌细胞系Ishikawa过表达Lnc-NA后,细胞的增殖、侵袭及迁移能力均降低,而细胞的凋亡能力明显增强（P<0.05）;同时抗凋亡相关蛋白Bax及迁移相关蛋白MMP2/9的表达明显降低,而凋亡相关蛋白Bc12的表达明显增加。子宫内膜癌细胞系HEC-1-b下调Lnc-NA后,细胞的增殖、侵袭及迁移能力均升高,而细胞的凋亡能力明显降低（P<0.05）;同时抗凋亡相关蛋白Bax及迁移相关蛋白MMP2/9的表达明显升高,而凋亡相关蛋白Bc12的表达明显降低（P<0.05）。5.Western blot实验结果表明Lnc-NA过表达促进了子宫内膜癌细胞系Ishikawa中NR4A1的表达,而Lnc-NA下调则抑制了子宫内膜癌细胞系HEC-I-b中NR4A1 的表达（P<0.05）。6.同对照组相比,在同时过表达Lnc-NA和下调NR4A1的子宫内膜癌细胞系中,CCK8增殖实验结果显示细胞的增殖能力在NR4A1下调之后明显增强,而凋亡实验结果展示细胞的凋亡率明显降低,同时Transwell侵袭及迁移实验证实侵袭及迁移的细胞数量明显增多（P<0.05）。而western blot实验结果表明同时过表达Lnc-NA和下调NR4A1之后,凋亡蛋白Bc12及迁移相关蛋白MMP2/9的表达明显增加,而抗凋亡蛋白Bax的表达明显减少（P<0.05）。7.子宫内膜癌细胞系Ishikawa过表达NR4A1后,细胞的增殖、侵袭及迁移能力均降低,而细胞的凋亡能力明显增强（P<0.05）;同时抗凋亡蛋白Bax及迁移相关蛋白MMP2/9的表达明显降低,而凋亡相关蛋白Bc12的表达明显增加。而在上调NR4A1的细胞系中同时下调Lnc-NA的表达,细胞的增殖、凋亡、侵袭及迁移能力并未发生变化,同时凋亡相关蛋白Bcl2、Bax及迁移相关蛋白MMP2/9的表达并未发生变化。8.Western blot实验结果表明上调Lnc-NA的细胞系中,Caspase信号通路蛋白Caspase9、Caspase-3（8G10）、Caspase-7（ASP198）、Caspase-7（D2Q3L）的表达明显增多（P<0.05）,而蛋白PARP的表达明显降低,但是（ASP124）PARP的表达并未发生明显变化。而下调Lnc-NA之后,Caspase信号通路蛋白 Caspase9、Caspase-3（8G10）、Caspase-7（ASP198）、Caspase-7（D2Q3L）的表达明显降低（P<0.05）,而蛋白PARP、（ASP124）PARP的表达明显增多（P<0.05）。而在同时上调Lnc-NA及下调NR4A1的细胞系中,同单独上调Lnc-NA对比,Caspase信号通路蛋白Caspase9、Caspase-3（8G10）、Caspase-7（ASP198）、Caspase-7（D2Q3L）的表达明显降低（P<0.05）,而蛋白PARP的表达明显增加,但是（ASP124）PARP的表达并未发生明显变化。研究结论1.和正常组织相比,子宫内膜癌组织中Lnc-NA表达降低,且Lnc-NA的表达和NR4A1的表达呈正相关。2.Lnc-NA在子宫内膜细胞系中抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭及迁移,促进肿瘤细胞的凋亡。3.Lnc-NA通过特异调控NR4A1的表达进而影响Caspase凋亡信号通路促进肿瘤的凋亡。
桑琳[4]（2013）在《p53、p21、MDM2蛋白在卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌症中的表达及临床意义》文中指出研究背景目的p53、p21、MDM2是调节细胞周期的癌基因，本实验通过检测p53、p21、MDM2蛋白在正常子宫内膜、卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌症组织中的表达，以探讨p53、p21、MDM2基因和细胞凋亡在子宫内膜异位症发生发展中的作用，为临床诊治提供理论依据。方法分析经病理证实的29例正常子宫内膜、30例卵巢子宫内膜异位症和29例子宫腺肌症组织标本，应用免疫组化染色法（S-P法）检测p53、p21、MDM2表达情况，对p53、p21、MDM2的表达及细胞凋亡之间的关系进行分析。结果1.p53蛋白的表达： p53蛋白阳性着色定位于细胞核,呈黄色或棕黄色颗粒。在29例正常子宫内膜组中，18例增生期有3例表达，表达率16.67%，11例分泌期有8例表达，表达率72.73%，两者表达率相比差异有显着性（χ2=9.114，P=0.003），分泌期高于增生期。在30例卵巢子宫内膜异位症组织中，19例增生期有2例表达，表达率10.53%，11例分泌期有2例表达，表达率18.18%，两者表达率相比差异无统计学意义（χ2=0.353，P=0.552）。在29例子宫腺肌症组织中，15例增生期有2例表达，表达率13.33%，14例分泌期有2例表达，表达率14.29%，两者表达率相比差异无统计学意义（χ2=0.006， P=0.941）。p53蛋白在正常子宫内膜组织、卵巢子宫内膜异位症组织、子宫腺肌症组织中的表达率分别为37.93%、13.33%、13.79%，正常子宫内膜组p53蛋白表达率分别高于卵巢子宫内膜异位症组（χ2=4.706，P=0.03）和子宫腺肌症组（χ2=4.406，P=0.036），差异有统计学意义。