一、肝纤维化形成过程中肾素-血管紧张素系统的变化（论文文献综述）
林苏[1]（2021）在《非酒精性脂肪性肝病与慢性肾脏病》文中指出【目的】非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）可能增加慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）的风险,但结论在不同人种间尚有争议。本研究选用中美两国独立的体检数据,通过校正相同的混杂因素在不同人群中比较NAFLD与CKD的关系;同时根据2020年新提出的代谢相关脂肪性肝病（Metabolic dysfunction associated fatty liver disease,MAFLD）诊断标准探索MAFLD与CKD的关系,并对MAFLD诊断标准在人群中的诊断效能进行检验。【方法】1.CKD与NAFLD关系的中西方差异:数据来源于美国第三次国家健康与营养调查（National Health and Nutrition Examination Survey,NHANES III）数据库及温州医科大学附属第一医院体检中心数据库。脂肪性肝病的诊断根据超声结果。根据慢性肾脏病流行病学协作组推荐的CKD-EPI计算公式基于血清肌酐值估计e GFR水平。CKD定义为e GFR<60[m L/min/1.73m2)]和（或）蛋白尿（尿白蛋白肌酐比值≥30mg/g）。2.MAFLD新标准在体检人群中的应用以及对CKD的影响:同样采用NHANES数据库进行分析。MAFLD诊断标准参考2020年APSAL的代谢相关脂肪性肝病诊疗指南。3.统计方法:上述研究使用SAS 9.4（SAS Institute,Inc,Cary,NC）进行NHANES数据的转换。Medcalc 15.2.2（Med Calc Software bvba,Ostend,Belgium）用于绘制森林图。R 3.6.2（https://www.r-project.org/）用于统计及绘制曲线图。。采用Student t检验（变量为正态分布）、Mann-WhitneyU检验（变量为非正态分布）和卡方检验（变量为分类变量）研究两组间的差异。为了估计NAFLD对CKD的影响,采用二元Logistic回归分析计算校正后的风险,方法为enter法,结果以比值比（OR）及其95%置信区间（CI）表示。4.【结果】1.CKD与NAFLD关系的中西方差异共纳入63274例样本,其中12045人来自NHANES III数据集,51229人来自中国数据集。美国人群NAFLD患病率为36.09%,中国人群为27.12%（P<0.001）。中国人群的CKD患病率低于美国人群（9.1%vs 21.7%,P<0.001）。晚期CKD（3-5期）的患者约占美国CKD患者的62.55%,而仅占中国CKD的43.24%（P<0.001）。多因素回归中,美国人群NAFLD均与CKD无关（OR波动于0.952-1.052,P均>0.05）,而在中国人群中,校正年龄、性别、BMI、高血压病、糖尿病病史后,NAFLD仍然是CKD的独立危险因素。但额外校正血脂后,NAFLD与CKD的关系无统计学意义。根据CKD的严重程度对病例进行分层,调整相同代谢因素后,中国和美国人群NAFLD与晚期CKD（3-5期）均无显着相关性（均P>0.05）。排除晚期CKD患者后估计NAFLD人群发生早期CKD的风险,在所有模型中,NAFLD都是中国人群早期肾功能下降的独立危险因素（OR波动于1.245-1.513,P均<0.05）。在美国人群中,校正性别、年龄、糖尿病及高血压病史后,NAFLD也为早期CKD的独立危险因素（OR=1.043-1.272,P均<0.05）。2.MAFLD新标准在体检人群中的应用以及对CKD的影响共13083例受试者入选,诊断MAFLD的受试者共4087人,占31.24%,诊断NAFLD的人数为4347,占总体的33.23%（4347/13083）。与NAFLD组相比,MAFLD组年龄较大、BMI高、代谢因素更多（P均<0.05）。MAFLD组ALT、AST、GGT及ALP水平均明显增高,同时无创性肝纤维化评分（NFS、FIB-4、BARD score）诊断出的进展期肝纤维化比例均明显高于NAFLD组（P<0.05）。MAFLD人群中CKD检出率为26.91%,显着高于非MAFLD人群（18.27%,P<0.001）。CKD 3-5期的比例为16.44%,高于非MAFLD组（11.33%,P<0.001）。尽管MAFLD的CKD检出率数值上高于NAFLD（26.91%vs 25.83%）患者,但统计学上无显着性差异（P=0.279）。多因素回归显示,MAFLD也增加早期CKD的风险,但是并非晚期CKD的独立危险因素。共有620/13083例（4.74%）符合NAFLD的标准,但不符合MAFLD标准（Non-MD-NAFLD）,其46例（7.42%）的受试者B超诊断严重脂肪肝。与MAFLD相比,伴有严重脂肪变性的Non-MD-NAFLD受试者比MAFLD受试者年轻将近8岁（40.17±17.21 vs 48.39±15.20,P=0.002）,BMI明显降低但两组患者的转氨酶水平却无显着差异（均P>0.05）。同时根据APRI、FIB-4和NFS等无创评分诊断的进展期肝纤维化比例也无显着差异（均P>0.05）。在肾功能方面,无论是Non-MD-NAFLD与MAFLD的比较,还是Non-MD-NAFLD不同脂肪肝等级的受试者之间的比较,肌酐和e GFR方面均无显着性差异。根据确诊MAFLD时代谢异常条件的个数将MAFLD患者分为三组,随着代谢异常条件的增多,诊断MAFLD的受试者肝内外器官损伤程度趋于严重,表现为进展期纤维化的比例随代谢条件增多而增高,e GFR随代谢异常条件个数的增加而降低（P<0.05）。与其他因肥胖或因代谢紊乱确诊的MAFLD患者相比,单纯因糖尿病确诊的MAFLD患者肾损伤最重。【结论】NAFLD增加早期CKD的风险,但由于中美人群的晚期CKD的比例不同,导致NAFLD与CKD风险的研究在美国人群中无统计学意义。另外MAFLD的新定义较NAFLD有助于筛选更多的肝脏病变进展风险的人群,但在与肾损伤的关系方面,NAFLD与MAFLD似乎没有显着性的区别。部分低BMI的人虽然存在严重肝脂肪变性,但因不存在代谢风险而被MAFLD漏诊,这类人群可能也存在比较严重的肝纤维。但本研究为横断面研究,难以得出因果关系的推论,需要前瞻性研究对结论进行进一步验证。
