一、胎盘表皮生长因子受体的表达改变与胎儿宫内生长迟缓的关系研究（论文文献综述）
王业成[1]（2021）在《父代氰戊菊酯暴露诱发子代宫内生长受限及其机制研究》文中指出目的目前关于孕期和青春期氰戊菊酯暴露对胎儿生长发育影响的研究已经有很多,但是关于父代氰戊菊酯暴露会对子代胎儿宫内生长发育产生何种影响尚未明确。本研究主要探讨父代氰戊菊酯暴露是否会诱发胎儿宫内生长受限以及可能的机制。方法建立父代氰戊菊酯暴露诱发胎鼠宫内生长受限的模型:51只清洁级雄性6周龄ICR小鼠购买于北京维通利华有限公司。在实验开始之前先进行一周的适应性喂养（室内环境温度20～25℃,室内湿度为50%±5%）。所有小鼠均可自由获得清洁的饮食与饮水,饲养间保持12小时昼夜循环节律。将雄性小鼠随机分为3个处理组,每组17只。氰戊菊酯处理组于在出生后第49天（PND49）到PND84,每天在固定时间通过口服管饲法经口灌胃（2.0,20mg/kg氰戊菊酯,溶于玉米油）。对照组在相应天数内给予玉米油灌胃处理,共计灌胃5周。在灌胃5周结束后,立即将雄鼠与未处理的10周龄ICR雌鼠于每晚9点按1:1进行合笼,次日7点～8点检查雌鼠是否有阴栓形成,查到阴栓的雌鼠则记作妊娠第0天（gestational day0,GD0）。所有孕鼠于GD18天使用眼球取血法处死并剖杀。称量子宫连胎重、记录着床数、活胎数、死胎数、吸收胎、胎仔身长与胎重、胎盘重量与直径、有无畸形。免疫印迹检测胎盘中甲基转移酶Dnmt1（DNA methyltransferase 1,Dnmt1）的表达水平。RT-PCR检测胎盘组织中甲基转移酶1（Dnmt1）、甲基转移酶3a（Dnmt3a）、甲基转移酶3b（Dnmt3b）、胰岛素样生长因子（insulin-like growth factor-2,IGF-2）、胰岛素样生长因子受体（insulin-like growth factor-2 receptor,IGF-2r）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、血管内皮生长因子受体（vascular endothelial growth factor receptor,VEGFr）、基质金属蛋白酶9（matrix metallopeptidase 9,MMP9）、基质金属蛋白酶2（matrix metallopeptidase2,MMP2）、父系表达基因3（paternally expressed gene 3,PEG3）父系表达基因10（paternally expressed gene 10,PEG10）、转化生长因子（transforming growth factor-β,TGF-β）、胎盘生长因子（placenta growth factor,PGF）和小核核糖核蛋白多肽N（small nuclear ribonucleoprotein polypeptide N,SNRPN）的m RNA表达水平。结果与对照组相比,处理组雄鼠体重变化、孕鼠体重变化和孕期增重差异无统计学意义（P>0.05）;处理组每窝的着床数、活产数、死产数和吸收胎数差异无统计学意义（P>0.05）;处理组胎鼠体重明显下降（P<0.05）;处理组胎盘直径和重量差异无统计学意义（P>0.05）。进一步分析发现处理组胎仔IUGR发生率相对于对照组也有明显升高（P<0.05）。与对照组相比,处理组胎仔胎盘中血窦面积减少（P<0.05）,胎盘迷路层厚度呈略微下降的趋势,但差异无统计学意义（P>0.05）。免疫印迹试验结果表明,与对照组相比,处理组胎鼠胎盘中甲基转移酶Dnmt1的表达水平上调（P<0.05）。RT-PCR结果表明,处理组胎鼠胎盘中MMP9和VEGF的m RNA表达水平下调（P<0.05）,IGF-2、IGF-2r、MMP2、VEGFr、PEG3、PEG10、PGF、TGF-β、SNRPN的m RNA表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论父代氰戊菊酯暴露可诱发子代胎鼠宫内生长受限,并且可能是通过抑制胎盘细胞增殖,影响到了胎盘的正常功能,进而诱发宫内生长受限。
方琼[2]（2021）在《牛磺酸促进生长受限胎鼠近远期脑发育及机制研究》文中认为背景:胎儿生长受限（FGR）是导致患儿近期和远期神经发育障碍的主要原因之一。FGR脑发育近期损伤表现为脑内神经干细胞（NSC）增殖分化减少,细胞构成比、突触连接异常,脑代谢异常;远期为运动学习障碍,神经行为异常。胎儿NSC分化是脑发育基础,海马是学习认知关键部位。补充牛磺酸激活蛋白激酶A（PKA）-环磷酸腺苷反应结合蛋白（CREB）通路改善FGR胎脑发育,相关机制尚待深入研究;对远期海马神经细胞、代谢功能、突触发育、学习认知影响亦不明确。本研究建立FGR胎鼠NSC模型和幼鼠模型,采用分子生物、脑功能、行为学检测手段,探讨牛磺酸促进FGR胎脑NSC分化机制;研究其保护FGR幼鼠海马神经元,改善代谢水平;增加海马突触素（Syn）表达,促进幼鼠认知发育。方法:全程饥饿法建立FGR胎鼠模型,脑室管膜下区组织解离培养成神经球,分对照组、FGR组、牛磺酸组、H89（PKA抑制剂）组和牛磺酸+H89组。CCK8及细胞计数法检测NSC增殖力;免疫荧光法检测NSC分化神经元和星形胶质细胞;RT-PCR和Western blot（WB）检测分化细胞表达PKA、CREB和脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA及蛋白。建立FGR幼鼠模型,分对照组、FGR组、产前牛磺酸组（FGR孕鼠孕7天后补充至分娩）和生后牛磺酸组（FGR新生鼠生后补充14天）,MRS分析14天幼鼠海马细胞代谢特点;免疫组化和WB法观察海马区神经细胞组成。28天幼鼠行感觉运动能力测试,检测海马区Syn蛋白表达。结果:FGR组胎鼠NSC增殖分化能力低,分化Tuj-1（+）神经元比例低于对照组,GFAP（+）星形胶质细胞比例增高。牛磺酸提高分化NSC表达PKA、CREB、BDNF mRNA和蛋白,增加Tuj-1（+）神经元比例,降低GFAP（+）细胞比例。14天FGR幼鼠海马NAA/Cr和Gln/Cr、NeuN蛋白表达降低,Cho/Cr和mI/Cr、GFAP蛋白表达增高。产前补充牛磺酸,提高FGR幼鼠海马NAA/Cr、NeuN蛋白表达,接近对照组（p>0.05）,生后补充值低于对照组（p<0.05）。产前和生后补充均可降低FGR幼鼠海马Cho/Cr和mI/Cr、GFAP蛋白表达。海马区NAA/Cr与NeuN蛋白、mI/Cr与GFAP蛋白表达成正相关（p<0.05）。FGR组28天幼鼠悬吊、平衡木实验分数及海马区Syn蛋白表达降低,产前补充牛磺酸提高FGR幼鼠测试分及Syn蛋白表达,接近对照组（p>0.05）,生后补充值低于对照组（P<0.05）。功能学测试分数与海马区Syn蛋白表达呈正相关（p<0.05）。结论:牛磺酸激活PKA-CREB-BDNF信号通路促进FGR胎脑NSC增殖分化,改善神经元/胶质细胞比例。产前补充牛磺酸通过提高FGR幼鼠海马神经元/胶质细胞比例,改善海马代谢水平;同时,还能通过增加FGR幼鼠海马区Syn表达,促进突触发育,提高感觉运动能力,促进认知发育。
章恒[3]（2020）在《叶酸水平降低在孕期维生素D缺乏引起子代生命早期生长迟缓中的作用》文中指出母体孕期维生素D状况与胎儿生长发育密切相关,但母体孕期不同阶段维生素D状况与子代生命早期生长迟缓的关联及其机制未完全阐明。因此本课题基于前瞻性出生队列研究,分析母体孕期不同阶段维生素D状况与子代生命早期生长迟缓的关联;分析母体孕期维生素D缺乏对母血叶酸、脐血叶酸和胎盘叶酸转运的影响,并探讨脐血叶酸在母体孕期维生素D缺乏诱发胎儿宫内生长受限中的作用。本研究包括两部分。1.孕期不同阶段维生素D状况与子代生命早期生长迟缓的关联。依托中国国家出生队列平台,纳入2017年3月至2018年12月期间,在无锡市妇幼保健院产检和分娩的1193例母婴单胎为研究对象。在孕期不同阶段（孕早期、孕中期、孕晚期）,采集孕妇外周血和收集问卷信息;在分娩期采集配对的母血和脐血及收集新生儿出生信息,并定期监测婴幼儿期（1月龄、3月龄、6月龄、8月龄、12月龄、18月龄和24月龄）体重、身长、头围和牙萌出数量等指标。采用电化学发光免疫分析法检测孕期不同阶段的母血和脐血血清维生素D[25（OH）D]浓度。按血清[25（OH）D]水平分成维生素D缺乏（<50nmol/L）、不足（50-75 nmol/L）和充足组（≥75 nmol/L）。分析孕期不同阶段的母血和脐血血清维生素D状况和影响因素;分析孕期不同阶段的母血和脐血血清25（OH）D浓度与出生体重、出生身长和出生头围的关联;分析孕期不同阶段的母血和脐血血清维生素D缺乏与早产、低出生体重和小于胎龄儿的发生风险;分析孕期不同阶段的母血和脐血血清维生素D缺乏对胎儿宫内和婴幼儿期生长（体重、身长和头围）的影响;分析孕期不同阶段的母血和脐血血清维生素D缺乏对婴幼儿生长的增长速度和加速度影响。结果显示,孕早期、孕中期和孕晚期的母血及脐血血清25（OH）D浓度分别为42.50、44.80、48.88和55.55（nmol/L）;孕早期、孕中期和孕晚期的母血和脐血血清维生素D缺乏率分别为75.0%、63.5%、62.3%和47.8%;与孕期维生素D未补充组相比,补充组孕早、晚期母血及脐血中25（OH）D浓度分别增加4.58、6.30和6.78 nmol/L;与春季相比,秋季孕早、中和晚期母血维生素D浓度分别增加3.52、9.78和10.67 nmol/L。LOESS曲线拟合分析发现,孕早期和孕晚期的母血及脐血血清25（OH）D浓度与出生体重、出生身长和出生头围均存在线性相关。多元线性回归分析发现,与孕早期和孕晚期的母血及脐血血清维生素D浓度充足组相比,维生素D缺乏组胎儿出生体重分别降低0.18、0.21和0.19 kg;出生身长分别降低0.48、0.82和0.62 cm;出生头围分别降低0.55、0.69和0.45 cm。多元二项式Logistic回归分析发现,与维生素D非缺乏组（≥50 nmol/L）相比,孕晚期母血和脐血维生素D缺乏组（<50 nmol/L）早产发生风险分别增加3.42和6.39倍;孕早、晚期母血和脐血维生素D缺乏组低出生体重发生风险分别增加2.85、6.04和3.46倍;孕早和晚期母血维生素D缺乏组小于胎龄儿发生风险分别增加2.12和2.36倍;重复测量方差分析发现,孕早期和孕晚期的母血及脐血血清维生素D缺乏导致胎儿出生时体重、身长和头围降低和男童婴儿早期生长延迟;潜变量二次增长曲线模型分析发现,孕期不同阶段母血血清低25（OH）D浓度降低子代男童婴幼儿期体重、身长和头围的生长速度,但增加其追赶加速度。2.母体分娩期维生素D缺乏对叶酸水平和胎盘叶酸转运的影响以出生队列中分娩期产妇和胎儿为研究对象,在分娩期采集配对的母血和脐血,同时收集新生儿出生信息,采用电化学发光免疫分析法检测分娩期母血和脐血血清叶酸水平。分析分娩期母血血清维生素D水平与母血及脐血叶酸水平关联;分析分娩期母血血清维生素D水平对母血及脐血叶酸水平影响;分析分娩期母血血清维生素D状况对叶酸胎盘转运效率（脐血/母血叶酸水平比值）的影响;进一步通过动物、细胞和人群实验研究,分析母体维生素D缺乏对胎盘叶酸转运的影响,包括三个实验。实验一,构建孕期维生素D缺乏小鼠模型,分析母体孕期维生素D缺乏对胎盘叶酸转运泵m RNA和蛋白表达水平的影响;实验二,通过体外细胞实验,分析骨化三醇（活性维生素D3）对人胎盘滋养细胞（HTR8/SVneo）叶酸转运泵m RNA表达水平的影响。实验三,分析孕妇分娩期维生素D缺乏对人胎盘叶酸转运体泵m RNA表达水平的影响。分析脐血叶酸在母体分娩期维生素D缺乏致子代宫内生长迟缓的中介效应。队列研究发现,分娩期母血和脐血叶酸平均浓度分别为19.28和31.77（nmol/L）,相关分析发现,分娩期母血维生素D水平与母血叶酸水平（r=0.476,P<0.01）及脐血叶酸水平呈正相关（r=0.338,P<0.05）。单因素方差分析发现,分娩期母血维生素D缺乏降低母血和脐血叶酸水平,但不影响胎盘叶酸转运效率。体内动物实验研究发现,与对照组相比,母体孕期维生素D缺乏对胎盘叶酸转运泵（pcft和rfc-1）m RNA及蛋白表达水平无明显差异。体外细胞实验研究发现,不同时点（12、24、36）h和不同剂量（10、100、500）n M组之间活性D3对HTR8/SVneo细胞叶酸转运泵（PCFT和RFC-1）m RNA表达水平无明显差异。人群实验研究发现,与对照组相比,孕妇分娩期母血血清维生素D缺乏组胎盘叶酸转运泵（PCFT和RFC-1）m RNA表达水平也无明显差异。中介效应模型分析发现,脐血叶酸水平在母体分娩期维生素D缺乏致子代宫内生长迟缓发挥完全中介效应。根据以上实验结果,本研究可得出以下结论:1.孕早期和孕晚期母血及脐血血清维生素D缺乏,不仅降低胎儿宫内生长和增加低出生体重发生风险;而且干扰了男童婴幼儿期生长的速度和追赶加速度。2.母体分娩期血清维生素D水平与母血和脐血叶酸水平正相关;母体分娩期血清维生素D缺乏虽不影响母血叶酸胎盘转运,但降低母血和脐血叶酸水平;母血和脐血叶酸水平降低可能是母体孕期维生素D缺乏诱发胎儿宫内生长迟缓的机制。