卵巢子宫内膜异位症组p53蛋白表达率与子宫腺肌症组相比差异无统计学意义（χ2=0.003， P=0.959）。2.p21蛋白的表达：p21蛋白阳性着色定位于细胞核,呈黄色或棕黄色颗粒。P21蛋白在正常子宫内膜组、卵巢子宫内膜异位症组、子宫腺肌症组中的表达率分别为31.03%、10%、6.89%，正常子宫内膜组的表达率分别高于卵巢子宫内膜异位症组（χ2=4.027P=0.045）和子宫腺肌症组（χ2=5.479，P=0.019），差异有统计学意义。卵巢子宫内膜异位症组p21蛋白表达率与子宫腺肌症组相比差异无统计学意义（χ2=0.183，P=0.669）。3. MDM2蛋白的表达：MDM2蛋白阳性着色定位于细胞核和（或）胞质中,呈黄色或棕黄色颗粒。MDM2蛋白在正常子宫内膜组、卵巢子宫内膜异位症组、子宫腺肌症组中的表达率分别为0.03%、53.33%、48.24%，正常子宫内膜组织的表达率分别低于卵巢子宫内膜异位症组（χ2=17.89，P=0.000）和子宫腺肌症组（χ2=15.19，P=0.000）。卵巢子宫内膜异位症组与子宫腺肌症组相比差异无统计学意义（χ2=0.151，P=0.698）。4.卵巢子宫内膜异位症组中p53、p21、MDM2相关性的分析：在30例卵巢子宫内膜异位症组中p53和p21表达降低，MDM2表达升高，p53与p21呈正相关（r=0.611，P<0．01），p53与MDM2呈负相关（r=-0.541，P<0．01），p21与MDM2在卵巢子宫内膜异位症组中表达无相关性（r=0.404，P＞0．05）。结论1. p53、p21、MDM2是三种重要的细胞凋亡调节基因，与对照组正常子宫内膜组比较，p53和p21在卵巢子宫内膜异位症组和子宫腺肌症组中表达明显降低，MDM2表达明显升高。说明p53、p21、MDM2的异常表达在子宫内膜异位症和子宫腺肌症异位的子宫内膜细胞增殖中起重要作用，这一研究结果为我们在细胞凋亡方面研究子宫内膜异位提供了新的理论依据，为我们今后研究从细胞凋亡方面治疗子宫内膜异位提供了又一个新的靶点。2.p53在正常子宫内膜组织中分泌期表达高于增生期，而在卵巢子宫内膜异位症组与子宫腺肌症组中分泌期与增生期表达差异无统计学意义，说明正常子宫内膜细胞存在周期性、自发性的细胞凋亡，细胞凋亡在卵巢子宫内膜异位症的异位内膜组织和子宫腺肌症组织中失去了正常的周期变化。在卵巢子宫内膜异位症组织中，p53与p21表达呈正相关，p53与MDM2表达呈负相关，p21与MDM2表达无相关性，说明p53与p21相互促进，在子宫内膜异位症的发生发展中起协同作用；P53与MDM2相互抑制，两者在子宫内膜异位症的发生发展中相互制约，相互影响。p21与MDM2这两个基因尽管都与子宫内膜异位症发生发展有关，但二者可能通过不同的信号途径发挥作用。3.p53、p21、MDM2在子宫内膜异位症与子宫腺肌症患者的异位子宫内膜组织中的表达相似，差异无统计学意义，提示两种疾病的发病机制可能存在相同之处。
金延泽[5]（2012）在《金雀异黄素对大鼠异位子宫内膜的作用及相关机制》文中研究表明目的：为探讨Gen在异位子宫内膜的作用及其机制,将不同剂量Gen处理于大鼠自体子宫内膜异位模型后,通过检测异位内膜细胞的凋亡；比较对异位内膜的雌激素受体α、β亚型分布变化；观察VEGF、CD34、MMP-9、TIMP-1、COX-2及Foxp3等指标的表达变化来研究不同剂量Gen对异位内膜细胞凋亡的诱导、对异位内膜侵袭、血管增生能力的影响和免疫耐受状态的影响。本研究不仅探讨了不同剂量Gen对异位内膜的作用并分析可能的相关机制,并且为开发Gen治疗子宫内膜异位症的药用价值提供有用的数据和理论依据。方法：①大鼠子宫内膜异位模型的建立。选择6-8周龄的SD雌性大鼠,皮下注射乙烯雌酚以达到相同发情周期,通过手术将自体子宫内膜移植于腹壁筋膜层,注射17β-雌二醇3周后,观察并选择成功造膜大鼠。②给药方法和剂量的选择：对照组：花生油7.5ml/（kg.d）灌胃；治疗组：将Gen室温下用花生油配成混悬液,按7.5ml/（kg.d）灌胃,其中低剂量组Gen50mg/kg/d,中剂量组Gen150mg/kg/d,高剂量组Gen450mg/kg/d。③取材：每组用药共6周时间,末次给药24小时后,10%的水合氯醛麻醉,通过外科手术取出移植物,部分标本称湿重后冻存于液氮（待用RT-PCR）,其余用10%中性福尔马林固定。④TUNEL法检测细胞凋亡,RT-PCR分析组织标本Bcl-2, Bax的mRNA表达。⑤ELISA法测定血清E2含量,免疫组织化法测定组织标本ERα、ERβ蛋白表达,RT-PCR法分析组织标本ER α、 ER β mRNA的表达。⑥SABC法检测组织标本VEGF、CD34、MMP-9、 TIMP-1、COX-2及Foxp3的表达。结果：①移植物体积的变化：Gen给予后各组比较,移植物体积,随着剂量的增大趋于变小的趋势,高剂量组（D组）最明显,其抑制率有显着性差异（P<0.01）,其它组间差异无统计学意义。②异位内膜组织凋亡细胞阳性表达情况：Gen高剂量组凋亡细胞指数明显高于其他组,差异有显着性意义（P<0.01）,中剂量组凋亡指数高于低剂量组和对照组,但差异无显着性统计学意义。高剂量组较其他组相比Bcl-2mRNA表达下降、Bax mRNA表达上升,差异显着（P<0.01）。