周怡驰[2]（2021）在《柴芪益肝方治疗肝纤维化的临床和实验研究》文中提出中国是肝病大国,多种肝病高发,肝纤维化作为肝病研究和治疗的重要领域,越来越受到重视。肝纤维化是肝脏修复肝损伤引起的异常结缔组织增生和细胞外基质过度沉积的病理改变。肝纤维化存在于大多数慢性肝病中,是慢性肝病向肝硬化发展的必经阶段,甚至可持续进展为肝硬化、肝癌,给患者生命健康带来严重威胁。研究肝纤维化的病因及发病机制、寻找有效的治疗靶点,对于阻止肝病的发展、维护患者的生命健康有很大的意义。近年来,肝纤维化的病理分子生物学机制、临床诊疗技术等取得了长足发展。但目前西医对于抗纤维化疗效尚不确切,缺乏有效的治疗手段。中医药治疗肝纤维化具有确切的优势,已有多种注册适应证为肝纤维化的中成药上市。柴芪益肝方由导师胡世平教授所创,是治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的经验方,前期临床和实验研究发现对肝纤维化有较好疗效,但其作用机制尚不清楚。胡教授现任北京中医药大学深圳医院党委书记,广东省名中医,全国基层名老中医师承项目指导老师,深圳市地方级领军人才,获评“南粤最美中医”,从事中医药防治慢性肝病的临床与科研工作30多年,擅长中医、中西医结合治疗肝脏疾病,形成了独特的学术思想体系。目的结合临床回顾性研究、网络药理学预测和动物实验探讨柴芪益肝方治疗肝纤维化的疗效与作用机制,为该方的进一步开发应用提供依据,并分析总结导师胡世平教授“推陈致新”的学术思想及其在柴芪益肝方组方思路中的应用。方法1、临床研究:通过回顾性研究方法,收集2018年1月1日至2021年2月3日期间在北京中医药大学深圳医院肝病科门诊及住院部诊断为慢性乙型肝炎患者的病例资料,并筛选出符合本研究标准的慢性乙型肝炎肝纤维化肝郁脾虚型患者。根据患者所服药物分为常规治疗组和CQYG组,收集所有患者治疗12个月前后的指标,包括主要指标:肝脏硬度值（LSM）、纤维化-4指数（FIB-4）、天门冬氨酸氨基转移酶和血小板比率指数（APRI）、乙肝病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒（HBV-DNA）定量;次要指标:谷丙转氨酶（ALT）,谷草转氨酶（AST）,总胆红素（TBiL）,谷氨酰转酞酶（GGT）,白蛋白（ALB）,将所有检测指标进行治疗前后的组内与组间比较。2、网络药理学:检索 TCMSP、TCMID、Swiss Target Prediction、OMIM、Gene Cards等数据库,筛选CQYG治疗肝纤维化的活性成分和潜在作用靶点。借助Cytoscape软件和String数据库,分别构建“药物-成分-靶点-疾病”网络和蛋白互作PPI网络,并进行拓扑学分析,筛选关键药效分子和核心靶点。运用Autodock vina软件进行分子对接,并基于R语言对作用靶点进行GO和KEGG富集分析。3、动物实验:选取50只6周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠,随机抽取10只分别纳入空白对照组（CTL）、肝纤维化模型组（Model）、柴芪益肝方低剂量组（CQYG-L）、柴芪益肝方高剂量组（CQYG-H）和水飞蓟素治疗组（Silymarin）,共5组。四氯化碳（carbontetrachloride,CCl4）腹腔注射建立小鼠肝纤维化模型:除空白对照组外,其余各组小鼠腹腔注射含15%CCl4的橄榄油5ml·kg-1,每周2次,连续注射8周。从造模第1天起,柴芪益肝方低、高剂量组小鼠分别灌胃给予0.37 g·kg-1·d-1、0.74 g·kg-1·d-1的柴芪益肝方,水飞蓟素组给予100 mg·kg-1·d-1灌胃。实验结束,摘取所有小鼠肝脏、收集血清,对各组小鼠肝组织进行HE、天狼星红、Masson染色;用自动生化分析仪检测血清AST和ALT的含量;ELISA法检测肝组织中MDA、SOD、GSH-Px和Hyp水平;免疫组化法检测肝组织中α-SMA、Collagen I、Vimentin的表达;免疫荧光法检测肝组织中Ki67+和Lgr5+细胞;提取各组肝组织RNA和蛋白,Real-time PCR和Western blot分别检测肝纤维化小鼠肝组织中NF-κB、TGF-β/Smad、Wnt/β-Catenin信号通路相关靶标mRNA和蛋白表达。结果1、临床研究:共纳入符合标准的患者203人,其中,常规治疗组纳入101人,年龄最大者76岁,最小22岁,平均年龄（41.34±0.90）岁;CQYG组纳入102人,年龄最大者67岁,最小27岁,平均年龄（43.13±0.78）岁,两组年龄无统计学差异（P>0.05）,具有可比性。（1）无创肝纤维化指标（LSM、FIB-4、APRI）在两组患者自身治疗前后比较,以及治疗后的组间比较,均无显着性差异（P>0.05）,但两组治疗后LSM均较治疗前有降低趋势。（2）两组患者自身前后比较,乙型肝炎病毒（HBV-DNA）定量和乙肝病毒表面抗原（HBsAg）治疗前和后均无显着性差异（P>0.05）;CQYG组较常规治疗组治疗后HBsAg显着性降低（P<0.05）,CQYG组治疗后HBV-DNA定量和HBsAg较治疗前均有下降趋势。（3）两组患者自身治疗前后血清肝功能指标（ALT、AST、GGT、TBiL、ALB）均在正常范围内,治疗后组间比较肝功能均无显着性差异（P>0.05）。2、网络药理学预测:共获得121种CQYG治疗肝纤维化的潜在活性成分和257个对应的作用靶点,并筛选出14种关键药效分子及28个核心靶点。点度中心性值前10的核心靶点和关键药效分子具有较好的结合活性。GO和KEGG结果主要涉及炎症反应、氧化应激、成纤维细胞增殖、内皮细胞增殖、调节脂质代谢活动、血管生成、肝再生等生物学过程及TNF信号通路、Th17细胞分化信号通路、IL-17信号通路、PI3K/Akt信号通路、Wnt信号通路、NF-κB信号通路等。3、动物实验研究:与模型组相比,CQYG各组和水飞蓟素组小鼠肝组织形态和胶原沉积较模型组改善,水飞蓟素组和CQYG-H小鼠血清ALT、AST水平均显着降低（P<0.01）;CQYG高剂量组肝组织MDA和Hyp的含量显着低于模型组（P<0.05）,SOD和GSH-Px含量显着高于模型组（P<0.05）;免疫组化结果显示,CQYG组和水飞蓟素组α-SMA、CollagenI、Vimentin阳性表达区域较模型组少;免疫荧光结果显示,柴芪益肝方组Ki67阳性细胞和Lgr5阳性细胞数量均较模型组有增多趋势;CQYG组肝组织中p-NF-κBp65、TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白表达水平较模型组显着降低（P<0.05）;与模型组相比,CQYG-H 肝组织 CollagenI、TGF-β、TNF-α、IL-1βmRNA 的表达水平以及 Collagen I、α-SMA、TIMP-1、TGF-β、磷酸化 Smad2/3、Smad2/3、Smad4、Wnt3a、β-Catenin 蛋白表达均较模型组有不同程度降低,而MMP-9、Smad7蛋白表达水平显着升高（P<0.05）。结论1、临床研究:柴芪益肝方加减联合常规治疗有降低慢乙肝肝纤维化患者肝脏硬度值、HBV-DNA和HBsAg含量的趋势,且在降低HBsAg定量上优于单纯常规治疗。2、网络药理学:柴芪益肝方可能通过槲皮素、白藜芦醇、山奈酚等活性成分作用于丝裂原激活蛋白激酶MAPK1/3/8、原癌基因酪氨酸激酶Src、激活子蛋白Jun等靶点,以及TNF信号通路、Th17细胞分化信号通路、IL-17信号通路、PI3K/Akt信号通路、HIF-1信号通路、Rap1信号通路、Wnt信号通路、NF-κB信号通路等,调节肝脏炎症反应、氧化应激、细胞增殖、肝再生等生物学过程发挥治疗肝纤维化的作用。3、动物实验研究:柴芪益肝方能显着减轻四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化,其作用机制可能减轻氧化应激反应、抑制NF-κB介导的炎症信号通路,下调炎症细胞因子IL-6、TNF-α、IL-1β的释放,减轻肝脏炎症,并通过调节TGF-β/Smad、Wnt3a/β-catenin信号通路,抑制肝星状细胞的活化,调节MMP-9和TIMP-1活性平衡,减少细胞外基质α-SMA、Collagen I、Hyp的合成,促进ECM降解相关。4、“推陈致新”学术思想:导师胡世平教授“推陈致新”的学术思想核心在于顺应人体本身的正气祛邪之势和气血津液各自的新陈代谢过程,协助人体自然排邪,促进疾病向愈。在肝纤维化治疗上,通过“推陈致新”,加强气化动力、调节气机升降,使病理产物消除的同时,人体气血津液正常化生。