刘婷婷[4]（2020）在《大鼠胚胎着床后短暂抑制雌激素对胎盘滋养层细胞功能的影响》文中认为胎盘的形成与滋养层细胞功能密切相关,涉及滋养层细胞的动态分化成熟,功能正常的滋养层细胞具有迁移性和侵入性特性,并具有与母体微环境内细胞的互动能力,对于胎盘的发育成熟不可或缺。雌激素和孕激素对于妊娠的起始、胎盘功能的维持和胎儿的生长发育具有重要作用。雌二醇（E2）、孕酮（P4）及其代谢物通过上调滋养层细胞的增殖、分化和迁移来参与血管生成以及正常的滋养细胞发育和侵袭。低E2水平可能导致滋养层发育和血管生成过程不足,进而可能进一步导致低E2水平,但其具体机制远未阐述清楚。目的:研究胚胎着床后短暂雌激素水平低下对胎盘滋养层细胞影响机制。方法:Wistar雌性大鼠胚胎着床后于GD6.5、GD7.5、GD8.5给予来曲唑0.16 mg/kg/d灌胃,建立了大鼠胚胎着床后雌激素短暂缺乏模型。并于GD10.5、GD13.5、GD16.5和GD19.5四个妊娠时间点收集样本,测量胎盘大小重量,ELISA方法测定血清E2浓度,并对子宫胎盘组织进行组织学观察,采用CK7抗体免疫组织化学方法及糖原染色方法标记滋养层细胞,并利用免疫组织化学染色、qPCR和Western Blot方法检测了胎盘生长因子（Plgf）在GD19.5时胎盘中的表达。大鼠胚胎着床后雌激素短暂缺乏模型单侧输卵管结扎后,使用表达谱芯片技术对实验组妊娠组织特异性差异表达基因进行了筛选和生物信息学分析,验证并选择候选基因Angptl8,利用人滋养层细胞系HTR8-SVneo细胞研究重组ANGPTL8蛋白对细胞增殖、迁移、侵袭的影响,并采用油酸和软脂酸进行了功能补救实验。结果:1.与对照组相比,大鼠胚胎着床后短暂抑制雌激素可导致孕晚期胎盘肥大,在胎盘形成过程中滋养层细胞侵袭能力减弱,大鼠胎盘连接区空泡样糖原细胞出现蓄积,提示孕早期雌激素水平降低可影响滋养层细胞功能。2.大鼠胚胎着床后给予来曲唑短暂抑制雌激素合成可导致孕晚期Plgf表达升高,提示孕早期雌激素水平降低影响孕晚期胎盘功能。3.模型组子宫妊娠组织表达谱芯片特异性差异基因生物信息学分析结果提示着床后短暂抑制雌激素合成后,妊娠相关组织的差异基因主要与代谢功能异常、细胞增殖等功能相关。4.着床后短暂抑制雌激素合成后可导致子宫妊娠组织Angptl8基因和Angptl8蛋白高表达,体外细胞培养中1 nmol/L至8 nmol/L的重组Angptl8蛋白抑制滋养层细胞侵袭功能,回补0.1 mmol/L的油酸和0.1 mmol/L-0.2 mmol/L软脂酸可挽救Angptl8抑制的滋养层细胞侵袭功能。结论:大鼠孕早期短暂雌激素水平低下可以导致胎盘发育异常,滋养层细胞侵袭能力减弱,晚期胎盘组织Plgf表达升高;并可导致子宫妊娠组织Angptl8升高,Angptl8可通过脂代谢途径抑制滋养层细胞侵袭能力。通过解析孕早期雌激素异常波动对胎盘发育的影响,深入了解胎盘发育过程中雌激素的调控作用,为妊娠并发症及临床多种不良妊娠结局的溯源和防治策略提供有力实验理论依据。
马丽娟[5]（2020）在《转录因子TWIST1在子痫前期发病中的作用及其机制研究》文中指出研究背景妊娠期高血压疾病是全世界范围内严重威胁母婴健康的妊娠期并发症,发病率为5%-12%。子痫前期（Preeclampsia,PE）在妊娠20周后发病,临床症状严重的子痫前期为重度子痫前期,妊娠34周之前发病的重度子痫前期称为早发性重度子痫前期（Early Onset Severe Preeclampsia,EOSP）。患者发病越早、病情越重,母儿预后越差。子痫前期的基本病理生理改变表现为患者全身小血管痉挛、血管内皮损伤和器官血液灌流量减少,多脏器出现缺血缺氧性损害,同时胎盘灌注不足可导致胎儿损伤。目前认为,胎盘浅着床是子痫前期发病的基础,导致胎盘长期缺血、氧化应激,释放异常胎盘因子进入母体血液循环,诱发子痫前期。有研究证实,EOSP是与胎盘发育缺陷关系最为密切的子痫前期类型。胎盘滋养细胞是胎盘向子宫内膜和肌层浸润的执行者,因此探索调控滋养细胞活性和功能的因素及其干预手段,是阐明子痫前期发病机制及指导其防治的关键点。TWIST1在多种人体组织和肿瘤中有调节细胞分化、抑制凋亡和增强侵袭等作用。TWIST1在胎盘滋养细胞中广泛表达,并且其表达量呈现孕周依赖性增加。文献报道TWIST1有促进滋养细胞分化和侵袭的能力,因此我们推测其可能在妊娠期胎盘相关性疾病--子痫前期的发病中有重要的作用,但两者之间的相关性需要进一步证实。此外,TWIST1是否对介导滋养细胞的凋亡发挥作用也尚未明确。低分子肝素（Low Molecular Weight Heparin,LMWH）和阿司匹林（Aspirin）是目前临床上公认有效的降低子痫前期发病风险的药物,有研究表明LMWHH和Aspirin可以直接调节滋养细胞的活性和功能,但作用机制未明。第一部分EOSP患者与体外缺氧模型中滋养细胞凋亡率及TWIST1表达背景及目的:在妊娠早期,胎盘滋养细胞处于生理性缺氧状态,随后滋养细胞逐渐浸润至子宫内膜直至肌层的内1/3,并进入子宫螺旋小动脉管腔取代血管内皮,导致管腔增大、弹性增加。胎盘的绒毛面积逐渐扩大,子宫-胎盘的血流供应阻力降低、血容量增加,胎盘滋养细胞的缺氧状态得到纠正。胎盘滋养细胞凋亡率增加和侵袭能力下降会引起胎盘浸润不足和子宫血管重铸障碍,导致胎盘供血不足和滋养细胞氧化应激,最终导致子痫前期的发生。TWIST1促进滋养细胞分化和侵袭的作用已被证实,但其在子痫前期患者滋养细胞中的表达情况未见报道。在第一部分中,首先对EOSP患者和匹配孕周非高血压孕妇分娩的新生儿重量、评分以及胎盘重量进行比较,并检测两组间胎盘TWISTI的表达和滋养细胞凋亡率的差异,然后在体外模拟妊娠早期和子痫前期患者胎盘滋养细胞的缺氧状态,检测TWIST1表达和细胞凋亡率的变化。方法:1.采用回顾性研究,对2016.12-2018.10年间分娩的27例EOSP患者与31例孕周相匹配的非高血压孕妇分娩的新生儿体重、Apgar评分和胎盘重量的差异进行统计分析。2.利用Western blot、PCR和免疫组化检测EOSP患者和孕周相匹配的非高血压孕妇胎盘中TWIST1的表达;利用Tunel染色和Western blot检测两组间胎盘滋养细胞的凋亡情况。3.在体外缺氧模型中,利用Western blot检测滋养细胞TWIST1的表达;利用Hoechst 33258染色和Annexin V检测细胞增殖和凋亡的情况。结果:1.与同孕期分娩的非高血压孕妇相比,EOSP患者分娩的新生儿体重、Apgar评分及胎盘重量明显降低。2.与同孕期分娩的非高血压孕妇相比,EOSP患者胎盘中TWIST1表达降低,滋养细胞凋亡率增加;3.缺氧可导致体外培养的滋养细胞TWIST1表达降低、细胞凋亡率升高,而且呈现时间依赖性。结论:EOSP患者的新生儿不良结局发生率高;胎盘滋养细胞TWIST1表达降低与细胞凋亡率升高及EOSP发病具有正相关性。第二部分TWIST1在缺氧滋养细胞中的作用背景及目的:在女性生殖功能中,TWIST1有调节子宫基质细胞蜕膜化、胚胎发育和器官分化的作用。胎盘的发育和肿瘤的生长在诸多方面有极其相似的特点,因此可以推测TWIST1对肿瘤细胞凋亡的调控机制也作用于滋养细胞中。在本章中,着眼于缺氧引起的滋养细胞活性和功能的改变,通过调节TWIST1的表达,检测缺氧滋养细胞增殖、凋亡、侵袭、血管生成能力等方面的变化,从而深入探讨TWIST1在胎盘发育和子痫前期发病机制中的作用。方法:1.通过转染过表达TWIST1的质粒获得过表达TWIST1的细胞株,借助慢病毒载体获得干扰TWIST1表达的稳定细胞株,并对上述细胞株进行缺氧培养。2.利用 Edu 染色、Hochst33342 染色、Annexin V 和 Western blot 检测缺氧模型中TWIST1过//低表达对滋养细胞增殖、凋亡、凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9）和侵袭相关蛋白（MMP-2、MMP-9）表达的作用。3.利用平板克隆、Transwell、血管形成实验检测缺氧模型中TWIST1过/低表达对滋养细胞克隆形成能力、细胞迁移和侵袭以及血管生成能力的作用。4.利用流式细胞术检测缺氧模型中TWIST1过/低表达对滋养细胞ROS和线粒体膜电位的作用。结果:1.过表达TWIST1抑制缺氧引起滋养细胞的凋亡,促进细胞增殖,凋亡相关蛋白也发生相应变化;而低表达TWIST1则促进细胞的凋亡、抑制细胞的增殖。2.过表达TWIST1可以逆转缺氧导致的滋养细胞克隆形成、血管生成能力、细胞迁移和侵袭能力的降低,伴随着侵袭相关蛋白表达的升高;而低表达TWIST1则进一步加剧缺氧导致的滋养细胞侵袭能力的降低。3.过表达TWIST1降低缺氧滋养细胞的活性氧簇（Reactive Oxygen Species,ROS）水平,提高细胞线粒体膜电位;而低表达TWIST1进一步加剧缺氧导致的滋养细胞ROS增加和线粒体膜电位下降。结论:TWIST1参与缺氧状态下滋养细胞的增殖、凋亡、血管形成、细胞迁移能力的调节,抑制细胞凋亡,促进细胞侵袭。第三部分 凋亡激活剂/抑制剂对TWIST1调节缺氧滋养细胞凋亡的影响背景及目的:细胞凋亡是基因控制的细胞自主有序的死亡,目前已确定的是线粒体途径、死亡受体途径和内质网途径三条通路,其中线粒体途径是哺乳动物中最重要的凋亡通路。线粒体途径激活后,线粒体膜电位和凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax比降低,进而启动Caspase家族级联反应,导致凋亡。Caspase-9是线粒体凋亡途径中承上启下的关键因子,而Caspase-3是三条凋亡通路的共同底物,是细胞凋亡的执行者。我们之前的研究证实,TWIST1可以调节缺氧滋养细胞的凋亡,同时伴随着线粒体途径中凋亡相关蛋白和线粒体膜电位的变化,提示TWIST1可能影响滋养细胞的线粒体凋亡途径。在本章中,通过在缺氧滋养细胞模型中分别加入Caspase-3的激活剂以及Caspase-9的激活剂/抑制剂,进一步探讨TWIST1调节滋养细胞凋亡的作用机制。方法:1.在缺氧滋养细胞模型中过表达TWIST1,并加入Caspase-3的激活剂（PAC-1）、Caspase-9 的激活剂（YC137）或抑制剂（Z-LEHD-FMK）,利用 Hoechst染色和Annexin V检测细胞凋亡的情况。2.利用Western blot检测加入Caspase-3的激活剂、Caspase-9的激活剂或抑制剂后的缺氧滋养细胞中线粒体凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9）和侵袭相关蛋白（MMP-2、MMP-9）的表达。结果:1.过表达TWIST1抑制了缺氧导致的滋养细胞凋亡,加入Caspase-3和Caspase-9激活剂均可逆转TWIST1对细胞凋亡的保护性作用,而加入Caspase-9抑制剂则增强了 TWIST1抑制凋亡的作用。2.