③随Gen剂量的增加,血清E2虽然有下降趋势,但统计结果无显着性差异（P>0.05）；高剂量Gen降低ERβ蛋白和ERβmRNA的表达,与各组间有显着性差异（P<0.01）,但对ERα蛋白和ER a mRNA的表达影响不明显。④高剂量的Gen作用于大鼠异位内膜后明显降低VEGF、CD34及COX-2的表达（P<0.01）；降低MMP-9表达同时提升TIMP-1的表达（P<0.01）,进而MMP-9/TIMP-1下降；Foxp3的表达明显下调（P<0.01）。结论：Gen抑制大鼠自体移植的子宫内膜的生长与发育,且有剂量依赖效应。其具体机制为：①诱导异位内膜细胞的凋亡,可能与抑制Bcl-2、增强Bax的表达和活性有关；②影响异位内膜雌激素受体β亚型的表达,体现出ERβ拮抗剂的效应,暨抗雌激素效应；③通过下调VEGF、CD34、COX-2及MMP-9/TIMP-1的表达,抑制异位子宫内膜的侵袭和血管增生的生物活性；④通过抑制Foxp3的表达,降低异位内膜的免疫耐受状态,增强对异位内膜的免疫监视和免疫消除的能力。
赵宇航[6]（2010）在《Bcl-2、Bax和p21WAF1在子宫腺肌病患者子宫内膜中的表达及其相关性研究》文中进行了进一步梳理目的:探讨Bcl-2和Bax与p21WAF1因子在子宫腺肌病患者子宫内膜中的表达及其相关性,从而进一步研究子宫腺肌病发生、发展的原因。方法:应用免疫组化SP法检测60例子宫腺肌病患者（实验组）的腺肌病病灶（包括异位内膜和在位内膜）中Bcl-2、Bax和p21WAF1的表达,其中增殖期30例,分泌期30例。并选择因子宫肌瘤行子宫次全切患者（对照组）的子宫内膜,病理证实为正常子宫内膜30例,其中增殖期15例,分泌期15例进行对照。结果:1.Bcl-2、Bax主要在实验组和对照组的腺上皮细胞的胞浆中有阳性表达,阳性细胞呈弥漫性分布。p21WAF1在实验组和对照组的腺上皮细胞的胞核中有阳性表达。2.Bcl-2在对照组的子宫内膜中有周期性表达,增生期高于分泌期,两者相比有显着性差异（P<0.05）;在实验组的在位内膜组中有周期性表达,增生期高于分泌期,两者相比有显着性差异（P<0.05）;在实验组的异位内膜组中失去周期性表达,两者相比无统计学意义（P>0.05）;在同期对照组、实验组的在位内膜组中的表达进行比较,结果均有显着性差异（P<0.05）;在同期对照组、实验组的异位内膜组中的表达进行比较,结果均有显着性差异（P<0.05）;在同期实验组的在位内膜组和异位内膜组中的表达进行比较,结果均无统计学意义（P>0.05）。3.Bax在对照组子宫内膜的增生期和分泌期均有表达,分泌期强于增生期,两者相比有显着性差异（P<0.05）;在实验组的在位内膜组中,增生期和分泌期均有表达,分泌期强于增生期,两者相比有显着性差异（P<0.05）;在实验组的异位内膜组中失去周期性表达,两者相比无统计学意义（P>0.05）;在对照组和实验组的在位内膜组表达相比较,增生期（P>0.05）无统计学意义,分泌期（P<0.05）结果有显着性差异;在对照组和实验组的异位内膜组中的表达相比较,增生期（P>0.05）无统计学意义,分泌期（P<0.05）结果有显着性差异;在同期实验组的在位内膜和异位内膜中的表达相比较,无统计学意义。4.p21WAF1在对照组和实验组的在位内膜中的表达相比有显着性差异（P<0.05）;在对照组和实验组的异位内膜组中的表达相比有显着性差异（P<0.05）;在实验组的在位内膜组和异位内膜组中的表达无统计学意义。5.在实验组的在位内膜组中,Bcl-2和p21WAF1之间呈正相关P<0.05 r=0.386, Bax和p21WAF1之间呈负相关P<0.05 r=-0.301;在实验组的异位内膜组中,Bcl-2和p21WAF1之间呈负相关P<0.05 r=-0.320, Bax和p21WAF1之间亦呈正相关P<0.05 r=0.290。结论:1.在正常的月经增殖周期中,Bcl-2强表达,Bax弱表达,抑制子宫内膜凋亡,促进增殖;分泌期Bax强表达,Bcl-2弱表达,促进子宫内膜周期性脱落。两者协同作用于正常内膜,共同调控其形态功能变化。2.Bcl-2在对照组、实验组的在位内膜和异位内膜三组中同期两两比较均有显着性差异,说明Bcl-2的过度表达与子宫腺肌病的发生、发展有关;同样,Bax和p21WAF1的低度表达对子宫腺肌病的发生、发展也起一定作用。3.Bcl-2和Bax在正常子宫内膜中都有周期性表达,在子宫腺肌病的在位内膜组中仍可看出周期性表达,但明显高于在正常子宫内膜中的表达,而在异位内膜组中周期性表达消失。4.Bcl-2、Bax和p21WAF1在子宫腺肌病的的发生、发展中起相互促进作用。
谭风和[7]（2010）在《HO-1在子宫内膜异位症中的表达及其与Bcl-2、FasL表达的相关性研究》文中指出目的通过检测血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1, HO-1）和细胞凋亡调控蛋白Bcl-2、FasL在正常子宫内膜组织、子宫内膜异位症（endometriosis, EMT）在位子宫内膜组织及EMT异位子宫内膜组织中的表达,探讨HO-1和Bcl-2、FasL在EMT发病机制及疾病进程中的可能作用。