一、妊娠高血压综合征患者胎盘局部NO水平与胎盘病理改变的研究（论文文献综述）
陈亚南[1]（2019）在《川芎嗪注射液对子痫前期患者TNF-α和NO的影响》文中进行了进一步梳理背景子痫前期（Preeclampsia,PE）是女性在妊娠期间特有的疾病,主要临床表现为妊娠20周后出现高血压、水肿、蛋白尿等症状,引起孕妇全身多系统功能紊乱,甚至造成不可逆的损伤,其发病率在5%左右,严重威胁母婴健康。因此,及时有效的治疗对PE患者的预后具有重要意义。目前,有关PE的发病机制尚不完全清楚,其中胎盘浅着床学说和血管内皮损伤学说为主要学说。肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）作为炎症反应的核心因子,过量可直接损伤血管内皮细胞,使胎盘螺旋小动脉重铸障碍,引起胎盘浅着床,导致胎盘缺血、缺氧。一氧化氮（Nitrogen Monoxide,NO）作为内皮细胞释放的内源性血管舒张因子,其合成、释放及活性被抑制、破坏,将进一步导致血管异常收缩及功能障碍,更加重了局部或全身缺血缺氧,最终形成恶性循环,使PE患者病情不断恶化。盐酸川芎嗪（Tetramethylpyrazine,TMP）注射液有活血化瘀,扩张血管,抗血小板聚集,清除血管自由基,保护血管内皮细胞,提高细胞耐缺氧的作用。研究显示,TMP注射液应用于PE有一定的临床疗效,但是否通过降低TNF-α及提高NO水平,从而影响血压等临床参数变化尚无研究报道。目的通过探讨TMP注射液对PE患者TNF-α和NO表达水平的影响,旨在研究TMP注射液对PE临床疗效的作用机理。方法1研究对象选取于2018年1月-2018年9月在新乡市妇幼保健院规律产检、住院并确诊患有PE的患者60例作为研究对象,其中轻度子痫前期30例,重度子痫前期30例。试验采取随机双盲对照的方法,分为轻度子痫前期实验组和对照组各15人,重度子痫前期实验组和对照组各15人。纳入本次实验的患者及其家属均知情本研究内容并签署知情同意书,并经新乡市妇幼保健院伦理委员会审查通过。2实验方法两组患者均进行常规治疗:监测血压Q8H（6-14-22点）,增加卧床休息,保证充足睡眠时间,避免不良精神因素刺激,给予高蛋白、低脂、低盐饮食,适量补充维生素,对钙摄入不足者补充钙剂,降压药物盐酸拉贝洛尔。对照组在常规治疗基础上静脉滴注25%硫酸镁。实验组在对照组的基础上联合给药盐酸川芎嗪注射液。进行以10天为一个疗程的治疗。酶联免疫吸附（enzyme linked immμnosorbent assay,ELISA）法测定血清中TNF-α的含量,硝酸还原法测定血清中NO水平。结果1结果显示实验组与对照组患者在治疗前TNF-α的表达水平并没有显着的差异,结果分别是:对照组（18.15±7.23）ng/ml,实验组（18.23±6.78）ng/ml。治疗后分别为:对照组（9.81±4.72）ng/ml,实验组（7.18±3.56）ng/ml。对照组患者治疗后相比较治疗前TNF-α水平下降明显,实验组患者TNF-α水平在治疗后相比较治疗前下降更为明显。治疗后对实验组和对照组患者TNF-α水平进行组间比较,两组之间的差异较为显着,具有统计学意义（P<0.05）。2在治疗前实验组与对照的组病人的NO表达水平并无太大差别,分别是:对照组（3.46±1.61）μmol/L,实验组（3.48±1.52）μmol/L。治疗后的表达水平分别为:对照组（4.08±0.89）μmol/L,实验组（4.66±0.99）μmol/L。对照组患者治疗后相比较治疗前NO表达水平升高明显,实验组患者NO表达水平在治疗后相比较治疗前升高更为明显。治疗后对实验组和对照组患者NO表达水平进行组间比较,两组间相较差异显着,有统计学意义（P<0.05）。3患者在治疗前实验组与对照组的血压水平并无显着的差异,分别为:实验组173.63±7.8/116.50±8.87mmHg,对照组172.72±8.82/115.61±9.49mmHg。治疗后再次对血压水平进行监测,结果分别是:实验组145.22±4.32/98.55±3.78mmHg,对照组150.31±9.27/103.26±7.86mmHg。对照组患者治疗后相比较治疗前血压水平下降明显,实验组患者血压在治疗后相比较治疗前下降更为明显。治疗后对实验组和对照组患者血压水平进行组间比较,有明显差异,有统计学意义（P<0.05）。实验组的有效病例数为28,总体有效率为93.0%,对照组的有效病例数为22,总体有效率为73.0%,实验组的临床总体有效率较高,有统计学意义（P<0.05）。结论川芎嗪注射液通过降低TNF-α及提高NO水平对子痫前期患者有明显治疗效果。
姚瑶[2]（2016）在《当归芍药散对妊娠高血压大鼠的药效学及作用机制的研究》文中研究指明目的:研究当归芍药散对妊娠高血压的药效学作用及作用机制,以期为当归芍药散临床上治疗妊娠高血压疾病提供实验依据。以大鼠妊娠高血压模型为研究对象,分别从血压、尿蛋白含量、胎盘组织病理形态、肝肾功能等角度来评价当归芍药散妊娠高血压大鼠的治疗作用。从精氨酸加压素（AVP）及一氧化氮（NO）途径探讨当归芍药散对妊娠高血压的作用机制。方法:（1）一氧化氮合酶抑制剂（L-NAME）腹腔注射建立妊娠高血压大鼠模型。（2）全自动无创血压测量仪测量大鼠尾动脉平均动脉压。（3）代谢笼收集各组大鼠24h尿液,BCA法测定大鼠24h尿蛋白含量。（4）胎盘组织HE染色,观察组织病理形态变化。（5）全自动生化仪检测:血清ALT、AST、TP、ALB、GLB、BUN、Cr。