过表达TWIST1抑制了缺氧对滋养细胞凋亡相关蛋白和侵袭相关蛋白表达的影响,加入Caspase-3和Caspase-9激活剂后逆转了其作用效果,而加入Caspase-9抑制剂后增强了其作用效果。结论:TWIST1通过介导线粒体凋亡途径发挥调节缺氧滋养细胞凋亡的作用。第四部分TWIST1调节Aspirin和LMWH影响滋养细胞活性和功能的机制背景及目的:Aspirin和LMWH降低子痫前期发病风险的作用已得到公认。研究证实,除通过发挥抗凝作用改善胎盘循环外,Aspirin和LMWH也可直接作用于胎盘滋养细胞,调节其活性和功能,但其作用机制尚未完全明确。在本章中,在缺氧培养的滋养细胞中加入Aspirin和LMWH,探讨药物对滋养细胞凋亡和侵袭功能的影响;此外,通过干扰TWIST1的表达进一步探讨Aspirin和LMWH对滋养细胞发挥作用的机制。方法:1.用不同剂量Aspirin和LMWH处理缺氧滋养细胞,利用Annexin V检测细胞凋亡率的变化,选择对细胞凋亡影响最明显且浓度最低的药物剂量。2.利用Edu染色、transwell检测Aspirin和LMWH对缺氧滋养细胞增殖和侵袭能力的影响;利用Real-time PCR、Western blot和免疫荧光检测Aspirin和LMWH对缺氧滋养细胞TWIST1表达、凋亡相关蛋白表达和侵袭相关蛋白表达的影响;利用流式细胞术检测Aspirin和LMWH对缺氧滋养细胞ROS和线粒体膜电位的影响。3.在缺氧滋养细胞模型中低表达TWIST1,利用Edu染色、Annexin V、Transwell和Western blot检测Aspirin和LMWH对滋养细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响;利用流式细胞术检测干扰TWIST1表达后Aspirin和LMWH对缺氧滋养细胞ROS和线粒体膜电位的影响。结果:1.Aspirin和LMWH降低缺氧滋养细胞的凋亡率,增加其增殖和侵袭能力;Aspirin和LMWH逆转缺氧导致的TWIST1表达、凋亡和侵袭相关蛋白变化;Aspirin和LMWH逆转缺氧引起的滋养细胞ROS升高和线粒体膜电位下降。2.低表达TWIST1逆转Aspirin和LMWH对缺氧滋养细胞增殖、迁移和凋亡的保护性作用,削弱Aspirin和LMWH对缺氧滋养细胞ROS和线粒体膜电位的影响。结论:Aspirin和LMWH可以通过促进TWIST1的表达抑制缺氧滋养细胞的凋亡,促进细胞侵袭,在胎盘发育和子宫血管重铸过程中发挥保护性作用。这一机制的明确为Aspirin和LMWH用于子痫前期的早期预防提供了理论依据。小结在本论文中,首先通过比较EOSP患者与非高血压孕妇分娩的新生儿结局和胎盘重量的差异,以及两组孕妇胎盘TWIST1表达及细胞凋亡率的差异,发现EOSP患者胎儿预后不良,胎盘滋养细胞TWIST1表达降低和细胞凋亡率增加。然后,模拟妊娠早期及子痫前期患者滋养细胞的缺氧状态,建立细胞模型,研究TWIST1对滋养细胞凋亡和侵袭浸润功能的影响,并深入探讨其调节滋养细胞凋亡的机制,发现TWIST1可以通过介导线粒体凋亡途径降低缺氧导致的细胞凋亡,并促进细胞侵袭。最后,在缺氧培养的滋养细胞中加入Aspirin和LMWH,检测细胞活性和功能的变化,并通过干扰TWIST1的表达探讨药物的作用机制,发现Aspirin和LMWH可以通过促进TWIST1的表达降低滋养细胞的凋亡,增强其侵袭能力。
梁卫桃[6]（2020）在《PI3K/AKT信号通路在IGF-1调控滋养层细胞分泌β-hCG和孕酮中的作用研究》文中研究指明目的:通过检测血清β-人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin-β,β-hCG）、孕酮和胰岛素样生长因子1（Insulin-like growth factor-1,IGF-1）含量,绒毛组织IGF-1、IGF-1R、PI3K/AKT信号通路以及细胞凋亡相关因子的基因和蛋白表达水平,探讨稽留流产的发生机制。方法:从2018年5月1日-2019年4月30日收集的兰州市妇幼保健院和静宁县妇幼保健院稽留流产者和因意外妊娠行人工流产术终止妊娠的正常早孕者的标本库中,选取无职业病有害因素暴露史,同年龄组、同孕周的12对研究对象的血清和绒毛组织进行指标检测分析。（1）采用放射免疫法检测血清β-hCG和孕酮水平;（2）采用ELISA法检测血清IGF-1水平;（3）采用HE染色法观察绒毛组织病理形态;（4）采用qRT-PCR检测绒毛组织中IGF-1、IGF-1R和PI3K/AKT信号通路相关基因PI3K、AKT mRNA表达水平以及细胞凋亡相关基因Bad、Bax、Bcl-2、Cyt c、Caspase 3 mRNA表达水平;（5）采用Wes技术检测绒毛组织中IGF-1、IGF-1R和PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT表达水平以及细胞凋亡蛋白Bad、p-Bad、Bax、Bcl-2、Cyt c、Caspase 3表达水平。结果:（1）血清β-hCG和孕酮水平:与正常早孕组比较,稽留流产组血清β-hCG和孕酮水平降低（P<0.05）;（2）血清IGF-1水平:稽留流产组血清IGF-1水平低于正常早孕组（P<0.05）;（3）血清IGF-1水平与β-hCG、孕酮的相关性:在正常早孕组,IGF-1与β-hCG水平呈正相关（r=0.735,P<0.01）;在稽留流产组,IGF-1与β-hCG水平呈正相关（r=0.646,P<0.05）,IGF-1与孕酮水平也呈正相关（r=0.588,P<0.05）;（4）绒毛组织病理形态:光镜下可见稽留流产组绒毛组织细胞数量减少,内层的细胞滋养细胞和外层的合体滋养细胞均明显减少,合体滋养细胞层变薄,细胞排列间断,绒毛管腔变小甚至无明显管腔;（5）绒毛组织IGF-1和IGF-1R检测结果:与正常早孕组比较,稽留流产组绒毛组织中IGF-1和IGF-1R mRNA表达水平降低（P<0.05）,稽留流产组绒毛组织中IGF-1蛋白表达水平降低（P<0.05）;（6）PI3K/AKT信号通路检测结果:与正常早孕组比较,稽留流产组绒毛组织中PI3K和AKT mRNA表达水平降低（P<0.05）;与正常早孕组比较,稽留流产组绒毛组织中PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达水平降低（P<0.05）,p-AKT/AKT比值降低（P<0.05）;（7）细胞凋亡相关因子检测结果:与正常早孕组比较,稽留流产组绒毛组织中Bcl-2 mRNA表达水平降低（P<0.05）,Bax、Bad、Cyt c和Caspase 3 mRNA表达水平升高（P<0.05）,Bax/Bcl-2比值升高（P<0.05）;与正常早孕组比较,稽留流产组绒毛组织中Bcl-2和pBad蛋白表达水平降低（P<0.05）,Bad、Cyt c、Caspase 3蛋白表达水平升高（P<0.05）,p-Bad/Bad比值降低（P<0.05）,Bax/Bcl-2比值升高（P<0.05）。结论:稽留流产者血清和绒毛组织中,IGF-1表达水平降低,可能会抑制PI3K/AKT信号通路,激活线粒体凋亡途径,引起滋养细胞凋亡增加,使其分泌β-hCG和孕酮的功能降低,可能是导致胎儿生长发育停止的重要机制。
温弘[7]（2019）在《胎盘源性miRNA在选择性生长受限中的作用和机制研究》文中研究表明选择性宫内生长受限（selective intrauterine growth restriction,sIUGR）是单绒毛膜双羊膜囊的特有并发症,在单绒双胎中发生率约10%～15%[1]。目前公认的诊断标准为小胎儿体重小于生长曲线的第10百分位及双胎估计体重（estimated fetal weight,EFW）相差>25%[2]。sIUGR常伴发胎儿神经系统损伤,容易发生胎儿宫内死亡,对围产儿的预后造成严重威胁。随着对基础研究的逐步深入,对sIUGR的基础研究关注点也深入到分子机制。针对sIUGR的发病已经衍生出诸如胎盘份额不均及脐带插入异常[3,4]、胎盘血管吻合异常[5]、氧化应激[6]、表观遗传修饰[7]等多种假说。尽管已有一些理论和假设被提出和论证,然而sIUGR确切的发病机制至今仍不明确。miRNA是一类真核生物内源性小分子单链RNA,通过与靶m RNA特异性的碱基配对引起靶m RNA的降解或者抑制其翻译,从而对基因转录后表达进行调控[8]。大约30%的人类基因表达可能受miRNA调控,参与细胞增殖、分化、代谢和凋亡等在内的所有生命过程。功能学研究表明,miRNA在调节胎盘发育和功能发挥中起重要作用,近些年来多项研究结果显示,在多种妊娠相关疾病如子痫前期、胎儿生长受限、早产等,都发现了相应异常表达的miRNA[9-11],这些miRNA的异常表达与疾病的发生、发展、预后等相关。选择性宫内生长受限的病因中胎盘发育不一致是其主要因素,胎盘发育与滋养细胞对子宫蜕膜的侵袭密切相关,滋养细胞的增殖、侵袭和迁徙等生物学行为,与恶性肿瘤相似。我们发现,与正常的单绒毛膜双羊膜双胎相比,sIUGR两个胎儿的14种胎盘源性miRNA有差异表达,提示这些miRNA可能参与sIUGR的发生过程,然而其具体发病机制尚不明确。miR-338-5p是近年来研究发现的一类调节细胞生长,分化,与肿瘤发生有密切联系的miRNA。研究证实在多种恶性肿瘤组织中有异常表达的miRNAs,进而影响了肿瘤细胞在增殖、侵袭、转移等生物学行为方面的异常[12]。我们发现miR-338-5p在sIUGR大胎儿的胎盘组织中的表达显着低于小胎儿胎盘组织,推测miR-338-5p的异常表达有可能影响滋养细胞的生长过程,进而参与了sIUGR发病的相关机制。本研究的目的是检测sIUGR及正常单绒毛膜双羊膜囊双胎的胎盘组织中的miRNA的表达,建立胎盘源性miRNA表达谱。同时在HTR-8/SVneo细胞中研究miR-338-5p异常表达对滋养细胞的增殖、侵袭和迁徙的影响,并进一步探索miR-338-5p参与调控滋养细胞的分子机制在sIUGR发生发展中的作用。第一部分建立选择性生长受限胎儿的胎盘源性miRNA表达谱目的:通过对sIUGR及正常单绒毛膜双羊膜囊双胎的胎儿胎盘组织进行基因测序,比较其差异,建立sIUGR胎盘源性miRNA表达谱。方法:用miRNA芯片检测sIUGR胎儿及正常单绒毛膜双羊膜囊双胎不同体质量的胎儿的胎盘组织,比较sIUGR胎儿和正常单绒双羊胎儿的胎盘组织miRNA表达差异,建立sIUGR胎盘源性miRNA表达谱。结果:1.通过对miRNA芯片结果进行聚类分析,发现sIUGR不同体质量胎儿的胎盘组织中有45种miRNA差异表达显着（p<0.05）。2.对sIUGR与正常MCDA不同体质量胎儿的胎盘差异miRNA聚类分析比较,在sIUGR胎盘差异miRNA中分别有7种表达上调的miRNA和7种表达下调的miRNA为其特有。结论:sIUGR不同体质量胎儿的胎盘组织之间存在差异表达miRNA,这些胎盘源性miRNA与sIUGR的发生发展可能相关。第二部分选择性生长受限胎盘源性的差异表达miRNA的生物信息学研究及PCR验证目的:根据基因芯片结果,构建sIUGR胎盘源性miRNA与靶基因的调控网络,并对sIUGR胎盘组织的miRNA表达谱进行PCR验证。方法:基于miRNA芯片结果,通过Gene Spring软件进行靶基因预测,筛选后通过DAVID数据库进行靶基因功能富集分析和信号转导通路富集分析,通过Cytoscape软件构建miRNA通路网络和信号通路网络。收集15例sIUGR和15例正常单绒双胎的胎盘组织进行分析,提取胎盘组织miRNA,通过Real Time-PCR技术对miR-5189-5p、miRNA-1、miR-370-3p、miR-373-3p、miR-338-5p、miR-590-5p的表达进行检测,验证芯片的预测结果。结果:1.在sIUGR组大体质量胎儿的胎盘组织中,上调的胎盘源性miRNA的靶基因有712个,下调的miRNA靶基因有929个。2.对14个miRNA的靶基因进一步做GO和Pathway分析,发现7个上调的miRNA涉及101条信号通路,而7个下调的miRNA涉及49条信号通路。3.