方法选择41例EMT患者标本（其中增生期21例,分泌期20例）作为研究组,34例上述EMT患者在位内膜标本（其中增生期18例,分泌期16例）及行诊断性刮宫或手术切除子宫并经病理诊断为正常子宫内膜标本32例（其中增生期16例,分泌期16例）作为对照组,应用免疫组织化学链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法（SABC法）检测HO-1、Bcl-2、FasL在EMT患者异位内膜、在位内膜及正常子宫内膜组织中的表达,采用四格表X2检验、Fisher精确概率法及Spearman等级相关分析方法进行统计学分析。结果1、HO-1在三种组织中的的表达情况：HO-1的阳性部位主要定位于子宫内膜腺上皮细胞胞浆中,少量定位于胞膜和胞核。HO-1在正常子宫内膜增生期不表达,分泌期表达的阳性率增加,且与月经周期明显相关（P<0.01）；在位内膜增生期呈弱表达或不表达,与对照组同期比较无统计学意义（P>0.05）,分泌期表达高于同期正常子宫内膜（P<0.05）；异位内膜组织中,HO-1的表达呈持续性高表达,无周期性变化,与对照组相比差异有显着性意义（P<0.05）,但与月经周期无明显的相关性（P>0.05）。2、Bcl-2在三种组织中的的表达情况：Bcl-2的阳性部位主要定位于细胞膜和／或细胞浆中。Bcl-2在正常子宫内膜的表达增生期明显高于分泌期（P<0.05）；在位内膜的表达增生期表达亦明显高于分泌期（P<0.05）,但都高于同期正常子宫内膜（P<0.05）；异位内膜组织中Bcl-2的表达增生期与分泌期无明显差异,呈持续高表达,但都高于正常子宫内膜组（P<0.01）。3、FasL在三种组织中的的表达情况：FasL的阳性部位主要定位于子宫内膜腺上皮细胞及基质细胞的胞浆中。FasL在正常子宫内膜的表达增生期明显低于分泌期（P<0.05）；在位内膜的表达无周期性,增生期与正常子宫内膜无明显差异（P>0.05）,但分泌期低于正常子宫内膜的表达（P<0.05）；在异位内膜的表达较高而无明显的周期性（P<0.05）,但均高于同期在位子宫内膜的表达（P<0.05）。4、HO-1与Bcl-2在EMT中表达的相关性：HO-1与Bcl-2在EMT中的表达呈正相关（Rs=0.427,P=0.005）。5、HO-1与FasL在EMT中表达的相关性：HO-1与FasL在EMT中的表达呈正相关（Rs=0.385,P=0.013）。6、Bcl-2与FasL在EMT中表达的相关性：Bcl-2与FasL在EMT中的表达呈正相关（Rs=0.466,P=0.002）。结论及意义1、HO-1在EMT中的表达增强,使异位内膜细胞凋亡率下降,促进了异位内膜组织在宫腔外的种植与生长。2、Bcl-2在EMT中呈强表达,致使异位子宫内膜细胞的抗凋亡能力增强,从而抑制细胞凋亡,延长细胞周期,促使EMT的发生、发展。3、FasL在EMT中的高水平表达,使异位内膜细胞逃避免疫监视而继续存活、生长,进而促使EMT的发生。4、HO-1、Bc1-2、FasL三种蛋白在EMT的发生、发展中关系密切,它们的共同作用促进了EMT的发病及疾病进程,可能是EMT发生、发展的分子生物学机制之
邱琳,张晓玲[8]（2009）在《细胞凋亡与子宫内膜异位症》文中研究表明
王君[9]（2008）在《子宫内膜异位症患者内膜细胞ER、PR表达与细胞凋亡关系的研究》文中研究指明[目的]从雌孕激素受体、细胞凋亡及其相关基因表达方面探讨子宫内膜异位症的发病机制及影响其生长发展的重要因子。[方法]用免疫组织化学方法及图像分析技术检测雌激素受体（oestrogen receptors ,ER）、孕激素受体（progesterone receptors, PR）、B细胞淋巴瘤∕白血病基因-2 （ B-Cell lymphoma/Leukemia-2 , Bcl-2 ）、Bax （ Bcl-associated x protein）在子宫内膜异位症（简称内异症）患者异位及在位内膜细胞中的表达情况。同时选取同期因其他非激素依赖性疾病手术的患者的子宫内膜中ER、PR、Bcl-2、Bax的表达情况作为对照。[结果]（1）正常子宫内膜ER表达低于内异症异位内膜（p﹤0.05）及内异症在位内膜（p﹤0.01）,内异症异位内膜ER表达低于内异症在位内膜（p﹤0.05）,各组中ER表达增殖期均高于分泌期（p﹤0.05）。（2）内异症异位内膜PR表达低于正常子宫内膜（p﹤0.05）及内异症在位内膜（p﹤0.05）。正常子宫内膜与内异症在位内膜比较差异无统计学意义（p﹥0.05）。正常内膜PR增殖期表达高于分泌期（p﹤0.05）。内异症在位内膜与内异症异位内膜PR增殖期与分泌期表达差异无统计学意义（p﹥0.05）。（3）正常内膜Bcl-2表达低于异位内膜（p﹤0.01）及在位内膜（p﹤0.01）,异位内膜Bcl-2表达低于在位内膜（p﹤0.01）,正常内膜中增殖期表达均高于分泌期（p﹤0.05）。在位内膜与异位内膜Bcl-2增殖期与分泌期表达差异无统计学意义（p﹥0.05）。（4）正常内膜Bax表达高于异位内膜（p﹤0.05）及在位内膜（p﹤0.05）,异位内膜Bax表达高于在位内膜（p﹤0.05）,正常内膜中分泌期表达均高于增殖期（p﹤0.05）。在位内膜与异位内膜Bax增殖期与分泌期表达差异无统计学意义（p﹥0.05）。（5）内异症患者在位及异位内膜ER、PR表达不同步;虽然ER与Bcl-2在内异症患者在位及异位内膜表达均增强,但两者不具有相关性。[结论]无论是增殖期还是分泌期,在位内膜ER、PR表达均高于异位内膜及正常内膜,使在位子宫内膜细胞持续低水平增殖,更易于迁徙和种植。而异位内膜上PR相对于在位内膜的减少可能导致其降低或失去对雌激素控制的反应性,而较高的ER可能导致雌激素为主的环境,在内异症的发展中起作用。在位内膜及异位内膜中Bcl-2和Bax的表达均与子宫内膜周期性改变无关,不受卵巢激素调节,内异症细胞凋亡持续性减弱,增殖性能持续性增强。