全自动血液凝固分析仪检测血浆PT。（6）全自动生化仪检测:血清K+、Na+、Cl-浓度。（7）酶联免疫检测法（ELISA）测定,大鼠血浆AVP、AngⅡ、ET-1、PGI2、TXA2、β-HCG、E水平。（8）Western Blotting法测定肾脏组织Actin、AVP（V2R）、e NOS及胎盘组织VEGF的表达。结果:（1）妊娠第11d起,大鼠腹腔注射L-NAME25/g·kg-1,至妊娠第18d,可复制稳定的妊娠高血压模型。（2）当归芍药散各剂量组大鼠平均脉压明显降低,24h尿蛋白含量明显降低。（3）药物组大鼠胎盘绒毛合体滋养细胞结节减少,滋养层细胞代偿性增值得到改善。（4）各药物组血清ALT、AST、TP、ALB、GLB、BUN、Cr水平均得到不同程度的改善,血浆PT显着性降低。（5）药物组妊娠高血压大鼠血清中电解质Na+、K+、Cl-水平呈现不同程度升高。（6）药物组大鼠血浆AVP、AngⅡ、ET-1水平较模型组显着降低,TXA2/PGI2显着性降低,β-HCG、E水平明显降低。（7）各给药组大鼠肾组织V2R、e NOS蛋白表达浓度呈现降低趋势,胎盘组织VEGF蛋白表达浓度亦呈现升高趋势。结论:腹腔注射L-NAME可复制稳定的妊娠高血压大鼠模型。当归芍药散可明显降低改善妊娠高血压大鼠血压值,降低24h尿蛋白含量,改善肝肾功能,延缓病理进程,同时对伴随的电解质紊乱有较好的纠正作用,对妊娠高血压疾病有一定的治疗作用。
胡慧敏,马勇[3]（2014）在《妊娠高血压胎盘组织中sFlt-1mRNA表达和血浆NO水平的关系与意义》文中进行了进一步梳理目的:考察妊娠高血压胎盘组织中可溶性血管内皮生长因子受体-1mRNA（sFlt-1）表达和血浆NO水平的关系与意义。方法:收集行剖宫产结束分娩的妊高征患者96例,其中妊高征轻度组31例、妊高征中度组36例和妊高征重度组29例,并选择同期正常孕妇25例作为对照组。结果:4个组别胎盘sFlt-1 mRNA水平和血浆NO水平有统计学差异（P<0.05）,与对照组相比,妊高征的胎盘sFlt-1 mRNA水平较高,血浆NO水平较低;与轻度组相比,中度和重度组的胎盘sFlt-1mRNA水平较高（t=2.9,t=7.6,P<0.05）,血浆NO水平较低（t=4.2,t=14.3,P<0.05）,与中度组相比,重度组的sFlt-1 mRNA较高（t=4.8,P<0.05）,血浆NO水平较低（t=10.9,P<0.05）。胎盘sFlt-1 mRNA与血浆NO呈负相关关系（r=-0.72,P<0.05）。结论:胎盘sFlt-1 mRNA与血浆NO异常与妊高征密切相关。
邬俏璇[4]（2011）在《Syncytin在妊娠期高血压疾病胎盘组织中的表达及与围生结局的相关性研究》文中研究表明妊娠期高血压疾病（Hypertensive Disorder Complicating Pregnancy, HDCP）是妊娠期特有的疾病,我国报道发病率为9.4%,国外报道为7%-12%。妊娠高血压疾病严重影响母婴健康,是孕产妇和围生儿发病及死亡的主要原因之一。目前已有多方报道其可造成不良围生围产结局。该病病因至今尚未阐明,成为中外产科学的研究热点与难题。近年许多研究表明,某些胎盘特异基因及生长因子表达异常,子宫螺旋小动脉生理重铸障碍,滋养细胞侵润能力受损等均可导致“胎盘浅着床”。滋养细胞功能异常在妊娠期高血压疾病中起重要作用,被认为是关键环节,有研究人员由此提出胎盘或滋养细胞缺血学说。据报道,Syncytin在胎盘中有特异表达,能调控滋养细胞的侵入、分化。在胎盘形态发育,特别是细胞滋养细胞（CT）融合成合体滋养细胞（ST）的过程中,Syncytin起重要调节作用。研究认为妊娠早期到中期的胎盘组织中Syncytin mRNA的表达增加,这可能与合体滋养细胞、滋养细胞分化与融合活跃有关。已有研究表明,正常妊娠胎盘绒毛中, Syncytin蛋白定位在合体滋养细胞基底膜上；当发生先兆子痫时,Syncytin可迁移定位到合体滋养细胞顶端微绒毛膜上。这些研究表明Syncytin蛋白产物在细胞中的不同的定位与妊娠高血压疾病的病因有关联。Syncytin表达减少可能会导致合体滋养细胞形成减少,造成胎盘绒毛发育缺陷,细胞滋养融合与分化异常,血管功能紊乱,引起胎盘灌注减少、滋养细胞缺血等现象,并可导致子痫前期等妊娠期高血压疾病的发生本研究依照第6版《妇产科学》重新对妊娠期高血压疾病的命名与分类标准对实验进行分组。用Western blot与免疫组织化学实验方法测定对照组与妊娠期高血压疾病不同时期各组Syncytin蛋白表达的改变,判断是否因为临床分类的不同和病情的轻重有显着区别。同时,分析入选本研究病例的临床指标与母儿围产结局资料,主要是尿蛋白定量、血压、产后出血量、围生儿窒息程度、围生儿体重等,探讨妊娠期高血压疾病各期患者胎盘组织中Syncytin表达水平与母儿结局的关联性。胎盘构建紊乱导致的严重胎盘功能障碍是Syncytin系统表达改变的结果,它是人类胎盘形态和结构建成的重要因素。本研究探讨Syncytin在妊娠期高血压疾病各期的发生发展中起的作用,能为人们治疗胎盘发育以及胎盘功能异常相关疾病提供不同的视野,为妊娠期高血压疾病的预防与诊断治疗提供理论依据。研究方法选择2009年1月至2010年9月在深圳市各级医院产科住院的HDCP患者45例为病理组,诊断与分组参照有关标准。其中妊娠期高血压组10例；重度子痫前期组15例,轻度子痫前期组15例,子痫组5例。