刘清霞[3]（2021）在《Alamandine通过MrgD受体抑制NOX4诱导自噬减轻肺纤维化》文中研究说明背景Alamandine（ALA）及其受体Mas相关G蛋白耦合受体（MrgD）是最近被报导的肾素-血管紧张素系统（RAS）的新成分。ALA可由血管紧张素（1-7）（Ang（1-7））脱羧形成,也可以由血管紧张素转化酶2（ACE2）水解血管紧张素原A（Ang A）形成。ALA主要通过激活MrgD受体起作用,它的作用包括舒张血管、保护缺血再灌注心脏、抑制氧化应激、减轻心脏及肾脏纤维化等作用。然而,ALA对肺纤维化的作用及MrgD受体是否在肺成纤维细胞中表达目前尚不清楚。目的1、在小鼠原代成纤维细胞上验证ALA减轻AngⅡ诱导的肺成纤维细胞胶原沉积的假说及探讨相关通路。2、采用qPCR技术分析MrgD受体是否在成纤维细胞中表达。3、观察ALA在博来霉素（BLM）诱导的小鼠肺纤维化中的作用及探讨相关机制。方法1、采用第三至第五代C57/B小鼠原代肺成纤维细胞进行体外实验,Western blot法检测各组α-colllgen Ⅰ、CTGF、LC3B、NOX4、P62的蛋白水平;qPCR检测原代肺成纤维细胞MrgD mRNA的表达水平;试剂盒检测细胞H2O2;免疫荧光检测自噬流水平。2、体内实验采用气管内滴入BLM的方法构建C57/B小鼠肺纤维化的模型。28天后取下肺组织,control组、BLM组、BLM+ALA组及BLM+pirfenidone组分别进行HE染色观察肺组织损伤情况,Masson染色分析组织胶原的情况,Ashcroft score及masson进行肺纤维化半定量评分,免疫组化检测组织LC3B、NOX4、P62免疫强度,试剂盒检测组织H202及HYP的含量。3、采用SPSS22.0软件进行统计分析,以P<0.05表示有统计学意义。结果1、ALA减轻小鼠肺成纤维细胞胶原的沉积。ALA(10-7mol/L)预处理肺成纤维细胞,随后暴露于AngⅡ(10-7mol/L)24h,ALA能明显减少肺成纤维细胞α-collagen Ⅰ、CTGF的蛋白水平。2、ALA通过MrgD受体起作用。qPCR检测提示肺成纤维细胞MrgD mRNA的表达水平升高。加入MrgD受体抑制剂D-Pro7-Ang-（1-7）后ALA的抗纤维化作用明显被逆转。3、ALA通过抑制NOX4减轻肺纤维化。ALA(10-7mol/L)、NAC(10-3mol/L)、H202(5x10-5mol/L)分别预处理肺成纤维细胞后,随后加入 AngⅡ(10-7mol/L)作用24h,Control组α-collagenⅠ、NOX4蛋白表达量及H2O2浓度无明显升高,AngⅡ组上述指标明显升高,AngⅡ+ALA组明显低于AngⅡ组与AngⅡ+NAC组相近,与AngⅡ+H202组相反。4、ALA通过诱导自噬减轻肺纤维化。ALA(10-7mol/L)、rapamycin(10-6mol/L)、bafilommycicn A1(2.5x10-8mol/L,)分别预处理肺成纤维细胞1h,随后加入AngⅡ(10-7mol/L)作用 24h。AngⅡ组与control组比,α-collagenⅠ、P62、NOX4蛋白表达量明显增多,LC3BⅠ向LC3BⅡ转化明显减少,AngⅡ+ALA组较A即Ⅱ组α-collagenⅠ、P62、NOX4蛋白表达量明显减少,LC3BⅠ向LC3BⅠ转化增多,与AngⅡ+rapamycin组相同。加入自噬晚期抑制药物bafilomycicn A1后ALA诱导的自噬
欧亚妹,宋泽庆,刘刚[4]（2020）在《血管紧张素Ⅱ在纤维化疾病中的研究进展》文中指出纤维化可发生在各种组织器官,如肺、心、肾、肝,且这些纤维化疾病的死亡率居高不下。局部肾素-血管紧张素系统（RAS）几乎在所有的组织中得到证实,在组织损伤后被激活以促进组织修复,当过度活化时促进组织纤维化。血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）是该系统的主要效应肽,在调节细胞生长和促进组织纤维化的发生过程中发挥了重要作用。本文针对AngⅡ在不同组织纤维化中的作用研究进行综述。
王翠萍[5]（2019）在《贝那普利对肝纤维化小鼠AngⅡ及TGF-β1、IL-1β、iNOS表达的影响及机制研究》文中提出目的通过研究血管紧张素抑制剂类药物贝那普利对肝纤维化小鼠肝脏组织中AngII及TGF-β1、IL-1β、iNOS表达的影响,初步探索贝那普利发挥抗肝纤维化作用的机制。方法将40只SPF级健康雄性C57BL/6小鼠（体重在19g到22g之间）,随机分组为:（1）空白对照组、（2）贝那普利对照组、（3）CCl4致肝纤维化模型组、（4）贝那普利治疗组,每组10只。小鼠从济南朋悦实验动物繁育有限公司运到实验室鼠房后先饲养7天,让其适应新的环境后再开始实验。空白对照组不做任何处理,正常饲养;贝那普利对照组,每天一次贝那普利灌胃（10mg/kg）;CCl4致肝纤维化模型组,腹腔注射16%CCl4橄榄油悬浊液5mg/kg,即0.8 ml/kg CCl4,每3天一次;贝那普利治疗组,除每3天一次腹腔注射CCl4外,从实验开始就用贝那普利灌胃,采用的剂量为每天10mg/kg;各组小鼠每周称重,并根据小鼠体重及时调整用药量。实验分为两个阶段,在实验的第六周末和第八周末,分别选择四个小组的五只小鼠进行标本采集,根据实验需要取小鼠的血标本和肝脏标本。小鼠血液标本进行血清学检测,采用全自动生化仪检测小鼠血清中的丙氨酸氨基转氨酶（ALT）以及天门冬氨酸氨基转氨酶（AST）的浓度。小鼠肝脏组织进行以下几方面的实验研究,（1）进行肝组织细胞因子的检测,（2）对肝组织进行病理学检查,用4%多聚甲醛溶液对肝脏进行固定并做石蜡切片,然后进行肝组织HE染色以及检查纤维的特殊染色Masson染色。结果（1）血清学变化:CCl4致肝纤维化模型组小鼠的ALT、AST活性与空白对照组相比明显增高,ALT水平分别为:487.2±78.32U/L,70.40±9.325U/L,P<0.01;AST水平分别为:440.0±58.65U/L,192.0±10.2U/L,P<0.05;贝那普利治疗组小鼠的ALT、AST活性明显低于模型组,与模型组相比,ALT水平分别为:92.4±14.65U/L,487.2±78.32U/L,P<0.05;AST水平分别为:268.0±38.78U/L,440.0±58.65U/L,P<0.01。CCl4致肝纤维化模型组小鼠的ALT和AST活性明显高于其他三组,差异具有统计学意义（P<0.05）。（2）病理学变化:空白对照组和贝那普利对照组的肝组织结构正常且清晰完整,肝小叶同样有着正常的结构,没有发现炎性细胞对肝组织浸润;CCl4致肝纤维化模型组小鼠肝组织可见汇管区有大量网状纤维异常增生,且纤维间隔变宽,可见假小叶形成;贝那普利治疗组小鼠组织轻微变性坏死,在肝脏的汇管区能够发现少量的纤维增生,可见少量纤维间隔,但症状明显轻于模型组。（3）ELISA结果:（1）AngⅡ（血管紧张素Ⅱ）表达:CCl4致肝纤维化模型组高于空白对照组和贝那普利对照组（P<0.01）,贝那普利治疗组低于CCl4致肝纤维化模型组（P<0.05）。（4）qRT-PCR检测TGF-β1、IL-1β以及iNOS在每一组实验小鼠肝脏组织中的表达水平,结果显示CCl4致肝纤维化模型组中这三种因子的表达高于其他的三组实验小鼠（P<0.05）,贝那普利治疗组低于CCl4致肝纤维化模型组（P<0.05）。结论（1）血管紧张素抑制剂类药物贝那普利对CCl4诱导的肝纤维化小鼠有一定的抗纤维化作用。（2）从分子水平进一步证实了贝那普利具有抗纤维化作用,可能机制为抑制了肝组织中AngⅡ、TGF-β1、IL-1β、iNOS的表达。