核心miRNA涉及的核心信号通路有MAPK信号通路、TGF-β信号通路、Wnt信号通路和HTLV感染通路。4.sIUGR的大体质量胎儿胎盘组织PCR验证发现,miR-5189-5p、miR-1、miR-370-3p表达上调;而miR-373-3p、miR-338-5p、miR-590-5p表达下调,差异具有显着性（p<0.05）,与miRNA的芯片检测结果相符。5.涉及信号通路较多的前5位miRNA在大体质量胎儿的胎盘中均表现为下调。结论:1.sIUGR胎盘源性miRNA涉及多个信号通路,其核心通路有MAPK信号通路、TGF-β信号通路、Wnt信号通路和HTLV感染通路。2.miR-338-5p可能与sIUGR致病相关。第三部分miR-338-5p对HTR-8/SVneo滋养细胞增殖、侵袭和迁移的影响目的:探讨miR-338-5p对HTR-8/SVneo滋养细胞增殖、侵袭和迁移能力的改变。方法:培养HTR-8/SVneo细胞,使用miRNA-338-5p inhibitor转染,抑制miR-338-5p的表达,q RT-PCR检测鉴定干扰效价。用CCK-8法检测miR-338-5p抑制后滋养细胞增殖情况,Transwell法检测滋养细胞侵袭能力,划痕实验检查细胞迁徙能力的改变。结果:1.miR-338-5p inhibitor转染HTR-8/SVneo滋养细胞,48h后用q RT-PCR检测miR-338-5p的表达量显着下调（p<0.0001）。3.CCK-8检测转染miR-338-5p inhibitor 72h后HTR-8/SVneo滋养细胞增殖能力显着升高（p<0.01）。4.Transwell结果显示转染miR-338-5p inhibitor 48h后HTR-8/SVneo滋养细胞的侵袭增强（p<0.01）。5.划痕实验结果显示转染miR-338-5p inhibitor 48h后HTR-8/SVneo滋养细胞的迁移能力增强（p<0.0001）。结论:miR-338-5p降表达后HTR8/SVneo细胞增殖、侵袭与迁移能力增强。第四部分miR-338-5p在sIUGR中靶向抑制EFEMP1的表达目的:预测和识别miR-338-5p在sIUGR中调控的靶基因。研究在miR-338-5p在HTR-8/SVneo细胞中对EFEMP1的调控。方法:1.通过q RT-PCR、免疫组化及Western-blot检测在sIUGR胎盘组织中miR-338-5p与EFEMP1的表达。2.通过荧光素酶报告基因实验检测EFEMP1是否为miR-338-5p的靶基因。3.通过RT-PCR和western-blot分析HTR-8/SVneo细胞转染miR-338-5p inhibitor 48h后EFEMP1表达的改变。结果1.在sIUGR胎盘组织中,miR-338-5p与EFEMP1表达呈负相关。2.miR-338-5p能够显着的抑制野生型报告基因载体EFEMP1-3’UTR-psiCHECK2的荧光素酶活性,而对突变型报告基因载体Mut-EFEMP1-3’UTR-psiCHECK2的荧光素酶活性没有影响（p<0.01）。3.与阴性对照相比,转染miR-338-5p inhibitor后,滋养细胞的EFEMP1的表达增加（p<0.001）。结论:1.与小体质量的胎儿胎盘组织相比,sIUGR的大体质量胎儿的胎盘组织中miR-338-5p表达下调,而EFEMP1表达增加。2.在HTR-8/SVneo细胞中降表达miR-338-5p后,细胞的EFEMP1的表达上调。3.EFEMP1是miR-338-5p的靶基因之一。
何进田[8]（2019）在《姜黄素对IUGR断奶仔猪肝脏功能的调节作用及相关机制研究》文中进行了进一步梳理宫内发育迟缓（intra-uterinegrowthretardation,以下简称IUGR）通常指胎儿在母体子宫内未达到遗传学上的生长潜能,机体或其器官生长发育受阻,具体表现为低初生重、短体围或体长等。在动物生产上,IUGR有较高的发生率,低初生重新生动物约占到10%。引起IUGR的原因复杂而多样,甚至是由多种原因综合导致。IUGR对动物生产最直观的影响是低初生重、早期高死亡率和高发病率,断奶后饲料利用率较低、生长缓慢、易患病等,最终导致高死亡率和低饲料报酬。因此,对出生后的IUGR动物采取营养调控措施十分必要。姜黄素,是一种天然植物多酚,具有促进生长、提高抗氧化能力和缓解机体损伤与营养物质代谢异常的广泛作用。然而,迄今有关姜黄素在IUGR动物上的研究报道还较少,对其发挥生物学功能的机制研究更是缺乏。为此,本研究探讨了 IUGR对新生仔猪血液细胞因子和肝脏结构、抗氧化功能及糖脂代谢等的影响,并在IUGR断奶仔猪日粮中添加400 mg/kg姜黄素来探究其对IUGR生长发育、抗氧化功能和糖脂代谢的调节作用,进一步通过人工构建IUGR鼠模型来对姜黄素在IUGR上发挥作用的具体机制进行深入研究。1 IUGR对新生仔猪血液细胞因子和肝脏炎症、抗氧化及糖脂代谢的影响试验一各选取正常初生重（normal birth weight,NBW）和IUGR新生仔猪8头,所有新生仔猪均未采食初乳,在出生后1 h内屠宰取样,公母各半。测定血清细胞因子和免疫球蛋白水平以及肝脏组织形态、内部结构、抗氧化酶活性和糖脂代谢等指标。结果表明:与NBW组相比,（1）IUGR对新生仔猪肝脏造成一定程度的损伤,影响内部结构。（2）IUGR组血清TNF-α（P<0.05）和ALT水平（P<0.01）显着上升（P<0.05）。（3）IUGR组肝脏AST、ALT、MDA以及GSSG:GSH 比值均显着升高（P<0.05）,而IUGR组肝脏TAOC、GSH-Px和GR水平均显着下降（P<0.05）。（4）IUGR组血清胰岛素（P=0.05）、乳酸（P<0.01）和HOMA-IR（P<0.01）均显着升高,血清TC水平极显着下降（P<0.01）。（5）IUGR 组肝脏 TC、TG、NEFA、LDH、HK、LPL水平均显着升高（P<0.05）,肝脏丙酮酸含量则出现了显着下降（P<0.05）。由此可见,IUGR会对新生仔猪肝脏形态结构造成损伤,并且会影响机体免疫球蛋白和细胞因子的分泌。IUGR新生仔猪肝脏会出现抗氧化能力的下降和脂代谢调节异常,故对其出生后进行营养调控十分有必要。2 姜黄素对IUGR断奶仔猪生长发育和抗氧化功能的影响试验二各选取20头NBW和IUGR新生仔猪,26日龄时断奶,NBW仔猪分为NBW组（基础日粮）和NC组（基础日粮+400mg/kg姜黄素）,同样IUGR仔猪分为IUGR组（基础日粮）和IC组（基础日粮+400mg/kg姜黄素）。饲喂至50日龄,每组选择体重接近8头仔猪屠宰取样,公母各半,宰前空腹过夜。测定各组生长性能、器官指数、血清生化指标、血清和肝脏抗氧化指标、肝脏抗氧化基因mRNA表达。结果表明:与NBW组相比,（1）IUGR仔猪在哺乳期间体重均较低,其中在第1、14和26 d体重显着下降（P<0.05）。在7-14 d和0-26 dIUGR哺乳仔猪日均增重均显着低于NBW组（P<0.05）。（2）IUGR组断奶仔猪50日龄体重以及平均日增重均显着降低（P<0.01）,IUGR组日均采食量显着降低（P<0.05）,而姜黄素能显着提高IUGR断奶仔猪的日均采食量（P<0.05）。并且,姜黄素能显着降低NBW组断奶仔猪的料重比（P<0.05）。（3）IUGR组肝脏、肾脏和胰腺重量极显着降低（P<0.01）,且IUGR组脾脏指数和胰腺指数显着下降（P<0.05）。姜黄素显着提高了 IUGR断奶仔猪的肾脏重量和脾脏指数（P<0.05）,NC组肝脏重量、胰腺重量和肝脏指数显着降低（P<0.05）。（4）IUGR组血清尿素氮、肌酐、总蛋白和白蛋白水平均显着降低（P<0.05）,而IUGR组血清总胆红素水平显着上升（P<0.05）;NC组血清尿素氮、肌酐和总蛋白水平显着下降（P<0.05）,而总胆红素水平显着升高（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组血清尿素氮水平显着升高（P<0.05）。（5）IUGR组血清CAT、TAOC和GSH-Px水平均显着下降（P<0.05）,且IUGR组肝脏MDA、H2O2和CAT水平均显着上升（P<0.05）和GSH-Px活性显着下降（P<0.05）。日粮添加姜黄素能显着降低血清和肝脏MDA含量以及肝脏H2O2和CAT水平（P<0.05）;能显着升高（P<0.05）血清CAT、TAOC和GR水平以及肝脏TAOC和GSH-Px水平。（6）IUGR组肝脏Nfe2l2、Hmox1、Cat mRNA表达水平均出现了显着下降（P<0.05）,且他们在IC组均被显着上调（P<0.05）。（7）IUGR组Nrf2和Homx1蛋白表达水平均显着下降（P<0.05）。日粮添加姜黄素显着上调了 IUGR断奶仔猪肝脏Nrf2和Homx1蛋白表达水平（P<0.05）。由此可见,姜黄素对促进IUGR断奶仔猪生长发育具有一定的积极作用,能通过Nrf2/ARE通路关键蛋白和相关基因的表达来提高肝脏抗氧化能力。3 姜黄素对IUGR断奶仔猪肝脏损伤和糖脂代谢的影响试验三设计同试验二。测定血清细胞因子、肝脏结构与功能、血清激素、血清和肝脏糖脂代谢指标与其相关基因mRNA表达。结果表明:与NBW组相比,（1）IUGR组血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平显着升高（P<0.05）。日粮添加姜黄素显着降低了血清TNF-α和IL-1β水平（P<0.05）。（2）NBW、NC和IC组肝脏内部结构未见异常。而IUGR组肝脏线粒体有部分呈现椭圆形,线粒体存在部分空泡现象,内质网分布密度较低且存在轻度肿胀现象。（3）IUGR组血清和肝脏ALT活性均显着上升（P<0.05）以及肝脏AST活性显着下将（P<0.05）;NC组血清AST和ALT活性均显着上升（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组血清ALT和肝脏AST与ALT均有下将的趋势（P>0.05）,而IC组血清AST活性却显着上升（P<0.05）。（4）IUGR组血清胰岛素水平和HOMA-IR值显着升高（P<0.05）。日粮添加姜黄素能显着降低血清胰岛素、葡萄糖和HOMA-IR值（P<0.05）,显着提高IUGR断奶仔猪血清瘦素水平（P<0.05）。（5）IUGR组血清HDL-C水平显着上升（P<0.05）,而NEFA水平显着下降（P<0.05）;NC组血清HDL-C显着升高（P<0.05）而血清NEFA水平显着下降（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组血清NEFA水平显着升高（P<0.05）而血清HDL-C显着下降（P<0.05）。（6）IUGR组肝脏糖原含量显着下降（P<0.05）以及LDH、LPL、HL和TL活性显着降低（P<0.05）,IUGR组肝脏乳酸、TC、TG和NEFA含量显着上升（P<0.05）且PK活性显着升高（P<0.05）。IC组肝脏糖原含量以及HL、TL活性较IUGR组显着升高（P<0.05）,IC组肝脏丙酮酸、TC、TG、NEFA含量和PK活性显着下降（P<0.05）。NC组肝脏糖原和乳酸含量以及PK、LPL、TL活性显着上升（P<0.05）,NC组丙酮酸、TG、NEFA含量以及LDH、HL活性显着下降（P<0.05）。（7）IUGR组肝脏Irs1、Pik3c3、Gsk3a、Fabp1和Srebp mRNA表达水平显着上调（P<0.05）,IUGR组肝脏Gys2、Lxr和Ppara mRNA表达水平显着下调（P<0.05）;NC组肝脏Akt2、Fasn和Cd36 mRNA表达水平显着下调（P<0.05）,肝脏Gsk3a、Lxr和PparamRNA表达水平显着上调（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组肝脏Irs1、Pik3c3、Gsk3a、Fasn、Cd36、Scd1 和 Srebp mRNA 表达水平显着下调（P<0.05）,IC组肝脏Gys2、Lxr和para mRNA表达水平显着上调（P<0.05）。