张鑫[10]（2008）在《Survivin和Bcl-2在子宫内膜异位症中的表达及意义》文中研究表明[目的]研究细胞凋亡在子宫内膜异位症异位内膜组织、子宫内膜异位症在位内膜组织和正常子宫内膜组织中的差异，分析凋亡抑制蛋白Survivin和Bcl-2在子宫内膜异位症和正常子宫内膜组织中的表达及它们在子宫内膜异位症异位内膜组织和子宫内膜异位症在位内膜组织中表达的相关性，进一步探讨细胞凋亡在子宫内膜异位症发病机制中的作用。[资料与方法]随机抽取第二军医大学附属长征医院妇产科及复旦大学附属金山医院妇产科2006年1月～2007年11月间临床资料完整、经腹腔镜手术或开腹手术切除的并经病理检查证实的子宫内膜异位症的组织标本40例，根据月经周期并结合HE染色组织切片确定内膜分期，其中增生期21例，分泌期19例。并选择其中28例患者的在位子宫内膜，其中增生期13例，分泌期15例。患者年龄28～52岁，平均年龄（39．50±6.57）岁，月经规律，无内科合并症，术前6个月未接受激素治疗。选择同期因子宫肌瘤行手术的30例患者的正常子宫内膜组织为对照，其中增生期14例，分泌期16例。对照组患者年龄32～55岁，平均年龄（43．25±5．88）岁，病例均排除内异症及内膜病变，无内科合并症，术前未接受药物治疗。全部标本均用福尔马林固定，常规石蜡包埋，4μm厚连续切片。采用TUNEL法检测8例内异症异位内膜、6例内异症在位内膜和8例正常子宫内膜组织中细胞凋亡，免疫组织化学EnVision方法检测Survivin和Bcl-2在40例内异症异位组织，28例内异症在位内膜组织、30例正常子宫内膜组织标本中的表达。所有资料应用SPSS软件14．0版分析处理，计数资料的组间比较采用x2检验，当n<40或理论频数T<5时用Fisher确切概率法，以P<0．05作为检验水准，三个样本率间的两两比较用x2分割法，以P<0．017（0．05÷3）作为检验水准，相关性分析采用Spearman等级相关分析，以P<0．05作为检验水准，两个计量资料比较采用t检验，三个计量资料比较采用方差分析，以P<0．05作为检验水准。[结果]1、细胞凋亡指数的变化：内异症异位内膜、在位内膜和正常子宫内膜组织中的细胞凋亡指数分别为（5．13±1．73）％、（22．00±3．85）％和（51．37±21．14）％，三组间的差异有统计学意义（P<0．05），两两比较各两组问的差异有统计学意义（P<0．05）；在内异症异位内膜组织中增生期和分泌期的细胞凋亡指数分别（4．00±0．82）％和（6．25±1．70）％，两组间的差异无统计学意义（P>0．05）；内异症在位内膜组织中增生期和分泌期的细胞凋亡指数分别为（19．00±1．00）％和（25．00±3．00）％，两组间的差异经统计学检验有意义（P<0．05）；正常子宫内膜组织中增生期和分泌期的细胞凋亡指数分别为（33．25±6．99）％和（69．50±10．85）％，两者差异经统计学检验有意义（P<0．01）。2、Survivin蛋白的表达：Survivin蛋白主要表达在子宫内膜腺上皮细胞胞浆中，间质细胞未见有明显表达。在内异症异位内膜、在位内膜组织和正常子宫内膜组织中Survivin蛋白的阳性表达率分别为75．00％，50．00％和3．33％，三组间的差异经统计学检验有显着意义（P<0．01），两两比较Survivin蛋白在内异症异位内膜和在位内膜组织中的阳性表达率都分别高于在正常子宫内膜组织中的阳性表达率（P<0．017），在内异症异位内膜和在位内膜组织中的表达差异无统计学意义（P>0．017）；Survivin蛋白在正常子宫内膜组织增生期的表达均为阴性，在分泌期内膜组织中有1例表达，两者差异经统计学检验无意义（P>0．05）；内异症异位内膜组织中增生期和分泌期的Survivin蛋白的阳性表达率分别为76．19％和73．68％，两者差异经统计学检验无意义（P>0．05）；内异症在位内膜组织中增生期和分泌期的阳性表达率分别为46．15％和53．33％，两者差异经统计学检验无意义（P>0．05）。3、Bcl-2蛋白的表达：Bcl-2蛋白在正常子宫内膜和内异症异位内膜、在位内膜组织中有不同程度的表达，大多分布于子宫内膜腺上皮细胞的胞浆，间质中的某些淋巴细胞，螺旋动脉也可见微弱的表达。在内异症异位内膜、在位内膜组织和正常子宫内膜组织中Bcl-2的阳性表达率分别80．00％、57．14％和23．33％，三者差异经统计学检验有显着意义（P<0．01），两两比较内异症异位内膜和在位内膜组织中Bcl-2蛋白的阳性表达率都分别高于在正常子宫内膜组织的表达（P<0．017），Bcl-2蛋白在内异症异位内膜和在位内膜组织中的阳性表达差异无统计学意义（P>0．017）；Bcl-2蛋白在内异症异位内膜组织中增生期和分泌期的阳性表达率分别为85．71％和73．68％，两者差异经统计学检验无意义（P>0．05）；在内异症在位内膜组织中增生期和分泌期的阳性表达率分别为76．92％和40．00％，两者差异经统计学检验有意义（P<0．05）；在正常子宫内膜组织中增生期和分泌期的阳性表达率分别为42．85％和6．25％，两者差异经统计学检验有意义（P<0．05）。