刘颖[6]（2019）在《血管紧张素转化酶2在非酒精性脂肪肝病中的保护作用及其机制》文中研究说明近年来,血管紧张素转化酶2（Angiotensin Converting Enzyme 2,ACE2）在肝脏中的研究越来越受到关注。本研究以大鼠和大鼠BRL-3A细胞为研究对象,通过制造非酒精性脂肪肝病动物模型与细胞模型,对ACE2在非酒精性脂肪肝上的作用及其机制进行了探讨。研究包括以下三方面:1.肾素血管紧张素系统（RAS）两条通路相互负向调节对大鼠非酒精性脂肪肝病肝损伤的影响研究探讨了肾素血管紧张素系统（Renin Angiotensin System,RAS）两条通路对大鼠非酒精性脂肪肝病（Non-Alcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD）肝脏损伤的相互负向调节作用。60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和用药组。除正常对照组外,其余2组饲喂高脂饲料,用药组另外给伐他汀50 mg/kg·d。3周后每组宰杀10只大鼠,其余的按原定的分组继续饲喂3周,6周后宰杀剩余所有大鼠。测定各组大鼠血清中TG、ALT、AST的含量;测定肝脏组织中·OH、TNOS、SOD、T-AOC酶活性;ELISA法测定组织匀浆中AngⅡ、Ang1-7及炎症因子的释放量;蛋白印迹分析肝组织中ACE、ACE2、AT1R、MasR蛋白水平;HE染色观察肝脏病理形态学变化。结果:1)3周试验中与正常对照组相比,模型组大鼠血清TG、AST和ALT含量升高,肝脏病理形态学发生改变,肝组织中氧化应激、炎症因子释放增加;ACE、ACE2、MasR、AT1R 的蛋白表达升高,AngⅡ、Ang1-7 含量均增加,ACE/ACE2 和 AngⅡ/Ang1-7比值显着降低。2)6周试验中,模型组大鼠血清中TG、AST和ALT含量显着增加,肝脏病理形态学发生严重损伤变化,肝脏组织中氧化应激、炎症因子释放显着增加;ACE、AT1R蛋白表达及AngⅡ、Ang1-7含量升高,ACE2与MasR的蛋白表达显着降低,ACE/ACE2和AngⅡ/Ang1-7比值均降低,用药可改善氧化应激炎症的损伤并下调ACE/AngⅡ/AT1R通路。结论:高脂饲喂诱导的NAFLD大鼠模型中肝脏局部存在RAS系统,其两条通路均处于激活状态。3周诱导的模型中ACE2/Ang1-7/Mas通路占优势,6周诱导的模型中ACE/AngⅡ/AT1R通路占优势。结果提示:肝脏产生的内源性ACE2在外源性刺激物诱导的肝脏损伤时,可能通过介导Ang1-7/MasR通路的激活发挥一定的抗损伤作用。2.血管紧张素转化酶2（ACE2）在油酸诱导BRL-3A细胞NAFLD损伤中的作用本章以油酸处理建立合适的非酒精性脂肪肝细胞模型,从细胞水平上探讨ACE2/RAS在细胞NAFLD中的抗损伤作用。采用不同浓度油酸（0.025、0.05、0.1、0.2 mmol/L）处理BRL-3A细胞24 h,通过观察细胞形态变化,检测细胞活力、细胞内TG、ALT、AST的含量以及油红染色确立NAFLD细胞模型条件。然后,选取低、中、高三个油酸浓度（0.025、0.1、0.2 mmol/L）作用于细胞24 h进行后续实验,ELISA法检测细胞上清中炎性因子以及AngⅡ、Ang1-7含量;蛋白印迹法分析细胞内ACE、ACE2、AT1R、MasR蛋白水平。结果:1)通过油红染色及TG含量、ALT与AST活性,确定建立BRL-3A细胞体外NAFLD模型的条件是:油酸浓度为0.1 mmol/L,培养时间为24 h;2)ACE2均匀表达在细胞膜上。低浓度组（0.025 mmol/L）大鼠肝脏中ACE2、Ang1-7、MasR水平有升高趋势,AngⅡ含量与AT1R表达下调,ACE/ACE2比值与AngⅡ/Ang1-7比值下降;中浓度组（0.1 mmol/L）ACE、AT1R表达显着升高,其它RAS成员变化不明显;高浓度组（0.2 mmol/L）ACE2、Ang1-7、MasR表达水平或含量下降,ACE、AngⅡ、AT1R、ACE/ACE2比值与AngⅡ/Ang1-7比值都升高。结论:成功建立了 BRL-3A细胞NAFLD细胞模型。细胞NAFLD时,局部RAS系统被激活参与了细胞NAFLD的发生与发展。低浓度油酸处理细胞损伤较轻时,ACE2介导的Ang1-7/MasR通路占优势;高浓度油酸处理细胞损伤加重,ACE介导的AngⅡ/AT1R通路占主导地位。结果与体内实验结果一致,即ACE2对油酸介导的非酒精性脂肪肝细胞损伤有一定的保护作用。3.血管紧张素转化酶2（ACE2）缓解油酸诱导大鼠肝BRL-3A细胞损伤的作用机制ACE2与NAFLD所致肝细胞损伤相关,提示ACE2对肝细胞损伤有一定的保护作用。为了进一步验证ACE2对肝细胞脂质堆积及损伤的保护作用,本章用siRNA降低ACE2表达的细胞模型以及添加外源的ACE2活性蛋白于NAFLD细胞模型中,通过检测炎症因子、氧化应激指标,验证ACE2对NAFLD细胞损伤的保护功能,并通过分析RAS各成员的表达量或含量变化,以及脂代谢通路关键酶或蛋白表达变化,揭示ACE2对NAFLD肝细胞抗损伤的作用机制。结果:1)添加ACE2活性蛋白后,NAFLD的BRL-3A细胞氧化应激减轻,抗氧化应激能力增强,炎性反应减轻,NO、iNOS的表达减少;转染siRNA处理,氧化应激加重,炎性反应加重,NO、iNOS的表达升高。2)加入ACE2活性蛋白,细胞内甘油三酯含量及脂质堆积减轻,脂合成关键酶ACC、FAS表达量显着下调（P<0.05）,上调脂分解关键酶CPT-I和FABP表达量（P<0.01,P<0.05）;干扰ACE2表达后,TG含量及脂质堆积加重,脂合成关键酶ACC、FAS表达量显着上调（P<0.05）,脂分解关键酶CPT-I和FABP表达量上调（P>0.05）。结论:通过siRNA技术成功降低了 ACE2蛋白的表达。证实ACE2对油酸诱导的NAFLD模型细胞损伤有一定的缓解作用,ACE2改善了油酸诱导的NAFLD模型细胞的脂质堆积。其机制:ACE2可以调节AngⅡ的降解,增加Ang1-7的形成,并通过作用于NO/iNOS信号通路,减轻肝脏细胞脂肪变性、氧化应激和炎性损伤,ACE2/Ang1-7/Mas通路可以通过调节脂质代谢,部分减少肝脏脂肪积累。