选择同期正常晚期分娩的孕妇20例（对照组）,所选病例无其它妊娠期合并症与并发症,各组年龄、孕周、孕产次构成等一般情况匹配,无统计学差异（P>0.05）。1.收集入选病例胎盘组织标本,采用Western blot法测定Syncytin蛋白表达强度,统计分析各组间差异。2.采用免疫组化方法判断Syncytin蛋白在胎盘组织中的定位及定性、半定量结果,了解其在不同病理组中的异常表达情况。3.统计分析Syncytin蛋白表达与妊娠期高血压疾病各组临床指标观察情况比较；Syncytin蛋白表达水平情况与尿蛋白定量、血压、产后出血量等指标的相关性；各组围生儿围生结局比较；Syncytin蛋白表达水平与新生儿窒息的关系；Syncytin蛋白表达水平与新生儿体重的关系。4.统计方法：采用SPSS13.0软件进行统计学分析,数据以均数±标准差（x±s）表示,多组间差异用单因素方差分析（one way-ANOVA）,方差不齐的用Dunnett’sT3方法进行检验；方差齐性检验采用Levene’s test,对于满足方差齐性的方差分析,用SNK检验进行两两比较；对于不满足方差齐性的方差分析,用Tamhane法进行两两比较；涉及等级数据用K独立样本秩和检验,采用pearson方法进行直线相关性分析,必要时做曲线拟合相关分析,选择a=0.05作为检验标准。结果1.五组均检测到Syncytin蛋白的表达；子痫组Syncytin蛋白表达强度最低（8.18±0.58）,重度子痫前期组（9.11±0.43）、轻度子痫前期组（10.84±0.84）、妊娠期高血压组（11.41±0.42）均显着低于正常晚期妊娠组（20.09±2.23）,有统计学意义（F=145.302,P=0.000）；病理组各组间子痫组与重度子痫前期组无明显差异（P=0.128）,轻度子痫前期与妊娠期高血压组无差异（P=0.288）,其余组别两两之间均有显着性差异（P=0.000）。2.从免疫组织化学实验结果中可以看到Syncytin蛋白定位于胎盘组织滋养细胞的细胞浆内。Syncytin蛋白强阳性反应呈棕黄色,五组胎盘组织中Syncytin蛋白阳性率为100%,其中正常妊娠组的染色结果以（+++）为多见,轻度子痫前期组的染色结果以（+-++）多见,而子痫组与重度子痫前期组的染色结果以（+/—-+）多见,妊娠高血压组的染色结果以（++-+++）。3.在妊娠期高血压疾病中,各组与对照组相比,24h尿蛋白定量差异显着（F=31.564,P=0.000）：Syncytin蛋白的表达与24h尿蛋白定量存在显着负相关性（r=—0.902,P=0.000）。4.各组间收缩期血压、舒张期血压均有显着差异（F=71.156,14.611；P=0.000,0.000）。Syncytin蛋白表达与收缩压、舒张压进行直线相关分析,然后进行曲线拟合,可以得出Syncytin蛋白表达与收缩压（r2=0.742：F=181.275,y=e（4.305+6.441/x）,P=0.000）,舒张压（r2=0.400,F=42.040,Y=252.09—31.048x+1.828x2—0.36x3,P=0.000）呈显着负相关关系,Syncytin蛋白表达与收缩压、舒张压的相关性均有统计学意义。5.本研究中统计分析各组产妇产后出血量有显着性差异（F=3.233,P=0.000）。进一步分析Syncytin蛋白表达与产后出血量的相关性,结果显示无统计相关性（r=—0.253,P=0.042）。6.本研究结果显示轻度子痫前期组新生儿体重低于正常对照组（3240±639g,P<0.05）,重度子痫前期组患者的新生儿体重显着低于正常组（2890±624g,P<0.05）；妊娠高血压组的新生儿体重是（3205±590g,P<0.05）；而子痫组仅有（1980±609g,P<0.05）,正常对照组新生儿体重是（3448±310g）,各组间新生儿体重与窒息程度均有显着差异（F=8.286,P=0.000）。7.妊娠期高血压各组中有7例新生儿轻度窒息,3例重度窒息,特别是子痫组,有3例死胎（60%）,各组间窒息程度有显着差异,有统计学意义（H=11.969,P=0.018）：Syncytin蛋白的表达与新生儿窒息程度无统计相关关系（r=0.376,P=0.002）。妊娠期高血压疾病患者的新生儿体重与Syncytin蛋白的表达水平无统计相关关系（r=0.395,P=0.001）,但Syncytin蛋白表达有随体重增加而增加的趋势。结论1.本研究证实：Syncytin在正常孕妇与妊娠期高血压疾病患者胎盘滋养细胞中均有表达。再次证明人类胎盘组织中可以表达Syncytin基因。研究结果表明妊娠期高血压疾病患者四组的胎盘滋养细胞中的Syncytin表达水平比正常对照组明显下调；提示Syncytin蛋白不但参与整个妊娠期间滋养细胞的调控,还可能参与妊娠期高血压疾病的发病。2.本研究发现子痫组与重度子痫前期组Syncytin蛋白表达显着低于正常晚期妊娠组,提示随着疾病的发病和病情的加重,胎盘滋养细胞侵润能力也明显下调。Syncytin蛋白表达减少与滋养细胞侵润能力下调密切相关,可能是胎盘合体滋养细胞形态异常、形成减少,造成螺旋小动脉重铸障碍,胎盘浅着床,胎盘缺氧缺血的原因之一,可能在妊娠期高血压疾病的发生起重要作用。研究结果还发现Syncytin的表达在病理组各组间子痫组与重度子痫前期组无显着差异,在轻度子痫前期与妊娠期高血压组也无差异,其余两两组间Syncytin蛋白表达均有显着差异。这些结果提示胎盘特异性的Syncytin可能在人类胎盘中具有某些未知的功能,而且猜测在妊娠期高血压疾病胎盘中Syncytin表达减少不仅仅是一种原发于该病的胎盘病理改变的因素,极有可能还进行—些特殊的调控。