由此可见,姜黄素能通过调节基因的表达来促进IUGR断奶仔猪肝脏糖原的合成和脂肪酸氧化,并提高肝脏脂质分解酶活性来缓解糖脂代谢异常。4 基于大鼠模型研究姜黄素对IUGR肝脏损伤和抗氧化功能的调节作用试验四采用妊娠期日粮限饲的方法构建IUGR大鼠模型,在6周龄时按照初生重分别将NBW鼠分为NBW组（正常日粮）和NC组（正常日粮+400mg/kg姜黄素）,同样将IUGR鼠分为IUGR组（正常日粮）和IC组（正常日粮+400 mg/kg姜黄素）。饲喂至12周龄,屠宰取样,每组6只。测定各组血清细胞因子、肝脏脂质过氧化、蛋白质和DNA损伤水平、血清和肝脏抗氧化酶活性、肝脏细胞因子和抗氧化相关基因mRNA表达水平以及肝脏IκBα、NF-κB、JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平。结果表明:与NBW组相比,（1）IUGR新生鼠初生重极显着降低（P<0.01）。在3、4、5、6周龄时,IUGR鼠体重均低于NBW组（P>0.05;P>0.05;P>0.05;P<0.01）。与NBW和IUGR组对比,姜黄素能分别提高NC和IC组在第10周（P>0.05;P>0.05）和第11周（P>0.05;P>0.05）体重。（2）IUGR组心脏、肝脏、脾脏、肾脏和体重均显着降低（P<0.05）。日粮添加400 mg/kg姜黄素能显着降低肝脏重量及其指数（P<0.05）,显着提高脾脏重量及其指数（P<0.05）。（3）IUGR组血清TNF-α IL-1β和IL-6含量显着升高（P<0.05）。姜黄素能降低血清TNF-α（P>0.05）、IL-1β（P<0.05）和IL-6（P<0.05）含量。（4）IUGR组血清AST、ALT活性显着升高（P<0.05）。姜黄素能显着降低血清ALT活性（P<0.01）和IUGR组血清AST活性（P<0.05）。（5）IUGR组肝脏MDA、PC、8-OHDG含量均显着升高（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组肝脏MDA、PC、8-OHDG含量显着降低（P<0.05）。（6）IUGR组血清中GSH含量和GSH-Px活性（P<0.01）与肝脏SOD、GR、GSH-Px活性（P<0.05）均显着降低,而GSSG浓度（P<0.05）和GSSG:GSH值（P<0.01）均显着升高;NC组血清GSH含量和GSH-Px活性以及肝脏SOD、GR活性显着降低（P<0.05）,肝脏GSSG:GSH值显着升高（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组血清中GSH含量和GSH-Px活性与肝脏中GR活性和GSH含量均显着升高（P<0.05）,肝脏GSSG含量和GSSG:GSH值均显着降低（P<0.01）。（7）与NBW 比相比,IUGR组肝脏Il6 mRNA表达水平显着上调（P<0.05）,而 Gst（P<0.05）、Nfe2l2、Hmox1、Gpx1 以及 Sod1（P>0.05）mRNA表达水平下降。与IUGR组相比,IC组肝脏Il1b mRNA表达水平显着下降（P<0.05）,Nfe2l2、Nqo1、Gst和Gpx1 mRNA表达水平显着上升（P<0.05）。（8）IUGR组肝脏IκBα和细胞核NF-κB磷酸化水平显着升高（P<0.05）,细胞质NF-κB磷酸化水平显着下降（P<0.05）。此外,IUGR组肝脏JAK2（P>0.05）和STAT3（P=0.01）磷酸化水平均高于NBW组和NC组。与IUGR组对比,IC组肝脏IκBα磷酸化水平显着下降（P<0.05）,肝脏JAK2以及细胞核和细胞质NF-κB磷酸化水平有下降的趋势（P>0.05）。由此可见,姜黄素可以通过调节IκB/NF-κB、JAK/STAT通路,并激活Nfe2l2和下游基因的表达来缓解IUGR大鼠炎症和提高肝脏抗氧化能力。5 基于大鼠模型研究姜黄素对IUGR肝脏糖脂代谢的调节作用试验五设计同试验四。测定各组大鼠血清激素、血清和肝脏糖脂代谢指标、肝脏组织学形态、肝脏脂代谢相关基因mRNA表达以及肝脏IRS-1、GSK3α/β、Akt/PKB、PI3K蛋白磷酸化水平与SREBP1、PPARα蛋白表达水平。结果表明:与NBW组相比,（1）IUGR组血清胰岛素（P>0.05）、葡萄糖（P<0.05）水平和HOMA-IR（P<0.05）升高。姜黄素极显着降低了 IUGR大鼠血清胰岛素、葡萄糖水平和HOMA-IR（P<0.01）。（2）IUGR组血清TC和TG含量显着降低（P<0.05）,而肝脏TC、TG和NEFA含量显着升高（P<0.05）;姜黄素能显着降低（P<0.05）IUGR组血清HDL-C以及肝脏中TC、TG与NEFA含量和显着升高血清（P<0.05）LDL-C含量。且姜黄素还能显着降低NC组肝脏NEFA含量（P<0.05）。（3）IUGR组和NC组肝脏糖原含量显着降低（P<0.05）;IUGR组肝脏丙酮酸含量显着升高（P<0.05）;NC组肝脏PK活性显着降低（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组肝脏糖原含量显着升高（P<0.05）,丙酮酸含量和 PK 活性显着降低（P<0.05）。（4）IUGR 组肝脏 LPL（P<0.01）、HL（P<0.05）和TL（P<0.05）活性显着下降。日粮添加姜黄素后,能显着提高肝脏LPL（P<0.01）、HL（P<0.05）和TL（P<0.01）活性。（5）NBW和NC大鼠肝脏组织学结构正常。在IUGR大鼠的肝脏组织学切片中,肝脏内有细胞存在空泡化和水肿现象,脂肪细胞显示轻度变性的迹象。在IC组,细胞空泡化明显减少,没有观察到脂肪细胞。（6）IUGR组肝脏Cd36、Srebf1、FasnmRNA表达水平显着上调（P<0.05）,肝脏Ppara和HSL mRNA表达水平显着下调（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组肝脏Ppara和HSL mRNA表达水平显着上调（P<0.05）,肝脏Cd36、Srebf1、Fasn mRNA表达水平显着下调（P<0.05）。（7）IUGR 组肝脏 IRS-1（P>0.05）、AKT（P<0.05）和 GSK3β（P<0.05）磷酸化水平上升;且肝脏GSK3α和PI3K磷酸化水平下降（P>0.05）。与IUGR组相比,IC组组肝脏IRS-1、AKT和GSK3β磷酸化水平显着降低（P<0.05）,肝脏GSK3α和PI3K磷酸化水平有升高的趋势（P>0.05）。与NBW组相比,IUGR组肝脏中SREBP1的蛋白表达水平显着升高（P<0.05）,而PPARα蛋白表达水平显着低于NBW组（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组肝脏中SREBP1蛋白表达水平显着降低（P<0.05）,而肝脏PPARα的蛋白表达水平显着升高（P<0.05）。由此可见,姜黄素能通过调节肝脏胰岛素信号通路来缓解IUGR大鼠的胰岛素抵抗。姜黄素还能通过调节肝脏SREBPs靶基因和脂质代谢相关基因,抑制脂质生成和促进脂质分解,来缓解IUGR大鼠肝脏脂质积聚。综上所述,通过以上五部分试验,发现IUGR会对新生仔猪造成诸多不利影响,如炎症损伤、肝脏抗氧化能力下降以及糖脂代谢紊乱等。通过在IUGR断奶仔猪日粮添加姜黄素的试验表明,姜黄素能改善IUGR断奶仔猪生长性能、缓解肝脏损伤、提高抗氧化能力,姜黄素对抗氧化能力的影响可能与其对Nrf2/Hmox1通路关键蛋白和基因mRNA表达的调控有关。姜黄素还能调节IUGR断奶仔猪糖脂代谢紊乱,这可能与对相关基因mRNA表达的调控有关。进一步通过IUGR鼠模型的研究表明,姜黄素能通过调节IκBα/NF-κB、JAK/STAT通路来缓解IUGR肝脏炎症损伤,对IUGR肝脏糖脂代谢的调节作用可能是通过调节胰岛素信号通路和SREBP及其靶基因来实现的。
赖涛[9]（2019）在《外源精胺对猪脐静脉内皮细胞血管形成的影响及其作用机理》文中研究表明胎盘血管的密度和大小决定着胎盘功能,对影响母猪的生产性能具有重大意义,研究胎盘血管的形成对改善母猪生产性能和胚胎健康生长具有重要价值。精胺是由细胞合成的,广泛存在于哺乳动物体内脂肪族胺类,对细胞的增殖分化具有重要作用。本项目旨在应用细胞生物学相关技术手段,从分子和细胞水平研究外源精胺对猪脐静脉内皮细胞血管形成相关基因和蛋白表达的影响,以及血管形成相关信号通路位点的基因表达。为寻找防止母猪胎盘功能不全带来的仔猪宫内发育迟缓的方法提供理论支持。为此,本项目展开如下试验:1.以正常分娩的猪脐带为材料,通过采用I型胶原酶灌注脐静脉,37℃消化15min,具有较好的内皮细胞分离效果。采用高浓度血清,促进原代细胞的生长。分离纯化后的内皮细胞通过形态学和抗CD31,抗vWF蛋白染色鉴定其为内皮细胞。2.不同浓度（0μM、2.5μM、5μM、7.5μM、10μM）的精胺不同程度的影响猪脐静脉内皮细胞的增殖,7.5μM精胺添加量对内皮细胞的增殖促进作用最大（P<0.05）。以7.5μM精胺添加量为试验组进行细胞迁移和管腔形成试验。7.5μM精胺处理组中细胞迁移数量与管腔形成数量显着高于（P<0.05）对照组。添加7.5μM精胺能够促进脐静脉内皮细胞体外血管形成。3.通过荧光定量PCR技术检测对照组和7.5μM精胺处理组中FGF-2、PLGF、ANG-1、VEGF-A、PI3K、AKT1、m-TOR、S6K1、MEK基因表达量。荧光定量结果表明7.5μM精胺处理组FGF-2、PLGF、m-TOR、MEK的基因表达量显着高于对照组（P<0.05）。
王斐[10]（2019）在《姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道组织形态及功能的影响》文中研究指明宫内发育迟缓（Intrauterine growthretardation,IUGR）是指哺乳动物胚胎或胎儿的生长发育受损,表现为胎儿的生长率小于正常生长的胎儿。IUGR问题一直是备受关注的全球性人类健康和动物生产问题,全球大约有5%-7%的婴儿患有IUGR,10%-20%的新生仔猪患有IUGR。肠道是动物营养消化吸收和代谢的重要场所,同时也是最大的免疫器官,对动物的生长发育和免疫防御有重要的意义。姜黄素是一种天然的抗氧化物质,从姜黄中提取而来,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降血脂和增强免疫机能等生理功能。由于姜黄素在IUGR断奶仔猪上少有研究,因此本研究以IUGR断奶仔猪为动物模型,探讨姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道组织形态及功能的影响,为改善IUGR后代肠道功能损伤提供新的营养策略。本研究分为以下三个部分:1.姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道生长、组织形态和养分消化的影响选取16头正常初生体重（NBW）仔猪和16头IUGR仔猪,公母各半。26日龄断奶,分别饲喂基础日粮或姜黄素日粮（基础日粮+400mg/kg姜黄素）,即N（NBW+基础日粮）、NC（NBW+姜黄素日粮）、Ⅰ（IUGR+基础日粮）和IC（IUGR+姜黄素日粮）,每组8头,饲养至50日龄屠宰取样。试验结束时,断奶仔猪采集血液后屠宰,取肠道样品进行各项指标的测定。结果表明:（1）与N组断奶仔猪相比,IUGR显着降低增重（WG）和采食量（FI）（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高断奶仔猪WG和FI（P<0.05）。（2）与N组相比,IUGR显着降低了十二指肠的绝对长度（P<0.05）、十二指肠和空肠的相对长度（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高十二指肠和空肠的绝对长度（P<0.05）,显着升高十二指肠的相对长度（P<0.05）。