王凯[7]（2019）在《血管紧张素转化酶2（ACE2）在LPS致猪肠道炎性损伤中的作用及其分子机制》文中指出血管紧张素转化酶2（ACE2）是肾素血管紧张素系统（RAS）的关键调节因子,已证实其在心、肝、肾等多种组织中具有广泛的抗炎抗损伤作用,但在猪肠道炎症中的作用尚不清楚。本研究以腹泻保育猪空肠以及猪肠上皮细胞（IPEC-J2）为对象,研究ACE2对猪肠道炎症损伤的保护作用,并探究其相关机制。研究包括以下三个方面:1肾素血管紧张素系统（RAS）两条通路在腹泻保育猪空肠炎症损伤中的表达变化及相互关系采取腹泻保育猪空肠组织,ELISA检测空肠组织炎性因子、AngII和Ang（1-7）的含量,病理组织切片观察组织病理学变化,RT-qPCR分析ACE2、Mas基因表达水平,Western-blotting检测ACE2、Mas、ACE和AT1蛋白表达水平。结果:1)腹泻保育猪空肠组织中促炎因子TNF-α、IL-1β比正常组显着性升高,抗炎因子IL-10无显着变化;2)病理组织学变化显示腹泻猪空肠组织上皮绒毛脱落,腺体增生,有大量出血点,;3)与正常组相比,空肠组织中ACE2、Mas mRNA和蛋白表达水平均下降,ACE和AT1蛋白表达水平升高,AngII含量增高,Ang（1-7）含量降低。4)ACE2/ACE蛋白比值低于正常组,结论:腹泻保育猪空肠表现增生性肠炎,此时,空肠组织局部RAS处于激活状态,ACE-AngII-AT1轴表达活性高于ACE2-Ang（1-7）-Mas轴,ACE2的抗炎性损伤作用处于劣势。2血管紧张素转化酶2（ACE2）在猪肠上皮细胞（IPEC-J2）中的表达定位及与细胞炎性损伤的相互关系以LPS致猪肠上皮细胞（IPEC-J2）炎症损伤模型,探讨ACE2与炎症损伤之间的相互关系。研究包括1)Western-blotting与免疫荧光法确定ACE2在IPEC-J2细胞中的细胞学定位及表达分布;2)用不同浓度LPS（0.001 μg/mL、0.01 μg/mL、0.1μg/mL、1μg/mL、10μg/mL）建立IPEC-J2细胞炎症模型;3)检测在LPS刺激下细胞上清中TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-10、AngII和Ang（1-7）的含量及细胞中RAS其他成员的表达变化,探讨RAS和LPS诱导的炎症损伤之间的相互关系;3)采用AngII受体抑制剂替米沙坦（Telmisartan）和添加外源性ACE2活性蛋白验证ACE2抵抗炎症损伤的潜力。结果:1)IPEC-J2细胞中有ACE2的蛋白表达,胞膜和胞浆中均有分布;2)成功建立不同浓度LPS致IPEC-J2细胞炎性损伤模型,确定LPS刺激时间为6h,表现在:细胞形态变化,细胞间隙不明显,细胞中ROS增多,促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-8上调或显着上调,抗炎因子IL-10显着下调;3)随着LPS浓度的增大,细胞中ACE2和Mas表达及Ang（1-7）含量均降低,ACE、AngII和ATI则呈增高趋势;4)相关性分析发现ACE2-Ang（1-7）-Mas轴与LPS导致的促炎性因子TNF-α,IL-1 β,IL-8的释放呈负相关关系,与抗炎因子IL-10呈正相关关系。ACE-AngII-AT1轴有相反的相关性;5)外源添加ACE2能显着降低LPS刺激下抗炎因子的释放,添加替米沙坦（AT1R抑制剂）可抑制LPS诱导的AT1通路的激活,缓解细胞炎症反应。结果提示:ACE2具有抵抗LPS致IPEC-J2细胞炎症损伤的作用,且有一定的浓度依赖性。其抵抗作用可能与降解AngII及产生Ang（1-7）,抑制LPS诱导的ACE-AngII-AT1通路的激活有关。3血管紧张素转化酶2（ACE2）抵抗LPS诱导猪肠上皮细胞炎性损伤的分子机制利用CRISPR/Cas 9基因编辑技术,构建猪肠上皮细胞（IPEC-J2）ace2基因靶向敲除系统,利用ace2敲除细胞反向探究ACE2对猪肠上皮细胞炎性损伤的保护作用,并利用外源性ACE2活性蛋白及其Mas受体抑制剂（A779）的添加,通过分析TLR4、NF-κB和MAPK等炎性信号通路的关键蛋白因子的变化,揭示ACE2抗炎性损伤作用的分子机制。结果:1)IPEC-J2细胞中ace2基因可被CRISPR-Cas9系统敲除,并建立了ace2缺失IPEC-J2细胞株。Western-blotting和免疫荧光检测ace2经过敲除后,其在细胞内的表达明显降低,敲除细胞中炎性反应加重,ACE2和Mas表达显着下调,TLR4被激活,炎性因子释放增多;2)添加ACE2活性蛋白后,可以缓解炎症因子的表达升高,A779可以逆转ACE2的抗炎作用。3)ACE2可以抑制LPS导致的NF-κB和MAPK通路中p65和ERK1/2磷酸化水平的显着上升。这种作用也可被A779阻断。结论:ACE2通过降解AngII,介导Ang（1-7）-Mas通路,对LPS诱导的炎性损伤有一定抗炎作用,其机制可能是通过调控NF-κB中p65和MAPK通路的ERK1/2磷酸化水平,减少细胞炎性因子的表达和释放实现的。综上,猪肠道局部有RAS的所有成员,其相互拮抗的两条轴在有外界刺激造成肠道或细胞炎性损伤时发生了损伤与抗损伤作用,ACE2介导的Ang（1-7）-Mas轴发挥了抗损伤作用,对空肠组织或肠上皮细胞炎性损伤具有一定的保护或修复作用。
聂琨梅,李小蕃,陈美岑,王振常[8]（2018）在《中药及中药提取物作用于血管紧张素对肝纤维化的影响》文中研究指明肝纤维化是肝硬化的早期可逆阶段,在此阶段应积极治疗,以防病情进一步发展为肝硬化,引发各类并发症。但是由于肝纤维化的发病机制及病情复杂,目前在西医方面没有具体的治疗方案,远期治疗效果不理想,并且在临床中使用中受到限制。最近研究发现RAS系统中的血管紧张素在肝纤维化的发生及发展中发挥着举足轻重的作用,并且中药及中药提取物作用于血管紧张素后可通过相关的信号通路抑制HSC的活化及增殖,并减少胶原的产生,从而抑制肝纤维化的进展。
廖维芳[9]（2017）在《过表达G蛋白偶联受体Mas的肝星状细胞对人肝癌细胞的作用研究》文中研究表明目的本文旨在阐明过表达G蛋白偶联受体Mas的肝星状细胞对肝癌细胞的作用,揭示Mas受体在肝癌微环境中对肝癌发展的作用,为今后研究Mas受体在肝癌中的精确作用机制,探讨Mas作为肝癌的治疗靶点提供理论依据。方法采用免疫组化检测Mas受体和α-SMA在人肝细胞癌和癌旁组织中的表达,探讨Mas受体与α-SMA之间的关系;通过基因转染构建过表达Mas的肝星状细胞株,运用荧光定量PCR鉴定过表达细胞株;收集过表达Mas的肝星状细胞的培养液作用于肝癌细胞Huh-7细胞,检测细胞增殖、周期、凋亡,并通过Transwell迁移侵袭实验、软琼脂集落形成实验检测对肝癌细胞迁移侵袭和克隆形成的影响;ELISA和消化法分别检测肝星状细胞培养液中TGFβ1和羟脯氨酸的水平变化;体内裸鼠成瘤实验探索过表达Mas的肝星状细胞对肝癌细胞Huh-7细胞肿瘤生长的影响。结果Mas受体与α-SMA在肝细胞癌和癌旁组织中均有表达,Mas在癌旁组织中表达高于肝癌癌组织;Mas受体与α-SMA在肝细胞癌中表达不存在相关关系;成功构建过表达Mas的肝星状细胞株;肝星状细胞能促进肝癌细胞Huh-7细胞增殖、迁移和侵袭;Mas作用与肝星状细胞后,可以减弱肝星状细胞促进肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用,在肿瘤细胞周期和凋亡过程中未出现明显作用;Mas作用肝星状细胞,其培养液中TGFβ1和羟脯氨酸表达未出现明显变化;体内裸鼠成瘤实验未发现明显差异。结论肝星状细胞具有促进肝癌细胞Huh-7细胞增殖、迁移和侵袭的能力。Mas作用于肝星状细胞,减弱其促进肝癌细胞Huh-7细胞增殖、迁移和侵袭的能力。