进一步说明Syncytin不单只与妊娠期高血压疾病的发病机制有密切关系,同时是疾病发展程度的一个重要表达指标,在妊娠期高血压疾病的发生发展中扮演了重要的角色。在今后的研究中将进一步研究Syncytin在妊娠期高血压疾病的发病与发展中的调控机制。3.本研究结果表明,在妊娠期高血压疾病中,各组与对照组相比,24h尿蛋白定量有显着差异,可以考虑为由于疾病的发展,肾脏负荷增加,肾滤过率增加白蛋白从肾小球漏出增加所致,有不同程度的肾小球损伤或肾小球和肾小管混合性损伤。Syncytin蛋白的表达与24h尿蛋白定量存在显着负相关关系,从中可以猜测妊娠期高血压疾病患者Syncytin蛋白表达下调、尿中白蛋白相对含量增加与病情进展密切相关。4. Syncytin蛋白表达与收缩压、舒张压存在显着负相关关系,可以猜测为Syncytin表达下降,胎盘绒毛浅着床及血管痉挛导致胎盘灌流减少,胎盘血管内皮受损及一些血浆成分沉积于血管壁,使得胎盘血管出现类似急性动脉粥样硬化症状,导致血压升高。另外,从研究结果可以看出收缩压在本疾病表现的体征中更灵敏,数值变化更显着,在临床分组与诊断中收缩压数值更能体现病情的发展程度。5. Syncytin蛋白表达与产妇产后出血量无显着相关性,其原因可能与临床积极干预、预防产后出血有关,但应重视医源性因素导致剖宫产率增加,间接增加产后出血的风险。6.本研究结果显示新生儿窒息程度越重,Syncytin蛋白的表达水平也随之下调；随着新生儿体重的降低,Syncytin蛋白的表达水平也在降低,均表明妊娠期高血压疾病严重危害围生儿,造成围生结局不良。这可能与该病的典型病例生理表现：螺旋小动脉痉挛,重铸障碍,胎盘缺血缺氧血液循环不良,导致胎盘储备能力下降有关。发生在妊娠期高血压疾病患者新生儿窒息的原因,大多数学者认为与血管痉挛,绒毛间隙血流急剧下降和中断,胎盘绒毛膜携氧能力下降,影响胎盘血流灌注,导致胎儿宫内缺氧及新生儿窒息。妊娠期高血压疾病的基本病变是全身小动脉痉挛以及血流动力学改变,这种改变使孕妇全身各器官及胎盘血栓形成、组织缺血、坏死,对于严重还存在粥样硬化的胎盘,胎盘绒毛广泛梗死,功能不全,使胎儿对营养物质的摄取受到影响,随着孕周延长胎儿在宫内缺氧严重,生长受限,甚至发生胎死宫内。综合本研究以上研究结果,Syncytin蛋白的表达特点是随着病情的发展逐渐下调,月Syncytin蛋白表达下调与妊娠期高血压疾病的病情发展相一致,呈阶梯式进展；Syncytin蛋白表达下调与患者尿蛋白定量增加呈显着负相关关系；Syncytin蛋白表达与收缩压、舒张压存在显着负相关关系；另外,从研究结果可以看出收缩压在本疾病表现的体征中更灵敏,数值变化更显着,在临床分组与诊断中收缩压数值更能体现病情的发展程度；Syncytin蛋白表达与产妇产后出血量无显着相关性,其原因可能与临床积极干预、预防产后出血有关,但应重视医源性因素导致剖宫产率增加,间接增加产后出血的风险；妊娠期高血压疾病组的婴儿在体重、新生儿窒息评分方面均明显低于正常对照组婴儿,表明妊娠期高血压疾病严重危害围生儿,造成不良围生结局。
毛路一[5]（2011）在《ApoE和iNOS敲除小鼠子痫前期动物模型的建立和胎盘功能异常的研究》文中提出子痫前期（pre-eclampsia, PE）是在妊娠20周后出现的以高血压、蛋白尿和水肿为特征的妊娠期常见疾病,PE对母体和胎儿的健康造成较大的伤害,也是导致孕妇及围生儿发病和死亡的主要原因之一。目前对子痫前期发病机制国内外已经有较深较广泛的研究并提出多种学说,但任何一种学说都不能完全解释子痫前期的病因,在众多的子痫前期的发病机制中,内皮损伤学说越来越受到重视,认为血管内皮细胞损伤是子痫前期发病的中心环节。前期研究表明血管活性物质NO以及血脂代谢异常和内皮细胞功能异常有直接的关系。本实验拟用和脂代谢密切相关的载脂蛋白E（apolipoprotein E, ApoE）及和NO相关的诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase, iNOS）敲除小鼠研究子痫前期的发病机制。具体包括以下几个方面：首先通过ApoE基因敲除小鼠；iNOS基因敲除小鼠及ApoE、iNOS双基因敲除小鼠尝试建立子痫前期的动物模型。其次用HE染色和透射电镜法观察胎盘的病理变化和用Western Blot法检测各组小鼠胎盘中和炎症相关蛋白及和凋亡相关蛋白的表达,从而阐明ApoE和iNOS导致的胎盘结构和功能的异常在子痫前期发病中的作用及可能机制。第一部分ApoE基因和子痫前期发病的关系第一节ApoE基因敲除小鼠子痫前期动物模型的建立目的：观察ApoE基因缺失后孕鼠是否存在血压升高,尿蛋白和胎儿宫内生长受限等子痫前期样症状的表现。方法：实验动物：ApoE-/-（ApoE deficient homozygote, ApoE基因缺失纯合子）小鼠和野生型小鼠（wildtype, WT）由南京模式动物中心直接获得,将ApoE-/-小鼠和WT小鼠交配得到ApoE+/-小鼠（ApoE deficient heterozygote, ApoE基因缺失杂合子）。根据基因型将21只孕鼠分为ApoE-/-组,ApoE+/-组和WT组（各组N=7）。