（3）与N组相比,IUGR显着降低了十二指肠绒毛高度（VH）、绒毛宽度（VW）和绒毛高度/隐窝深度（VCR）,空肠VH和VCR以及回肠VH、VW和VCR（P<0.05）,同时都显着提高了十二指肠、空肠和回肠隐窝深度（CD）（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高的十二指肠VH和VCR、空肠VH和VCR以及回肠VH、VW和VCR（P<0.05）,十二指肠、空肠和回肠的CD值显着降低（P<0.05）。（4）与N组相比,IUGR断奶仔猪小肠肠道绒毛容易受损、多断裂、较短且长短不一。与Ⅰ组相比,姜黄素明显提高了肠道绒毛长度和完整性,绒毛断裂数量有所减少。Ⅰ组小肠肠道微绒毛比N组仔猪的更短且参差不齐。与Ⅰ组相比,IC组显着提高了肠道微绒毛长度,空肠更明显。（5）与N组相比,IUGR显着降低断奶仔猪的有机物的表观消化率（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高了干物质、粗蛋白和粗脂肪的表观消化率（P<0.05）。（6）与N组相比,IUGR显着降低了空肠麦芽糖酶和乳糖酶、回肠麦芽糖酶和蔗糖酶的活性（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素可以显着增强回肠乳糖酶的活性（P<0.05）。（7）与N组相比,IUGR断奶仔猪有更低的血清胰岛素样生长因子1（IGF-I）水平和空肠黏膜IGF-I含量及空肠回肠黏膜中IGF-I的mRNA表达量（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高了回肠黏膜IGF-I含量及IGF-I的mRNA表达量（P<0.05）。综上所述,日粮添加姜黄素可以提高肠道二糖酶活性、回肠黏膜IGF-I的含量以及IGF-Ⅰ mRNA表达量,增加了肠道绒毛、微绒毛长度。因此,日粮添加姜黄素可以改善IUGR断奶仔猪的肠道消化吸收功能,促进生长发育。2.姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道抗氧化功能的影响试验设计同试验一。结果表明:（1）与N组相比,IUGR显着升高了断奶仔猪空肠回肠丙二醛（MDA）的含量（P<0.05）;与Ⅰ组相比,姜黄素显着降低空肠回肠蛋白质羰基（PC）、空肠8-羟化脱氧鸟苷（8-OHDG）以及回肠MDA的含量（P<0.05）。（2）与N组相比,IUGR显着降低空肠总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和谷胱甘肽（GSH）含量（P<0.05）;添加姜黄素后,IC组空肠的总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化氢酶（CAT）活性显着升高（P<0.05）。（3）与N组相比,IUGR显着降低回肠黏膜中T-SOD、CAT、GSH-Px活性和GSH含量（P<0.05）,显着升高过氧化氢（H2O2）含量（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高了 CAT、GSH-Px的活性（P<0.05）,显着降低了 H2O2含量（P<0.05）。（4）与N组相比,IUGR显着降低了空肠黏膜核因子E2相关因子2（Nrf2）、Kelch样Ech相关蛋白（KEAP）、SOD、GSH-Px1、谷胱甘肽S-转移酶（GST）、醌氧化还原酶（NQO1）、谷氨酸半胱氨酸连接酶（GCLM）、血红素加氧酶1（HO-1）、硫氧还蛋白还原酶（TXNRD1）的mRNA表达水平（P<0.05）。与I组相比,姜黄素显着升高了空肠黏膜Nrf2、CAT、SOD、GST、NQO1和TXNRD1 mRNA表达水平（P<0.05）。（5）与N组相比,IUGR显着降低回肠黏膜CAT的mRNA表达水平（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高回肠黏膜Nrf2、GST、SOD、GSH-Px1、NQO1、TXNRD1 mRNA表达量（P<0.05）。综上所述,IUGR会引起断奶仔猪肠道发生氧化应激,破坏抗氧化防御系统,而通过日粮添加姜黄素这一措施对缓解IUGR诱导的仔猪肠道氧化应激和提高肠道抗氧化功能有一定的帮助作用。3.姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道免疫功能的影响试验设计同试验一。结果表明:（1）与N组断奶仔猪相比,Ⅰ组的白细胞数目显着增加（P<0.05）,血小板数目显着减少（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着降低红细胞数目（P<0.05）,显着升高血小板数目（P<0.05）。（2）与N组相比,IUGR显着升高了血清白介素1β（IL-1β）、白介素2（IL-2）、白介素6（IL-6）、白介素10（IL-10）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量（P<0.05）,显着降低了血清免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）的含量（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着降低血清IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α的含量（P<0.05）,显着升高IL-10、IgG、IgM和分泌型免疫球蛋白（sIgA）的含量（P<0.05）。（3）与N组相比,IUGR显着降低空肠IL-10的含量（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着降低空肠IL-1β、IL-2和TNF-α的含量（P<0.05）,显着降低回肠IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α的含量（P<0.05）。（4）与N组相比,IUGR显着降低了空肠IgA、IgG和sIgA的含量（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高了空肠IgG的含量（P<0.05）,显着降低了 IgM的含量（P<0.05）;姜黄素显着升高了回肠IgA、IgG、IgM和sIgA的含量（P<0.05）。（5）与N组相比,IUGR显着降低空肠和回肠IL-10、CD4和CD8的mRNA表达量（P<0.05）,显着增加回肠IL-1β和TNF-α的mRNA表达量（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着降低了空肠IL-1β、TNF-α和主要组织相容性复合物Ⅱ（MHC-Ⅱ）的mRNA表达量（P<0.05）,显着增加IL-10、CD4和CD8的mRNA表达量（P<0.05）;与Ⅰ组相比,姜黄素显着降低了回肠IL-1β和 MHC-Ⅱ 的 mRNA 表达量（P<0.05）,显着增加 IL-10、CD4 和 CD8 的 mRNA表达量（P<0.05）。综上所述,IUGR导致断奶仔猪免疫炎症反应上调,细胞因子分泌紊乱以及血清IgA、IgG、IgM和空肠黏膜IgA、IgG和sIgA含量减少。日粮添加姜黄素在一定程度上缓解了 IUGR对断奶仔猪免疫功能的不良影响。综上所述,得出以下结论:（1）IUGR不仅显着降低断奶仔猪的生长性能,而且损伤肠道黏膜的形态结构、消化吸收功能、抗氧化功能和免疫功能。（2）日粮添加姜黄素可以提高肠道二糖酶活性、回肠黏膜IGF-Ⅰ的含量以及IGF-ⅠmRNA表达量,增加了肠道绒毛、微绒毛长度,改善IUGR断奶仔猪的肠道消化吸收功能,促进生长发育。（3）日粮添加姜黄素可以显着降低MDA、PC和8-OHDG的含量,提高抗氧化酶活性和非酶抗氧化物质含量及相关基因表达水平。（4）日粮添加姜黄素通过降低IL-1β等促炎因子水平及表达量、升高IgA等免疫球蛋白含量,可在一定程度上缓解IUGR对断奶仔猪免疫功能的不良影响。
二、胎盘表皮生长因子受体的表达改变与胎儿宫内生长迟缓的关系研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、胎盘表皮生长因子受体的表达改变与胎儿宫内生长迟缓的关系研究（论文提纲范文）
（1）父代氰戊菊酯暴露诱发子代宫内生长受限及其机制研究（论文提纲范文）
| 英文缩略语 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 引言 |
| 1.1 拟除虫菊酯的普通人群暴露已成为新的公共卫生问题 |
| 1.2 氰戊菊酯对胎儿宫内生长发育的不利影响 |
| 1.3 父代暴露于不良环境因素对子代的影响 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 化学药物与试剂 |
| 2.2 主要试剂的配制 |
| 2.3 暴露剂量的设计 |
| 2.4 实验动物的处理 |
| 2.5 胎盘组织HE染色及其评价 |
| 2.6 实时定量RT-PCR |
| 2.7 蛋白质免疫印迹实验 |
| 2.8 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 父代氰戊菊酯暴露对F0 代雄鼠和孕鼠体重的影响 |
| 3.2 父代氰戊菊酯暴露对子代出生结局的影响 |
| 3.3 父代氰戊菊酯暴露对胎鼠宫内生长发育及IUGR率的影响 |
| 3.4 父代氰戊菊酯暴露对胎盘组织结构的影响 |
| 3.5 父代氰戊菊酯暴露对胎盘甲基转移酶表达水平的影响 |
| 3.6 父代氰戊菊酯暴露对胎盘血管生成因子和印记基因表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 拟除虫菊酯类杀虫剂的生殖发育毒性研究进展 |
| 参考文献 |
（2）牛磺酸促进生长受限胎鼠近远期脑发育及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 牛磺酸激活PKA-CREB-BDNF信号通路促进生长受限胎鼠神经干细胞分化研究 |
| 1 实验材料及方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第二部分 牛磺酸对生长受限胎鼠海马远期代谢影响 |
| 1 实验材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第三部分 牛磺酸对生长受限胎鼠远期感觉运动及海马突触素表达影响 |
| 1 实验材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 全文小结 |
| 参考文献 |
| 综述 生长受限胎儿脑损伤与牛磺酸的研究进展 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词表 |
| 攻读学位期间成果 |
| 致谢 |
（3）叶酸水平降低在孕期维生素D缺乏引起子代生命早期生长迟缓中的作用（论文提纲范文）
| 英文缩略词 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 研究一 孕期不同阶段维生素D状况与子代生命早期生长迟缓的关联 |
| 1.材料和方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 研究二 母体分娩期维生素D状况对叶酸水平及胎盘叶酸转运的影响 |
| 1.材料和方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新点和局限性 |
| 参考文献 |
| 附录 个人简历 |
| 致谢 |
| 综述:母体孕期维生素D状况与不良妊娠的研究进展 |
| 参考文献 |