孙芳,廖维芳,林文珍[10]（2017）在《RAS对各肝病影响的研究进展》文中认为肾素-血管紧张素系统（rennin angiotensin system,RAS）是机体内重要的具有调节血压、水钠平衡等功能的内分泌调节系统。近年在各肝病的研究中发现,RAS失衡与各种肝病的发生与发展均有密切关系。肝组织内存在局部的完整RAS系统,当肝细胞或肝组织受到某种致病因素的刺激时,局部RAS被激活,各成分活性增强并重新分布,继而影响肝病的发展。早期研究已证实ACE-AngⅡ-AT1R轴表达上调可加重肝脏损伤,促进各肝病的进展。新近研究发现的ACE2-Ang（1-7）-Mas轴被不断证明是ACE-AngⅡ-AT1R轴的反向调节轴,被称为"替代RAS经典轴",发挥拮抗ACE-AngⅡ-AT1R轴的作用,对肝病的进展起一定的缓解或逆转作用。本研究就近年来关于RAS对各肝病的影响的相关研究做一综述,为找到更有效的缓解和治愈肝病的新方法提供新思路。
二、肝纤维化形成过程中肾素-血管紧张素系统的变化（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、肝纤维化形成过程中肾素-血管紧张素系统的变化（论文提纲范文）
（1）非酒精性脂肪性肝病与慢性肾脏病（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 研究背景 |
| 第一部分 CKD与NAFLD关系的中西方差异 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第二部分 MAFLD新标准在体检人群中的应用以及对CKD的影响 |
| 前言 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 综述 脂肪性肝病与慢性肾脏病 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（2）柴芪益肝方治疗肝纤维化的临床和实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一章 中西医治疗肝纤维化的研究进展 |
| 第一节 西医诊断和治疗肝纤维化的研究进展 |
| 第二节 中医药治疗肝纤维化的研究进展 |
| 第二章 柴芪益肝方治疗肝郁脾虚型慢性乙型肝炎肝纤维化的临床回顾性研究 |
| 前言 |
| 第一节 临床资料 |
| 第二节 分组与治疗 |
| 第三节 结果分析 |
| 第四节 讨论与小结 |
| 第三章 基于网络药理学探讨柴芪益肝方治疗肝纤维化的作用机制 |
| 前言 |
| 第一节 资料与方法 |
| 第二节 结果 |
| 第三节 讨论与小结 |
| 第四章 柴芪益肝方对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的作用及机制研究 |
| 前言 |
| 第一节 材料与研究方法 |
| 第二节 指标检测 |
| 第三节 结果 |
| 第四节 讨论与小结 |
| 结语 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（3）Alamandine通过MrgD受体抑制NOX4诱导自噬减轻肺纤维化（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 Alamandine通过MrgD受体抑制氧化应激诱导自嗟减轻AngⅡ诱导的肺成纤维细胞胶原沉积 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 实验材料及方法 |
| 统计分析 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 Alamandine通过自嗤减轻小鼠肺纤维化 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 统计分析 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 全文总结与展望 |
| 综述一 肾素-血管紧张素系统与肺部疾病 |
| 综述二 肾素-血管紧张素系统的新成员：Alamandine及MrgD受体 |
| 参考文献 |
| 中英文缩写对照 |
| 博士在读期间论文发表情况 |
| 致谢 |
（4）血管紧张素Ⅱ在纤维化疾病中的研究进展（论文提纲范文）
| 1 AngⅡ在肺纤维化中的作用 |
| 2 Ang II在心肌纤维化中的作用 |
| 3 AngⅡ在肾脏纤维化中的作用 |
| 4 AngⅡ在肝纤维化中的作用 |
| 5 抑制AngⅡ的应用局限 |
| 6 总结 |
（5）贝那普利对肝纤维化小鼠AngⅡ及TGF-β1、IL-1β、iNOS表达的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 研究对象与方法 |
| 1 实验动物 |
| 2 主要实验仪器 |
| 3 主要实验试剂 |
| 4 实验方法 |
| 4.1 实验小鼠的喂养 |
| 4.2 动物分组及肝纤维化小鼠模型制备 |
| 4.3 标本获取 |
| 4.3.1 小鼠血清样本采集 |
| 4.3.2 小鼠肝组织标本采集 |
| 4.4 实验小鼠血清学检测ALT、AST水平 |
| 4.5 实验小鼠肝组织病理学检查 |
| 4.5.1 小鼠肝组织HE染色 |
| 4.5.2 小鼠肝组织Masson染色 |
| 4.6 ELISA检测小鼠肝组织AngII的浓度 |
| 4.7 qRT-PCR检测TGF-β、iNOS以及IL-1β在小鼠肝脏组织中的表达水平 |
| 4.7.1 实验小鼠肝组织总RNA的提取 |
| 4.7.2 OD值检测 |
| 4.7.3 小鼠肝组织总RNA反转录 |
| 4.7.4 实时荧光定量 PCR 检测 |
| 5 统计学处理 |
| 结果 |
| 1 小鼠状态观察 |
| 2 实验小鼠血清学指标 |
| 2.1 贝那普利能够降低肝纤维化小鼠血清ALT浓度水平 |
| 2.2 贝那普利能够降低肝纤维化小鼠血清AST浓度水平 |
| 3 实验小鼠肝组织病理性改变 |
| 3.1 各组实验小鼠肝脏一般形态变化 |
| 3.2 各组实验小鼠肝组织HE染色、Masson染色结果 |
| 4 贝那普利可降低小鼠肝组织AngII的浓度 |
| 5 贝那普利对肝纤维化小鼠肝脏组织中TGF-β1、IL-1β、iNOS表达水平的影响 |
| 5.1 贝那普利可降低小鼠肝脏组织中TGF-β1 的表达 |
| 5.2 贝那普利可降低小鼠肝脏组织中IL-1β的表达 |
| 5.3 贝那普利可降低小鼠肝脏组织中iNOS的表达 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 缩略词表(附录) |
| 致谢 |
（6）血管紧张素转化酶2在非酒精性脂肪肝病中的保护作用及其机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 全文缩略词 |