实验前用PCR（polymerasechain reaction）法扩增相应的基因片段测各组小鼠的基因型；将相同基因型的小鼠交配后,于妊娠第19天小鼠眼球取血,酶标法测定小鼠孕末期血脂：总胆固醇（total cholesterol, TC）,甘油三酯（triglyceride, TG）,低密度脂蛋白（lowdensity lipoprotein, LDL）和高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL）。从妊娠开始每4天测量小鼠孕期尾动脉收缩血压,考马斯亮兰法从妊娠第4天开始每4天进行孕鼠孕尿蛋白定量,于第19天剖宫产取出胎鼠称量胎鼠出生体重、胎盘重量比较各组小鼠孕期生理指标的变化。结果：①ApoE-/-组小鼠基因PCR扩增显示特征性片段,鉴定实验用小鼠基因为ApoE基因缺失纯合子和杂合子；小鼠妊娠末期ApoE-/-组和WT组相比血清TC、TG、LDL明显升高但HDL水平明显下降（P<0.05或0.01）。小鼠妊娠末期血压（第12天129.3±15.7mmHg,第16天121.7±5.8mmHg）升高及尿蛋白水平（455.3±107.2mg/L）高于WT小鼠（P<0.05）；胎鼠体重（1004±130mg）和胎盘重量（110±7.2mg）均小于WT组（P<0.01）。②ApoE+/-组小鼠基因PCR扩增显示特征性片段;TG高于WT组（P<0.05）,TC,HDL,LDL均没有明显改变（P>0.05）。ApoE+/-组妊娠期血压、蛋白尿及胎鼠体重和胎盘重量和WT组相比无统计学差异（P>0.05）。结论：ApoE-/-小鼠出现子痫前期症状,ApoE在子痫前期的发病中起到重要作用。第二节ApoE敲除小鼠胎盘炎症及凋亡相关蛋白表达的变化目的：观察胎盘凋亡及炎症反应的变化探寻其可能的发病机制。方法：首先胎盘HE染色观和透射电镜方法观察胎盘宏观和微观结构变化；再用Western Blot法检测胎盘肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介-6（interleukin-6,IL-6）、核因子转录因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）,和凋亡相关蛋白bax、B细胞淋巴瘤/白血病-2（B cell lymphoma/lewkmia-2,BCL-2）、半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）表达水平,观察和比较三组小鼠胎盘炎症反应及凋亡情况。结果：①HE染色观察到ApoE-/-小鼠胎盘细胞的肿胀和坏死,电镜下观察胎盘绒毛血管内皮与WT组相比有明显细胞器形态改变和染色质异常。ApoE-/-妊娠鼠胎盘组织中炎症相关因子IL-6（0.917±0.153）.TNF-α（0.453±0.020）、NF-κ b（1.602±0.234）和凋亡相关蛋白Bax（0.789±0.149）、bcl-2（0.977±0.349）,Caspase-3（2.132±0.173）的表达以及Bax/bcl-2（0.897±0.301）比值均明显高于对照组（P<0.05或P<0.01）。②ApoE+/-组胎盘HE染色光镜下观察和电镜下观察均没有发现明显异常。胎盘除TNF-α和表达高于WT组外,Bcl-2,TNF-α,Caspase-3,IL-6、 NF-κB表达和WT组没有差异。结论：ApoE小鼠胎盘部位的炎症反应及细胞凋亡可能在子痫前期的发病中起到重要作用。第二部分iNOS基因与子痫前期发病的关系目的：观察iNOS基因缺失后孕鼠是否存在血压升高,尿蛋白和胎儿宫内生长受限等子痫前期样症状的表现。并观察胎盘细胞凋亡及炎症反应探寻其可能的发病机制。方法：实验动物：iNOS;（iNOS deficient homozygote, iNOS基因缺失纯合子）小鼠和WT小鼠由南京模式动物中心直接获得,将iNOS-/-小鼠和野生型小鼠（wildtype,WT）小鼠交配得至JiNOS+/-小鼠（i NOS deficient heterozygote,基因缺失杂合子）。根据基因型将21只孕鼠分为iNOS-/-组,iNOS+/-组和WT小鼠组（各组N=7）。实验前用PCR法检测小鼠基因型。将基因型相同的雌鼠和雄鼠交配后,从妊娠0天开始每四天测量小鼠孕期尾动脉收缩血压,考马斯亮兰法从妊娠第4天开始每4天进行孕鼠孕尿蛋白定量,于第19天剖宫产取出胎鼠称量胎鼠出生体重、胎盘重量比较各组小鼠孕期生理指标的变化。硝酸还原法测定小鼠血清和胎盘中NO浓度。胎盘HE染色和透射电镜方法观察胎盘宏观和微观结构变化；用Western Blot法检测胎盘TNF-α、IL-6、NF-κB和凋亡相关蛋白bax、BCL-2、caspas-3表达水平,观察和比较三组小鼠胎盘炎症反应及凋亡情况。结果：①iNOSE-/-组PCR扩增显示特征性片段,鉴定小鼠基因型为iNOS基因缺失纯合子和杂合子。iNO小鼠孕期血压尿蛋白水平,胎盘和胎鼠重量及血清胎盘NO水平和WT相比没有统计学意义。iNO组电镜下和HE染色均可见胎盘毛细血管增生。iNOS-/-组除了胎盘NF-κb的蛋白的表达高于WT组（P<0.05）但TNF-α、bax、IL-6、caspase-3表达及Bax/Bcl-2和WT组相比无明显差（P>0.05）。②iNOS+/-组PCR扩增显示特征性片段,iNOS+/-小鼠孕期血压尿蛋白水平,胎盘和胎鼠重量及血清胎盘NO水平和WT相比也没有统计学意义。iNOS+/-组和WT相比电镜下结构无明显差别,除了Bcl-2表达高于WT组外（P<0.05）。TNF-α、IL-6、 NF-κB、Bax、caspase-3的表达和WT组相比无明显差别。