4、Survivin蛋白和Bcl-2蛋白在内异症异位内膜和在位内膜组织中表达的相关性：内异症异位内膜和在位内膜组织中Survivin和Bcl-2的表达分别经Spearman等级相关分析处理，两者都呈正相关（P<0．01）。[结论]1、正常子宫内膜、内异症在位内膜和异位内膜组织中的细胞凋亡指数逐渐降低，提示内异症异位内膜、在位内膜组织中的细胞凋亡指数降低，可使细胞增殖增多，在其它可促成内异症发生的因素的协同的作用下，使盆腔内的异位病灶得以发生、发展。在正常子宫内膜组织中细胞凋亡有周期性的变化，分泌期高于增生期的细胞凋亡，提示正常子宫内膜组织中的细胞凋亡随着月经周期而变化；在子宫内膜异位症异位内膜组织中的细胞凋亡无明显的周期性变化。2、凋亡抑制蛋白Survivin在正常子宫内膜组织中无明显表达，在内异症在位内膜组织中有低表达，且在增生期和分泌期之间的表达无差异，在内异症异位内膜组织中呈高表达，且无明显周期性的改变。提示凋亡抑制蛋白Survivin在内异症在位内膜和异位内膜组织中表达增高，可抑制细胞凋亡，导致在位内膜和异位内膜细胞抗凋亡能力明显增强，破坏了细胞增殖和凋亡的平衡，有利于其在盆腔内种植、存活，促成了内异症的发生、发展。3、Bcl-2蛋白在正常子宫内膜、内异症在位内膜和内异症异位内膜组织中的阳性表达逐渐增高，其中在正常子宫内膜组织和内异症在位内膜组织中Bcl-2蛋白的表达有明显的周期性变化，在增生期表达增强，在分泌期表达减弱，而在内异症异位内膜组织中的表达无明显的周期性变化。提示Bcl-2蛋白可通过抑制细胞凋亡、延长细胞活力，促成内异症的发生、发展。4、子宫内膜异位症异位内膜组织、在位内膜组织中Survivn和Bcl-2的表达呈正相关，提示两者可协同抑制细胞凋亡，在子宫内膜异位症的发生、发展中可能具有协同作用。
二、凋亡调节基因bcl-2,bax和fas在子宫内膜异位症中的表达（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、凋亡调节基因bcl-2,bax和fas在子宫内膜异位症中的表达（论文提纲范文）
（1）G蛋白偶联雌激素受体/miR-148a轴介导子宫内膜异位细胞凋亡的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 第一章 引言 |
| 1.1 子宫内膜异位症概述 |
| 1.2 子宫内膜异位症发病机理 |
| 1.3 GPER在内异症进展中的作用 |
| 1.4 miR-148a在内异症诊断中的潜在作用 |
| 1.5 研究内容 |
| 参考文献 |
| 第二章 GPER的表达与子宫内膜异位症临床特征的关系 |
| 2.1 实验材料及方法 |
| 2.2 实验结果 |
| 2.2.1 免疫组化显示GPER在各组研究对象内膜中的表达情况 |
| 2.2.2 Western blot检测GPER的表达情况 |
| 2.2.3 GPER mRNA表达情况 |
| 2.2.4 GPER蛋白及mRNA的表达与子宫内膜异位症临床分期的关系 |
| 2.2.5 使用亮两瑞林治疗后GPER含量降低 |
| 2.3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 miR-148a在子宫内膜异位症患者血清中的表达及临床意义 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 实时定量PCR特异性分析 |
| 3.2.2 内异症患者血清中miR-148a的表达水平 |
| 3.2.3 血清中miR-148a的表达与子宫内膜异位症临床分期的关系 |
| 3.2.4 miR-148a诊断子宫内膜异位症的ROC曲线分析 |
| 3.3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 GPER/miR-148a介导子宫内膜异位细胞的凋亡 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 miR-148a过表达可以抑制Hs832.Tc细胞增殖 |
| 4.2.2 miR-148a过表达诱导Hs832.Tc细胞凋亡 |
| 4.2.3 抑制miR-148a表达可以促进Hs832.Tc细胞增殖 |
| 4.2.4 下调miR-148a抑制Hs832.Tc细胞凋亡 |
| 4.2.5 miR-148a表达量变化对HLA-G的影响 |
| 4.2.6 抑制GPER对Hs832.Tc细胞中miR-148a表达变化的影响 |
| 4.2.7 下调GPER表达对miR-148a介导的细胞活性和凋亡变化的影响 |
| 4.2.8 下调GPER对HLA-G蛋白表达量的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第五章 miR-148a对大鼠子宫内膜异位症治疗作用的研究 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 SD大鼠子宫内膜异位症手术建模结果 |
| 5.2.2 各实验组子宫内膜异位病灶体积的测量结果 |
| 5.2.3 HE染色检测三组异位病灶病理情况 |
| 5.2.4 免疫组化检测E-cadherin及N-cadherin的表达 |