| 引言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 肾素血管紧张素系统(RAS)在肝脏疾病中的研究 |
| 1 肾素血管紧张素系统简述 |
| 2 肾素血管紧张素系统在肝脏疾病中的研究进展 |
| 2.1 肾素血管紧张素系统与肝脏纤维化 |
| 2.2 肾素血管紧张素系统与肝硬化 |
| 2.3 肾素血管紧张素系统与非酒精性脂肪性肝病 |
| 2.4 肾素血管紧张素系统与肝细胞胰岛素抵抗 |
| 2.5 肾素血管紧张素系统与原发性肝细胞癌 |
| 3 肾素血管紧张素系统在肝脏疾病治疗中的潜力 |
| 3.1 肾素血管紧张素系统抑制剂 |
| 3.2 激活ACE2/Ang 1-7/ Mas通路 |
| 3.3 重构ACE2腺病毒载体 |
| 3.4 ACE2 RNA靶向转录法 |
| 第二章 肾素血管紧张素系统(RAS)在非酒精性脂肪肝中的研究进展 |
| 1 非酒精性脂肪肝病概述 |
| 1.1 非酒精性脂肪肝病定义 |
| 1.2 发病机制 |
| 2 肾素血管紧张素系统在非酒精性脂肪肝病中的研究进展 |
| 2.1 胰岛素抵抗和脂质沉积 |
| 2.2 细胞因子 |
| 2.3 氧化应激与脂质过氧化 |
| 2.4 多因素协同作用 |
| 3 血管紧张素转化酶2在非酒精性脂肪肝病中的研究进展 |
| 3.1 血管紧张素转化酶2的结构与功能 |
| 3.2 ACE2在非酒精性脂肪肝病中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 第二篇 试验研究 |
| 第三章 肾素血管紧张素系统(RAS)两条通路相互负向调节对大鼠非酒精性脂肪肝病肝损伤的影响研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 主要试剂及仪器 |
| 1.2 实验动物 |
| 2 方法 |
| 2.1 高脂饲料诱导非酒精脂肪肝病模型的建立 |
| 2.2 肝脏组织中RAS各成员含量或表达水平的测定 |
| 2.3 数据统计与分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 非酒精性脂肪肝模型的建立 |
| 3.2 大鼠肝脏组织中RAS系统成员变化 |
| 4 讨论 |
| 4.1 高脂饲料饲喂诱导大鼠NAFLD模型的建立 |
| 4.2 NAFLD发生时大鼠肝脏ACE2/RAS的变化 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 血管紧张素转化酶2 (ACE2)在油酸诱导BRL-3A细胞非酒精性脂肪肝细胞损伤中的作用 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 主要试剂及仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 大鼠肝脏间质细胞(BRL-3A) NAFLD细胞模型的构建 |
| 2.2 油酸诱导BRL-3A细胞细胞处理及分组 |
| 2.3 低中高浓度油酸处理BRL-3A对细胞中RAS各成员的影响 |
| 2.4 数据分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 体外诱导非酒精脂肪肝细胞模型的建立 |
| 3.2 低中高浓度油酸处理BRL-3A细胞中RAS各成员的变化 |
| 4 讨论 |
| 4.1 油酸诱导NAFLD细胞模型的建立 |
| 4.2 RAS系统在油酸诱导NAFLD细胞模型中的变化 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第五章 血管紧张素转化酶2 (ACE2)缓解油酸诱导大鼠肝脏BRL-3A细胞损伤的作用机制 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 主要试剂及仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 目的基因siRNA引物合成 |
| 2.2 BRL-3A细胞培养与传代 |
| 2.3 ACE2-siRNA转染细胞抑制ACE2表达 |
| 2.4 油酸诱导非酒精性脂肪肝细胞损伤模型及分组 |
| 2.5 数据统计与分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 转染试验结果验证 |
| 3.2 各组肾素血管紧张素系统成员变化 |
| 3.3 BRL-3A细胞脂质堆积的影响 |
| 3.4 BRL-3A细胞中氧化应激相关指标变化 |
| 3.5 BRL-3A细胞上清IL-1β、TNF-α和IL-10含量的测定结果 |
| 3.6 BRL-3A细胞中NO与iNOS产生的变化 |
| 3.7 BRL-3A细胞脂代谢相关酶或蛋白表达的变化 |
| 4 讨论 |
| 4.1 RNA干扰BRL-3A细胞抑制ACE2基因表达模型建立 |
| 4.2 ACE2对油酸诱导NAFLD细胞模型氧化应激炎性损伤的改善的作用 |
| 4.3 ACE2对油酸诱导NAFLD细胞模型脂代谢的影响机制 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 |
| 致谢 |
（7）血管紧张素转化酶2（ACE2）在LPS致猪肠道炎性损伤中的作用及其分子机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号及缩略语说明 |
| 引言 |
| 第一篇 论文综述 |
| 第一章 血管紧张素转化酶2 (ACE2)概述及其研究进展 |
| 1 肾素血管紧张素系统 |
| 2 血管紧张素转化酶2 (ACE2)研究概述 |
| 2.1 ACE2分布 |
| 2.1.1 ACE2在组织器官中的分布 |
| 2.1.2 ACE2在细胞中的分布 |
| 2.2 ACE2结构及水解位点 |
| 3 ACE2的生物学功能 |
| 3.1 ACE2降血压、舒张血管的功能 |
| 3.2 ACE2抗纤维化功能 |
| 3.3 ACE2抗炎症损伤的功能 |
| 3.4 ACE2其他功能 |
| 第二章 血管紧张素转化酶2 (ACE2)在肠道方面的研究 |
| 1 ACE2在肠道方面的研究概述 |
| 1.1 ACE2与肠道氨基酸转运 |
| 1.2 ACE2与肠道葡萄糖转运 |
| 2 ACE2在肠道炎症方面的研究 |
| 2.1 肾素血管紧张素系统(RAS)中AngII为促进炎症反映介质 |
| 2.2 ACE2降解AngII发挥抗炎作用 |
| 3 ACE2在肠道炎症方面的研究 |
| 4 ACE2-ANG(1-7)-MAS轴调节炎症反应的信号机制 |
| 4.1 ACE2与NF-κB信号通路 |
| 4.2 ACE2与MAPK信号通路 |
| 结束语 |
| 参考文献 |
| 第二篇 试验研究 |
| 第三章 肾素血管紧张素系统(RAS)两条通路在腹泻保育猪空肠炎症损伤中的表达变化及相互关系 |
| 1 试验材料 |
| 1.1 试验样品 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 仪器设备 |
| 2 试验方法 |