结论：iNOS敲除小鼠没有出现子痫前期,iNOS基因和子痫前期之间没有直接的联系。第三部分ApOE和iNOS基因的相互作用及与子痫前期发病的关系目的：观察iNOS和ApoE基因都缺失后孕鼠是否发生血压升高,尿蛋白和胎儿宫内生长受限等子痫前期样症状的表现,并观察胎盘凋亡及炎症反应探寻这两种基因的联合作用在子痫前期发病中的作用。方法：ApoE和iNOS双基因敲除小鼠由ApoE和liNOS单基因敲除小鼠,交配得到ApoE+/-iNOS+/-小鼠（双杂合子小鼠）,再进一步杂交得到纯合子ApoE-/-iNOS-/-小鼠（iNOS,ApoE双基因敲除纯合子小鼠）：根据小鼠基因型分为ApoE-/--组,iNOS-/-组,ApoE-/-iNOS-/和WT组各组（N=7）.PCR验证各组小鼠的基因型。实验前用PCR法扩增相应的基因片段测各组小鼠的基因型,酶标法测定小鼠孕末期血脂,硝酸还原法测定小鼠血清和胎盘中NO浓度；将相同基因型的雌鼠和雄鼠交配后,从妊娠0开始每4天测量小鼠孕期尾动脉收缩血压,考马斯亮兰法从妊娠第4天开始每4天进行孕鼠孕尿蛋白定量,于第19天剖宫产取出胎鼠称量胎鼠出生体重、胎盘重量比较各组小鼠孕期生理指标的变化。胎盘HE染色和透射电镜方法观察胎盘宏观和微观结构；用Western Blot法检测胎盘肿瘤坏死因子TNF-α、IL-6、 NF-κB,和凋亡相关蛋白bax、BCL-2、caspase-3表达水平,观察和比较三组小鼠胎盘炎症反应及凋亡情况。结果：①PCR扩增片段证实为ApoE基因敲除和iNOS基因敲除的特征片段,证实小鼠为ApoE和iNOS双基因敲除小鼠。ApoE-/-iNOS-/-组血清血脂变化显着TG、TC、LDL明显升高而HDL则降低（P<0.01）； ApoE-/-iNOS-/-组TG、LDL水平高于和ApoE-/-组而HDL则有所下降（P<0.05）.ApoE-/-iNOS-/-胎盘和血清NO浓度均低于ApoE-/-组（P<0.05）.ApoE-/-iNOS-/-组胎盘NO（10.5±1.9μmol/g）血清NO浓度（14.2±1.6μmol/L）氏于WT组和ApoE-/-组（VS WT:P<0.01:V.S ApoE-/-P＜0.05）. ApoE-/-iNOS-/-孕期血压呈逐渐上升趋势,血压妊娠第4天血压（117.9±13.4mmHg）就开始高于WT组（P<0.05）,随着妊娠的发展血压逐渐上升,且在孕末期高于ApoE-/-组（P<0.05）。孕末期尿蛋白第（第12天432.7±63.56mg/L第16天603±73.18mg/L）高于WT（P<0.05和P<0.01）,且高于ApoE/-组（P<0.05）。小鼠胎盘重量胎鼠体重不仅低于WT组（P<0.01）,也低于ApoE-/--组（P<0.05）。②ApoE-/-NOS-/-组HE染色见胎盘有显着胎盘细胞凋亡和毛细血管壁损伤,电镜下见胎盘血管内皮细胞损伤和滋养细胞凋亡显现象。炎症相关蛋白：ApoE-/-iNOS-/-组IL-6（0.744±0.101）、TNF-α（0.683±0.102）、NF-κB（2.376±0.259）的表达均明显高于WT组（P<0.01或P<0.05）.ApoE-/-i NOS-/-组TNF-α、NF-κB的表达高于ApoE-/-组（P<0.05）,但IL-6的表达低于ApoE-/-组,但无统计学意义（P>0.05）。凋亡相关蛋白：ApoE-/-iNOS-/-组胎盘Bax（1.692±0.214）、Bcl-2（0.405±0.099）. Caspase-3（2.438±0.520）及Bax/Bcl-2（4.409±1.580）比值均明显高于WT组（P<0.01或P<0.05）。且Bax的表达及Bax/Bcl-2比值高于ApoE-/-（P<0.05）,Bd-2及caspase-3的表达水平和ApOE-/-组相比无明显差别（P<0.05）。结论：ApoE-/-iNOS-/-小鼠子痫前期样症状加重,iNOS在子痫前期的疾病的发展的中起到一定的保护作用。
姜丽萍[6]（2009）在《Ghrelin对VEGF、Flt-1在正常妊娠和妊高症胎盘中的表达调节研究》文中研究表明胎盘正常形成发育与毛细血管发育关系密切,在正常妊娠中出现“两次生理性血管重铸”。妊高症（Pregnancy-induced hypertension,PIH）存在血管发生和功能障碍。VEGF作为重要血管生长因子之一,与受体Flt-1结合,在调节胎盘血管发育和PIH发病中发挥重要的作用,受多种因子调控,如:GH、leptin、NO、ET-1等。Ghrelin是神经内分泌调节因子,可刺激GH的分泌,改善内皮功能、增加内皮NOS合成和分泌,是内皮素的内源拮抗剂,能够刺激内皮细胞一氧化氮合成,进而改善内皮功能,舒张血管。目前,关于Ghrelin与VEGF及其受体Flt-1在胎盘组织中表达的相关性,以及Ghrelin是否通过调控VEGF及其受体Flt-1表达,进而调节血管舒张因子NO、NOS的释放,来参与胎盘血管形成发育还未见报道,本文首先利用免疫组化、实时荧光定量PCR、硝酸盐还原酶法检测正常妊娠胎盘组织中Ghrelin、VEGF、Flt-1基因表达的相关性及与血管活性因子NO及NOS释放量的关系;然后,利用反义寡核苷酸技术（Antisense oligonucleotide technology,ASODN）从细胞水平研究反义抑制Ghrelin后对VEGF、Flt-1、NO、NOS的调节作用;最后,联合上述技术研究了正常孕妇和妊高症孕妇胎盘中Ghrelin、VEGF、Flt-1、NO、NOS的关系,进一步深入探讨Ghrelin调节通路在妊娠胎盘血管形成发育及PIH发病机制中的作用。