| 5.2.5 Western blot检测E-cadherin、N-cadherin蛋白在各组中的表达 |
| 5.2.6 qPCR检测E-cadherin及N-cadherin相应mRNA在各组中的表达 |
| 5.3 讨论 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 本研究的局限性和不足 |
| 附图 |
| 综述 GPER在子宫内膜异位症发病机制及治疗中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
| English Paper 1 |
| English Paper 2 |
（2）MicroRNA-138在子宫内膜异位症中的作用和机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 第一部分 MICRORNA-138在子宫内膜异位症中的表达变化 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 MICRORNA-138对子宫内膜细胞生物学行为及炎症反应的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第三部分 MICRORNA-138对子宫内膜细胞生物学行为及炎症反应影响的分子调 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
| 英文论文Ⅰ |
| 英文论文Ⅱ |
（3）长链非编码RNA-NA正向调控NR4A1影响子宫内膜癌生物学行为及其机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语说明 |
| 第一部分 Lnc-NA和NR4A1在子宫内膜癌中的表达水平及其相关性研究 |
| 前言 |
| 材料方法 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 仪器与耗材 |
| 3. 实验方法 |
| 4. 统计学分析 |
| 实验结果 |
| 1.1 子宫内膜癌组织中Lnc-NA与NR4A1均低表达 |
| 1.2 子宫内膜癌组织中Lnc-NA与NR4A1的表达呈正相关 |
| 1.3 Lnc-NA通过预测位点特异结合NR4A1 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 Lnc-NA对子宫内膜癌细胞系生物学行为的影响 |
| 前言 |
| 材料方法 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 仪器与耗材 |
| 3. 实验方法 |
| 4. 统计分析 |
| 实验结果 |
| 1. 细胞系中Lnc-NA与NR4A1的表达情况 |
| 2. Lnc-NA过表达抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭及迁移,促进肿瘤细胞的凋亡 |
| 3. Lnc-NA降表达促进肿瘤细胞的增殖、侵袭及迁移,抑制肿瘤细胞的凋亡 |
| 4. Lnc-NA影响凋亡及迁移相关蛋白的表达 |
| 5. NR4A1过表达抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭及迁移,促进肿瘤细胞的凋亡 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第三部分 Lnc-NA正向调控NR4A1抑制子宫内膜癌的相关机制研究 |
| 前言 |
| 材料方法 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 仪器和耗材 |
| 3. 实验方法 |
| 4. 统计分析 |
| 实验结果 |
| 3.1 Lnc-NA通过正向调控NR4A1发挥其抑癌作用 |
| 3.2 Lnc-NA下调不能反转NR4A1对肿瘤细胞的抑制作用 |
| 3.3 Lnc-NA-NR4A1信号轴通过调控Caspase信号通路促进肿瘤细胞的凋亡 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表论文目录 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
| 外文论文1 |
| 外文论文2 |
（4）p53、p21、MDM2蛋白在卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌症中的表达及临床意义（论文提纲范文）
| 英文缩略表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5.展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 附录 |
| 本人简历 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（5）金雀异黄素对大鼠异位子宫内膜的作用及相关机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词 |
| 前言 |
| 第一部分 |