（4）大鼠胚胎着床后短暂抑制雌激素对胎盘滋养层细胞功能的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一部分 大鼠妊娠早期雌激素缺乏对胎盘及胎盘生长因子的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1. 大鼠妊娠着床后雌激素缺乏模型的建立及组织形态学观察 |
| 2. 检测mRNA的表达量实时荧光定量PCR |
| 3. 蛋白质表达的原位检测免疫组织化学染色 |
| 4. 检测蛋白质的表达含量蛋白免疫印迹杂交 |
| 5. 大鼠胎盘糖原差异性表达PAS染色 |
| 6. 统计学分析 |
| 结果 |
| 1. 大鼠胚胎着床后短暂雌激素缺乏模型的建立 |
| 2. Plgf mRNA在大鼠胎盘组织中的表达 |
| 3. 大鼠着床后短暂雌激素缺乏模型GD13.5和GD19.5胎盘滋养层细胞侵袭结果 |
| 4. Plgf蛋白在大鼠胚胎着床后雌激素短暂缺乏模型中的原位表达 |
| 5. Plgf蛋白质在大鼠胚胎着床后雌激素短暂缺乏模型中的表达变化 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 ANGPTL8对滋养层细胞增殖迁移侵袭的影响 |
| 前言 |
| 材料方法 |
| 1. 大鼠雌激素短暂缺乏模型子宫妊娠相关基因的差异性表达表达谱芯片检测 |
| 2. qPCR检测大鼠子宫差异基因的相对表达 |
| 3. Western Blot检测大鼠子宫胎盘组织Angtl8蛋白的相对表达 |
| 4. 人滋养层细胞(HTR8SVneo)的培养与鉴定 |
| 5.重组Angptl8蛋白对HTR8Svneo细胞增殖、迁移、侵袭的影响 |
| 结果 |
| 1. 大鼠雌激素缺乏模型子宫组织转录组基因芯片结果 |
| 2. 大鼠妊娠子宫组织差异基因mRNA的验证 |
| 3. 大鼠妊娠子宫组织Angptl8蛋白的相对表达 |
| 4. HTR8-SVneo绒毛膜滋养层细胞的鉴别结果 |
| 5. 重组Angptl8蛋白对HTR8-Svneo细胞增殖、迁移、侵袭的影响 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 缩略词表 |
| 参考文献 |
| 综述 胎盘滋养层细胞与妊娠相关疾病 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（5）转录因子TWIST1在子痫前期发病中的作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 研究背景 |
| 第一部分 EOSP患者及体外缺氧模型中滋养细胞凋亡率及TWIST1表达 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第二部分 TWIST1在缺氧滋养细胞中的作用 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第三部分 凋亡激活剂/抑制剂对TWIST1调节缺氧滋养细胞凋亡的影响 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第四部分 TWIST1调节Aspirin和LMWH影响滋养细胞活性和功能的机制 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 论文的创新性及局限性 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表学术论文情况 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
| 外文论文Ⅰ |
| 外文论文Ⅱ |
（6）PI3K/AKT信号通路在IGF-1调控滋养层细胞分泌β-hCG和孕酮中的作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 IGF-1在流产发生中的作用 |
| 1.2 β-hCG和孕酮与胚胎的生长发育 |
| 1.3 PI3K/AKT信号通路与细胞凋亡 |
| 1.4 本研究的思路、目的和意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 研究设计及技术路线图 |
| 2.1.1 实验分组及标本收集 |
| 2.1.2 实验步骤 |
| 2.1.3 实验设计技术路线 |
| 2.2 材料 |
| 2.2.1 样本来源 |
| 2.2.2 主要试剂及仪器 |
| 2.2.3 主要溶液配制 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 血清β-hCG和孕酮水平检测 |
| 2.3.2 血清IGF-1水平检测 |
| 2.3.3 绒毛组织病理切片制备 |
| 2.3.4 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测步骤 |
| 2.3.5 Wes全自动蛋白表达分析系统检测步骤 |
| 2.3.6 统计分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 患者基本情况比较 |
| 3.2 血清β-hCG和孕酮水平 |
| 3.3 血清IGF-1水平 |
| 3.4 血清IGF-1与β-hCG、孕酮的相关性分析 |
| 3.5 绒毛组织病理形态 |
| 3.6 绒毛组织IGF-1和IGF-1R基因和蛋白表达水平 |
| 3.6.1 绒毛组织IGF-1和IGF-1R mRNA表达水平 |
| 3.6.2 绒毛组织IGF-1和IGF-1R蛋白表达水平 |
| 3.7 绒毛组织PI3K/AKT信号通路相关基因mRNA和蛋白表达水平 |
| 3.7.1 绒毛组织PI3K/AKT信号通路相关基因mRNA表达水平 |
| 3.7.2 绒毛组织PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达水平 |
| 3.8 绒毛组织滋养细胞凋亡相关因子表达水平 |
| 3.8.1 凋亡相关因子mRNA表达水平 |
| 3.8.2 凋亡相关因子蛋白表达水平 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 稽留流产中妊娠相关激素水平分析 |
| 4.2 稽留流产中IGF-1表达水平分析 |
| 4.3 PI3K/AKT信号通路在稽留流产中的作用 |
| 4.4 滋养细胞凋亡相关因子在稽留流产中的作用 |
| 第五章 结论 |
| 5.1 主要结论 |
| 5.2 研究展望 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
（7）胎盘源性miRNA在选择性生长受限中的作用和机制研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| 参考文献 |
| 英文摘要 |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 建立选择性生长受限胎儿的胎盘源性miRNA表达谱 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 1.5 参考文献 |
| 第二部分 选择性生长受限胎盘源性的差异表达miRNA的生物信息学研究和PCR验证 |
| 2.1 sIUGR胎盘源性miRNA的靶基因预测和分析 |
| 2.2 sIUGR胎盘源性miRNA的 Real Time-PCR验证 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 2.5 参考文献 |
| 第三部分 miR-338-5p对 HTR8/SVneo滋养细胞增殖、侵袭和迁移的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 3.5 参考文献 |
| 第四部分 miR-338-5p在sIUGR中靶向抑制了EFEMP1 基因的表达 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 4.5 参考文献 |
| 全文结论 |
| 综述 双胎选择性宫内生长受限发病机制的研究进展 |
| 参考文献 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 |
（8）姜黄素对IUGR断奶仔猪肝脏功能的调节作用及相关机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 本文部分缩略词的中英文对照 |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 第一节 IUGR的概述 |
| 1 IUGR的发生与定义 |
| 2 引起IUGR的原因 |
| 3 IUGR对人类健康造成的影响 |
| 4 IUGR对猪生产造成的影响 |
| 5 在猪生产上IUGR的预防与营养调控 |
| 第二节 姜黄素的概述及其在畜禽生产上的应用 |
| 1 姜黄素 |
| 2 姜黄素的生物学功能 |
| 3 姜黄素在畜禽生产上的应用 |
| 第二章 IUGR对新生仔猪血液细胞因子和肝脏炎症、抗氧化及糖脂代谢的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 第三章 姜黄素对IUGR断奶仔猪生长发育和抗氧化功能的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 第四章 姜黄素对IUGR断奶仔猪肝脏损伤和糖脂代谢的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 第五章 基于大鼠模型研究姜黄素对IUGR肝脏损伤和抗氧化功能的调节作用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 第六章 基于大鼠模型研究姜黄素对IUGR肝脏糖脂代谢的调节作用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 本文创新点与有待进一步研究的问题 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间论文发表情况 |
（9）外源精胺对猪脐静脉内皮细胞血管形成的影响及其作用机理（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 文献综述 |
| 1 研究背景 |
| 2 研究进展 |
| 2.1 胎盘血管生成对胎儿宫内发育的影响 |
| 2.1.1 胎儿宫内发育迟缓对养猪业的影响 |
| 2.1.2 胎盘血管的结构和功能 |
| 2.1.3 猪胎盘血管形成 |
| 2.1.4 影响血管生成的调控因素 |
| 2.1.5 胎儿宫内发育迟缓与胎盘血管生成的关系 |
| 2.2 精胺简介 |
| 2.2.1 精胺的来源与代谢 |
| 2.2.2 精胺对细胞增殖的调节作用 |
| 2.2.3 精胺对血管系统的调节作用 |
| 2.2.4 精胺对胎盘发育的调节作用 |
| 2.3 精胺在猪生产上的应用 |
| 2.3.1 精胺在哺乳仔猪营养上的应用 |
| 2.3.2 精胺在断奶仔猪生产上的应用 |
| 2.3.3 精胺在母猪生产上的应用 |
| 3 研究目的与意义 |
| 4 技术路线 |
| 第二部分 试验研究 |
| 试验一 猪脐静脉内皮细胞分离培养 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要试剂、耗材、仪器与动物 |
| 1.1.1 主要试剂 |
| 1.1.2 试剂配置 |
| 1.1.3 主要耗材 |
| 1.1.4 主要仪器 |
| 1.1.5 试验材料 |
| 1.2 试验设计 |
| 1.2.1 脐静脉内皮细胞分离 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.3.1 猪脐静脉内皮细胞分离和培养 |