结果如下:1.Ghrelin与VEGF及其受体Flt-1在胎盘组织中表达的相关性（1）首先采用SP免疫组化法检测了Ghrelin与VEGF及其受体Flt-1在正常妊娠各期6-8周、9-10周绒毛、11-15周、16-20周和21-30周、31-38周胎盘组织中Ghrelin、VEGF、Flt-1蛋白水平的表达特点,蛋白定位检测结果显示,正常妊娠过程中不同孕期绒毛和胎盘组织中均有Ghrelin和VEGF、Flt-1蛋白表达,阳性颗粒主要定位在细胞滋养细胞、绒毛内血管内皮细胞和周围的间质细胞胞浆中。在妊娠不同阶段呈现动态变化,即在妊娠早期9-10周,妊娠16-20周阳性颗粒表达与其他阶段比较差异有显着性（p＜0.05）,阳性信号明显增强,与两次“胎盘血管生理性重铸”时间相吻合,提示Ghrelin与VEGF、Flt-1在正常妊娠各阶段蛋白水平表达动态变化可能具有相关性。（2）然后,采用实时荧光定量PCR（Real-time quantitative PCR,RQ-PCR）技术检测妊娠6-8周、9-10周绒毛、11-15周、16-20周和21-25周、26-30周、31-38周胎盘组织中Ghrelin、VEGF、Flt-1 mRNA表达的变化,进一步证实:Ghrelin和VEGF、Flt-1 mRNA表达与上述蛋白表达具有相似的时空特异性,即在妊娠早期9-10周,妊娠16-20周呈现大幅度的增高,呈现两个表达高峰,与两次“胎盘血管生理性重铸”时间相吻合,从时空变化的角度验证了两者的相关性,说明在正常妊娠过程中胎盘Ghrelin、VEGF、Flt-1可能通过潜在的相互调节作用,参与胎盘血管的形成和发育。2.NO释放量及NOS活力在正常妊娠各期的变化规律为了探讨NO释放量及NOS活力在正常妊娠各期的变化规律,其变化规律与Ghrelin、VEGF的变化是否有关,采用硝酸盐还原酶法检测了NO、NOS在正常妊娠各期的释放水平的变化,结果提示:NO释放含量及NOS活力在正常妊娠各期呈现规律性变化,即在妊娠早期9-10周,妊娠16-20周、妊娠31-38周出现三次高峰,提示:NO和NOS释放量与Ghrelin、VEGF、Flt-1的表达有相关性,而孕晚期高峰的出现可能与分娩启动与子宫平滑肌松弛有关,可能由其他的调节机制影响。3.反义抑制Ghrelin对VEGF、Flt-1蛋白及mRNA表达以及NO、NOS释放水平的影响为了进一步验证Ghrelin、VEGF、Flt-1在胎盘血管形成发育过程中相互作用机制,利用反义寡核苷酸技术反义抑制Ghrelin转录,从细胞水平检测Ghrelin对体外培养的人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）中VEGF及其受体Flt-1蛋白及mRNA表达以及NO、NOS释放水平的影响,通过改变体外培养的反义寡核苷酸浓度和培养的不同时间确定最佳抑制Ghrelin条件为:浓度20μmol/L、培养时间:36h。有效抑制Ghrelin转录,检测Ghrelin对HUVEC中VEGF、Flt-1蛋白和mRNA表达的影响。结果显示:反义抑制Ghrelin后VEGF、Flt-1蛋白和mRNA的表达均下降,与空白对照组和SCON组比较均有显着性差异（p＜0.05）;NO释放量与NOS活力在反义抑制Ghrelin后释放水平也显着下降（p＜0.05）。体外研究证明,反义抑制HUVECGhrelin后可下调VEGF,Flt-1蛋白和mRNA的表达,同时下调NO释放量和NOS活力水平。4.在以上实验的基础上,为探讨Ghrelin在PIH孕妇发病过程中的作用,联合采用免疫组化法、RQ-PCR、硝酸盐还原酶法技术检测了Ghrelin、VEGF、Flt-1及NO、NOS在正常孕妇与PIH孕妇胎盘的表达情况。结果证实:PIH孕妇胎盘组织中Ghrelin,VEGF、Flt-1蛋白和mRNA水平下降与正常孕妇比较有显着性差异（p＜0.05）;提示在PIH发病过程中Ghrelin可能对VEGF,Flt-1蛋白和mRNA的表达具有下调作用,进而影响胎盘血管网的形成和发育;NO含量与NOS活力水平在PIH孕妇胎盘组织中下降,提示Ghrelin可能通过下调VEGF的表达进一步影响血管舒张因子NO水平下降,进而引起胎盘血管痉挛,血压升高,最终导致PIH的发生。综合以上分析,本研究利用免疫组化、实时荧光定量PCR、细胞培养、反义寡核苷酸、硝酸盐还原酶技术检测了Ghrelin、VEGF、Flt-1及NO、NOS在正常妊娠与PIH孕妇胎盘以及反义抑制Ghrelin体外培养HUVEC中的表达情况,研究结果充分表明:Ghrelin与VEGF、Flt-1及NO、NOS在正常妊娠各阶段的表达具有相似的时空特异性,并与两次“胎盘血管生理性重铸”时间相吻合,推测Ghrelin在妊娠胎盘血管形成和发育中可能具有一定的作用;反义抑制HUVEC Ghrelin后可下调VEGF,Flt-1蛋白和mRNA的表达,同时下调NO释放量和NOS活力水平;PIH孕妇胎盘组织中Ghrelin,VEGF、Flt-1蛋白和mRNA水平以及NO释放量与NOS活力水平明显下降。以上结果说明,Ghrelin在正常妊娠胎盘血管形成发育以及PIH疾病发病中具有一定的作用,这为深人探讨Ghrelin在生殖和临床妇产科疾病的发生、发展及治疗提供了一个可能的新的研究方向。