| 2.1 腹泻保育猪空肠组织收集 |
| 2.2 腹泻保育猪空肠组织匀浆中炎性因子含量的检测 |
| 2.3 猪空肠病理组织学切片制作 |
| 2.4 空肠组织中ACE2、Mas基因表达变化 |
| 2.5 猪空肠组织ACE2、Mas表达变化 |
| 2.6 猪空肠组织ACE、AT1达变化 |
| 2.7 猪空肠组织中AngII、Ang(1-7)浓度的含量测定 |
| 2.8 数据分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 腹泻保育猪空肠组织中炎性因子含量 |
| 3.2 空肠组织形态学变化 |
| 3.3 空肠组织中ACE2、Mas受体基因表达水平 |
| 3.4 猪空肠组织中ACE2、Mas表达结果 |
| 3.5 猪空肠组织中ACE、AT1蛋白表达结果 |
| 3.6 腹泻保育猪空肠组织中AngII、Ang(1-7)含量测定结果 |
| 3.7 ACE2/ACE蛋白表达比值分析 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 血管紧张素转化酶2 (ACE2)在猪肠上皮细胞(IPEC-J2)中的表达定位及与细胞炎性损伤的相互关系 |
| 1 试验材料 |
| 1.1 细胞来源 |
| 1.2 试验材料 |
| 1.3 仪器设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 ACE2在猪肠上皮细胞(IPEC-J2)中分布和表达 |
| 2.2 LPS诱导IPEC-J2细胞炎症模型的建立 |
| 2.3 LPS诱导猪肠上皮细胞炎症损伤RAS系统各组分表达变化 |
| 2.4 ACE2抗炎作用验证 |
| 2.5 数据处理 |
| 3 结果 |
| 3.1 猪肠上皮细胞(IPEC-J2) ACE2的蛋白表达和细胞学分布 |
| 3.2 LPS刺激诱导IPEC-J2细胞炎性损伤模型的建立 |
| 3.3 不同浓度LPS刺激IPEC-J2细胞RAS系统各组分表达变化 |
| 3.4 ACE2蛋白与ACE蛋白比分析 |
| 3.5 LPS与炎性因子、RAS两条轴各成员之间相关性分析 |
| 3.6 ACE2抗炎作用验证 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第五章 血管紧张素转化酶2 (ACE2)抵抗LPS诱导猪肠上皮细胞炎性损伤作用的分子机制 |
| 1 材料与仪器设备 |
| 1.1 细胞 |
| 1.2 仪器与设备 |
| 1.3 主要试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 IPEC-J2细胞ACE2基因敲除与炎症之间的关系 |
| 2.2 外源性ACE2对IPEC-J2细胞炎症保护作用 |
| 2.3 IPEC-J2细胞NF-κB和MAPK通路蛋白因子磷酸化水平检测 |
| 2.4 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 IPEC-J2细胞ACE2基因敲除加重炎症发生 |
| 3.2 外源性ACE2对猪IPEC-J2细胞炎性损伤的保护作用 |
| 3.3 细胞中NF-κB和MAPK信号通路主要蛋白因子磷酸化水平检测 |
| 4 讨论 |
| 4.1 IPEC-J2细胞ACE2基因敲除加重炎症反应 |
| 4.2 ACE2对IPEC-J2细胞炎性损伤的保护作用 |
| 4.3 ACE2对IPEC-J2细胞炎性损伤的分子机制 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 攻读硕士学位期间发表论文与学术交流活动 |
| 致谢 |
（8）中药及中药提取物作用于血管紧张素对肝纤维化的影响（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 血管紧张素及其受体 |
| 2 血管紧张素对肝纤维化的作用 |
| 3 中药及中药提取物作用于血管紧张素对肝纤维化的影响 |
| 3.1 中药提取物 |
| 3.2 单味中药及中药复方 |
| 4 展望 |
（9）过表达G蛋白偶联受体Mas的肝星状细胞对人肝癌细胞的作用研究（论文提纲范文）
| 个人简历 |
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一章 Mas和α-SMA在肝癌中的表达研究 |
| 1、材料 |
| 2、方法 |
| 3、结果 |
| 4、讨论 |
| 5、本章小结 |
| 第二章 过表达G蛋白偶联受体Mas的肝星状细胞对肝癌细胞生物学作用及肿瘤形成的影响 |
| 1、材料 |
| 2、方法 |
| 3、结果 |
| 4、讨论 |
| 5、本章小结 |
| 第三章 过表达G蛋白偶联受体的肝星状细胞对肝癌细胞作用机制的初步研究 |
| 1、材料 |
| 2、方法 |
| 3、结果 |
| 4、讨论 |
| 5、本章小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 课题综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位论文期间发表的学术论文 |
（10）RAS对各肝病影响的研究进展（论文提纲范文）
| 1 RAS及其在肝内的表达 |
| 2 RAS与肝病的关系 |
| 2.1 RAS与非酒精性脂肪肝的关系 |
| 2.2 RAS与慢性乙型肝炎的关系 |
| 2.3 RAS与肝纤维化的关系 |
| 2.4 RAS与肝硬化 |
| 2.5 RAS与肝癌的关系 |
| 3 总结 |
| 作者贡献 |
四、肝纤维化形成过程中肾素-血管紧张素系统的变化（论文参考文献）
- [1]非酒精性脂肪性肝病与慢性肾脏病[D]. 林苏. 福建医科大学, 2021(02)
- [2]柴芪益肝方治疗肝纤维化的临床和实验研究[D]. 周怡驰. 北京中医药大学, 2021(01)
- [3]Alamandine通过MrgD受体抑制NOX4诱导自噬减轻肺纤维化[D]. 刘清霞. 南方医科大学, 2021(02)
- [4]血管紧张素Ⅱ在纤维化疾病中的研究进展[J]. 欧亚妹,宋泽庆,刘刚. 海南医学, 2020(11)
- [5]贝那普利对肝纤维化小鼠AngⅡ及TGF-β1、IL-1β、iNOS表达的影响及机制研究[D]. 王翠萍. 青岛大学, 2019(03)
- [6]血管紧张素转化酶2在非酒精性脂肪肝病中的保护作用及其机制[D]. 刘颖. 南京农业大学, 2019(08)
- [7]血管紧张素转化酶2（ACE2）在LPS致猪肠道炎性损伤中的作用及其分子机制[D]. 王凯. 南京农业大学, 2019(08)
- [8]中药及中药提取物作用于血管紧张素对肝纤维化的影响[J]. 聂琨梅,李小蕃,陈美岑,王振常. 世界最新医学信息文摘, 2018(98)
- [9]过表达G蛋白偶联受体Mas的肝星状细胞对人肝癌细胞的作用研究[D]. 廖维芳. 广西医科大学, 2017(01)
- [10]RAS对各肝病影响的研究进展[J]. 孙芳,廖维芳,林文珍. 基因组学与应用生物学, 2017(01)
标签：血管紧张素论文; 血管紧张素转化酶论文; 肝纤维化论文; 贝那普利论文; 健康论文;