| 1.3.2 细胞纯化分离 |
| 1.3.3 细胞免疫荧光法鉴定 |
| 1.3.4 细胞生长曲线的制定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 脐静脉内皮细胞原代培养 |
| 2.2 脐静脉内皮细胞分离免疫荧光鉴定结果 |
| 2.3 细胞接种数的确定和生长曲线的绘制 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 试验二 外源精胺对脐静脉内皮细胞血管形成的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要试剂仪器 |
| 1.1.1 主要试剂 |
| 1.1.2 主要试剂耗材 |
| 1.1.3 主要仪器 |
| 1.2 试验设计 |
| 1.3 试验项目与方法 |
| 1.3.1 脐静脉内皮细胞增殖试验 |
| 1.3.2 脐静脉内皮细胞Transwell模型迁移试验 |
| 1.3.3 脐静脉内皮细胞管腔形成试验 |
| 1.4 统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同浓度精胺对脐静脉内皮细胞活力的影响 |
| 2.2 精胺对脐静脉内皮细胞在Transwell模型迁移的影响 |
| 2.3 不同浓度精胺对脐静脉内皮细胞管腔形成的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 试验三 外源精胺对猪脐静脉内皮细胞血管生成相关基因表达的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要试剂、耗材、仪器 |
| 1.1.1 主要试剂 |
| 1.1.2 主要耗材 |
| 1.1.3 主要仪器 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.3 测定项目与方法 |
| 1.3.1 荧光定量PCR法测定细胞生长因子和相关信号通路位点基因的表达 |
| 1.3.1.1 总RNA的提取 |
| 1.3.1.2 RNA反转录 |
| 1.3.1.3 引物设计与合成 |
| 1.3.1.4 荧光定量PCR扩增 |
| 1.4 统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 外源精胺处理对猪脐静脉内皮细胞PLGF、VEGF-A、ANG-1、FGF-2 基因表达的影响 |
| 2.2 外源精胺处理对猪脐静脉内皮细胞PI3K、AKT1、m-TOR、S6K1、MEK的mRNA表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三部分 全文总结 |
| 参考文献 |
| 附录 荧光定量PCR的溶解曲线 |
| 致谢 |
（10）姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道组织形态及功能的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 本文部分缩略词的中英文对照表 |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 第一节 猪宫内发育迟缓的研究进展 |
| 1 宫内发育迟缓的发生机制 |
| 2 宫内发育迟缓动物模型的构建 |
| 2.1 手术结扎构建IUGR模型 |
| 2.2 限制母体营养构建IUGR模型 |
| 2.3 自选择构建IUGR模型 |
| 3 宫内发育迟缓对断奶仔猪肠道生长发育及功能的影响 |
| 3.1 IUGR对动物存活率的影响 |
| 3.2 IUGR对动物肠道生长发育和组织形态的影响 |
| 3.3 IUGR对动物肠道内消化酶活性的影响 |
| 3.4 IUGR对动物肠道抗氧化功能的影响 |
| 3.5 IUGR对肠道免疫功能的影响 |
| 4 宫内发育迟缓断奶仔猪肠道生长发育及功能的营养调控 |
| 第二节 姜黄素的研究进展 |
| 1 姜黄素的理化性质与体内代谢 |
| 2 姜黄素的生理功能 |
| 2.1 抗氧化 |
| 2.2 抗炎 |
| 2.3 抗肿瘤 |
| 2.4 降血脂 |
| 3 姜黄素在畜禽生产中的应用 |
| 3.1 姜黄素在猪生产中的应用 |
| 3.2 姜黄素在家禽生产中的应用 |
| 第二章 姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道生长、组织形态和养分消化的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物与设计 |
| 1.2 样品采集与制备 |
| 1.3 测定指标与方法 |
| 1.4 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 姜黄素对IUGR断奶仔猪生长性能的影响 |
| 2.2 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道指数的影响 |
| 2.3 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜组织形态的影响 |
| 2.4 姜黄素对IUGR断奶仔猪养分表观消化率的影响 |
| 2.5 姜黄素对IUGR断奶仔猪二糖酶活性的影响 |
| 2.6 姜黄素对IUGR断奶仔猪血清和肠道黏膜激素含量的影响 |
| 2.7 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜IGF-I基因mRNA表达量的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道生长性能的影响 |
| 3.2 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道指数的影响 |
| 3.3 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道组织形态的影响 |
| 3.4 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪表观消化率的影响 |
| 3.5 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道二糖酶活性的影响 |
| 3.6 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪血清和肠道IGF-I含量的影响 |
| 3.7 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道IGF-I mRNA表达量的影响 |
| 4 本章小结 |
| 第三章 姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道氧化还原状态的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物与设计 |
| 1.2 样品采集 |
| 1.3 测定指标与方法 |
| 1.4 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜MDA、PC和8-OHDG含量的影响 |
| 2.2 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜抗氧化酶活性、GSH含量和H2O2含量的影响 |
| 2.3 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜抗氧化功能相关基因mRNA表达量的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜MDA、PC和8-OHDG含量的影响 |
| 3.2 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道抗氧化酶活性、GSH含量和H_2O_2含量的影响 |
| 3.3 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜抗氧化功能相关基因mRNA表达量的影响 |
| 4 本章小结 |
| 第四章 姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道免疫功能的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物与设计 |
| 1.2 样品采集 |
| 1.3 测定指标与方法 |
| 1.4 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 姜黄素对IUGR断奶仔猪血常规指标的影响 |
| 2.2 姜黄素对IUGR断奶仔猪血清细胞因子和免疫球蛋白含量的影响 |
| 2.3 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜细胞因子含量的影响 |
| 2.4 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜免疫球蛋白含量的影响 |
| 2.5 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜免疫功能相关基因mRNA表达量的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪血常规指标的影响 |
| 3.2 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪血清和肠道黏膜细胞因子含量的影响 |
| 3.3 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪血清和肠道黏膜免疫球蛋白含量的影响 |
| 3.4 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜免疫相关基因mRNA表达量的影响 |
| 4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 |
四、胎盘表皮生长因子受体的表达改变与胎儿宫内生长迟缓的关系研究（论文参考文献）
- [1]父代氰戊菊酯暴露诱发子代宫内生长受限及其机制研究[D]. 王业成. 安徽医科大学, 2021(01)
- [2]牛磺酸促进生长受限胎鼠近远期脑发育及机制研究[D]. 方琼. 南方医科大学, 2021(02)
- [3]叶酸水平降低在孕期维生素D缺乏引起子代生命早期生长迟缓中的作用[D]. 章恒. 安徽医科大学, 2020(04)
- [4]大鼠胚胎着床后短暂抑制雌激素对胎盘滋养层细胞功能的影响[D]. 刘婷婷. 北京协和医学院, 2020(05)
- [5]转录因子TWIST1在子痫前期发病中的作用及其机制研究[D]. 马丽娟. 山东大学, 2020(12)
- [6]PI3K/AKT信号通路在IGF-1调控滋养层细胞分泌β-hCG和孕酮中的作用研究[D]. 梁卫桃. 兰州大学, 2020(01)
- [7]胎盘源性miRNA在选择性生长受限中的作用和机制研究[D]. 温弘. 浙江大学, 2019(01)
- [8]姜黄素对IUGR断奶仔猪肝脏功能的调节作用及相关机制研究[D]. 何进田. 南京农业大学, 2019(08)
- [9]外源精胺对猪脐静脉内皮细胞血管形成的影响及其作用机理[D]. 赖涛. 江西农业大学, 2019(03)
- [10]姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道组织形态及功能的影响[D]. 王斐. 南京农业大学, 2019(08)