| 第一章 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 建立模型 |
| 1.3 实验分组及给药方法 |
| 1.4 动物取材 |
| 1.5 石蜡标本的制备 |
| 1.6 TUNEL法检测细胞凋亡 |
| 1.7 RT-PCR分析Bcl-2、Bax的mRNA |
| 第二章 结果 |
| 2.1 移植物体积的变化和镜下所见 |
| 2.2 TUNEL法检测细胞凋亡结果 |
| 2.3 Bcl-2、Bax mRNA的表达变化 |
| 第三章 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 |
| 第一章 材料和方法 |
| 1.1 实验动物及建模、取材 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 ELISA血清E2含量定 |
| 1.4 ERα、ERβ蛋白免疫组织化学染色 |
| 1.5 RT-PCR方法检测ER α、ERβ在mRNA水平的表达 |
| 1.6 统计学分析 |
| 第二章 结果 |
| 2.1 Gen给药前后血清雌二醇(E2)含量的变化 |
| 2.2 免疫组化法ERα、ERβ蛋白在移植物中的表达 |
| 2.3 RT-PCR方法ERα、ERβ在mRNA水平的表达 |
| 第三章 讨论 |
| 结论 |
| 第三部分 |
| 第一章 材料和方法 |
| 1.1 实验动物及建模、取材 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 SABC法测定VEGF、CD34、MMP-9、TIMP-1、COX-2、Foxp3 |
| 第二章 结果 |
| 2.1 VEGF在异位内膜中的表达变化 |
| 2.2 CD34标记的MVD的变化 |
| 2.3 MMP-9和TIMP-1的表达变化 |
| 2.4 COX-2和Foxp3的表达变化 |
| 第三章 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 致谢 |
| 综述 |
| 参考文献(综述) |
（6）Bcl-2、Bax和p21WAF1在子宫腺肌病患者子宫内膜中的表达及其相关性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 英文缩写 |
| 附图 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（7）HO-1在子宫内膜异位症中的表达及其与Bcl-2、FasL表达的相关性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述一 |
| 参考文献 |
| 综述二 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（9）子宫内膜异位症患者内膜细胞ER、PR表达与细胞凋亡关系的研究（论文提纲范文）
| 一 中文摘要 |
| 二 英文摘要 |
| 三 前言 |
| 四 文献综述 |
| 五 材料与方法 |
| 六 结果 |
| 七 讨论 |
| 八 结论 |
| 九 参考文献 |
| 十 致谢 |
| 十一 英文缩写一览表 |
| 十二 附图 |
（10）Survivin和Bcl-2在子宫内膜异位症中的表达及意义（论文提纲范文）
| 一、摘要 |
| 1、中文摘要 |
| 2、英文摘要 |
| 二、英文缩略语 |
| 三、论文 |
| 1、前言 |
| 2、材料及方法 |
| 3、结果(附论文图片) |
| 4、讨论 |
| 5、结论 |
| 6、参考文献 |
| 四、综述 |
| 五、在读期间发表论文 |
| 六、致谢 |
四、凋亡调节基因bcl-2,bax和fas在子宫内膜异位症中的表达（论文参考文献）
- [1]G蛋白偶联雌激素受体/miR-148a轴介导子宫内膜异位细胞凋亡的机制研究[D]. 何顺之. 山东大学, 2020(04)
- [2]MicroRNA-138在子宫内膜异位症中的作用和机制研究[D]. 张爱凤. 山东大学, 2019(02)
- [3]长链非编码RNA-NA正向调控NR4A1影响子宫内膜癌生物学行为及其机制研究[D]. 孙林英. 山东大学, 2019(03)
- [4]p53、p21、MDM2蛋白在卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌症中的表达及临床意义[D]. 桑琳. 安徽医科大学, 2013(01)
- [5]金雀异黄素对大鼠异位子宫内膜的作用及相关机制[D]. 金延泽. 延边大学, 2012(12)
- [6]Bcl-2、Bax和p21WAF1在子宫腺肌病患者子宫内膜中的表达及其相关性研究[D]. 赵宇航. 佳木斯大学, 2010(04)
- [7]HO-1在子宫内膜异位症中的表达及其与Bcl-2、FasL表达的相关性研究[D]. 谭风和. 泰山医学院, 2010(02)
- [8]细胞凋亡与子宫内膜异位症[J]. 邱琳,张晓玲. 江西医学院学报, 2009(06)
- [9]子宫内膜异位症患者内膜细胞ER、PR表达与细胞凋亡关系的研究[D]. 王君. 佳木斯大学, 2008(02)
- [10]Survivin和Bcl-2在子宫内膜异位症中的表达及意义[D]. 张鑫. 第二军医大学, 2008(02)