吴黎[7]（2008）在《内源性哇巴因在妊娠期高血压疾病发病机理中的作用研究》文中研究说明第一部分抗哇巴因多克隆抗体的制备目的:制备抗哇巴因多克隆抗体。方法:选择6只45月龄、体重为2～2.5公斤雄性健康日本大耳白兔,采用过碘酸钠氧化法偶联Ouabain和OVA/BSA合成Ouabain-OVA和Ouabain-BSA完全抗原。利用Ouabain-BSA完全抗原免疫日本大耳白兔制备哇巴因抗血清;采用饱和硫酸铵沉淀法联合DEAE-D52阴离子纤维素离子交换层析法纯化哇巴因多克隆抗体,经SDS-PAGE法检测抗体纯度, ELISA法检测抗体效价、分装或冷冻干燥-20℃保存备用。结果:过碘酸钠氧化法偶联合成的Ouabain-OVA和Ouabain-BSA完全抗原的偶联率分别为1:14和1:18; Ouabain-BSA完全抗原免疫日本大耳白兔获得的Ouabain抗血清经纯化后得到Ouabain多克隆抗体,其纯度高,效价为1:500。结论:过碘酸钠氧化法合成的Ouabain-BSA完全抗原能有效免疫日本大耳白兔获得Ouabain抗血清;序贯采用饱和硫酸铵沉淀法和DEAE-D52阴离子纤维素离子交换层析法纯化Ouabain抗血清能获得高纯度、高效价的Ouabain多克隆抗体。第二部分内源性哇巴因与妊娠期高血压疾病的相关性研究目的:通过观察内源性哇巴因（EO）在不同病程妊娠期高血压疾病（HDCP）患者胎盘组织中的表达以及在孕妇外周血和新生儿脐血中的水平变化,证实EO在胎盘组织中的表达及其在血清中的水平与HDCP发生发展的相关性,并初步探讨胎儿-胎盘分泌EO的可能性。方法:选择30例正常晚期妊娠妇女为对照组,30例HDCP患者为病例组;病例组分为妊娠期高血压组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组,每组10例。采用免疫组织化学S-P法、免疫荧光组织化学染色法（IFH）观察EO在胎盘组织的表达;采用竞争性ELISA法检测孕妇外周血和新生儿脐血中EO的水平。结果:①病例组各组EO在胎盘组织的表达明显高于对照组（P<0.01）,且随着病程的加重,EO的表达逐渐增强（P<0.01）;②病例组孕妇外周血/新生儿脐血的EO水平显着高于对照组,并且随着疾病的发展,EO的含量逐渐增加（P<0.01）;③新生儿脐血EO水平均显着高于产前孕妇外周血（P<0.01）,且孕妇外周血EO水平在产后第三天明显降低（P<0.01）。结论:EO在HDCP患者胎盘组织中的表达明显增强,且其表达强度与病程的发展呈明显的正相关;孕妇外周血及新生儿脐血中EO水平显着升高,与病程的发展亦呈明显的正相关,产后3天孕妇外周血中EO水平明显下降。提示:EO直接参与了妊娠高血压疾病的病理调控。此外,本研究还显示,各组新生儿脐血中EO水平均明显高于孕妇外周血EO水平,提示:胎儿-胎盘单位可能分泌EO,加剧孕妇外周血EO水平的升高,共同参与妊娠高血压疾病的病理调控过程。第三部分内源性哇巴因在妊娠高血压疾病发生发展中的病理调控机制研究目的:探讨EO在HDCP中的病理调控机制。方法:选择30例正常晚期妊娠妇女为对照组,30例妊娠高血压疾病患者为病例组;病例组分为妊娠期高血压组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组,各组10例。采用S-P法、免疫荧光组织化学染色法（IFH）观察EO受体Na+/K+ ATPase-α1 subunit （NKA-α1）在胎盘组织中的表达,同时采用定磷法检测孕妇外周血红细胞Na+/K+ ATPase （NKA）的活性;硝酸还原酶法、ELISA法分别检测孕妇外周血和新生儿脐血中NO和ET-1的水平。结果:①病例组各组EO的受体NKA-α1在胎盘组织的表达显着低于对照组,且随着疾病的发展,表达强度逐渐减弱（P<0.01）。②病例组各组孕妇外周血红细胞膜NKA活性显着低于对照组,且随着疾病的加重,其活性逐渐减弱（P<0.01）。③病例组孕妇外周血/新生儿脐血的ET-1水平显着高于对照组（P<0.01）;而NO水平明显低于对照组（P<0.01）。此外,病例组和对照组的脐血ET-1水平均显着高于孕妇外周血（P<0.01）,而NO水平则明显低于孕妇外周血（P<0.01）。④结合前期实验结果,EO的表达强度、孕妇外周血血清EO的水平均与NKA-α1的表达强度、孕妇外周血红细胞膜NKA活性呈负相关（P<0.01）;本研究同时还证实EO表达强度、孕妇外周血血清EO的水平均与ET-1呈正相关（P<0.01）,与NO呈负相关（P<0.01）。结论:EO的受体NKA的活性及其α1亚基在妊娠高血压疾病患者胎盘组织中的表达随着疾病的加重而降低,且EO的表达及血清EO水平与ET-1/NO的失衡有显着的相关性,提示:EO一方面可能通过抑制NKA-α1的表达以及NKA的活性参与妊娠高血压疾病的发生发展,另一方面则通过影响血管内膜ET-1/NO的分泌表达导致或进一步加剧血管内膜ET-1/NO的失衡参与妊娠高血压疾病的病理调控。
廖予妹[8]（2007）在《Apelin在正常妊娠及妊娠期高血压疾病胎盘组织中的表达及其与一氧化氮关系的研究》文中进行了进一步梳理研究背景妊娠期高血压疾病（HDCP）是一种发生在妊娠中晚期的常见并发症,是孕产妇和围生儿发病及死亡的主要原因,由于其病因及发病机理仍不明确,目前尚无一种确切而有效的预防和治疗方法。近两个世纪以来,国内外学者对有关妊娠期高血压疾病的病因及发病机理进行了大量研究,根据流行病学调查和实验研究提出了多种病因学假说,如:免疫学说、胎盘浅着床学说、血管内皮受损学说、遗传学说、营养缺乏学说、胰岛素抵抗学说等。大量研究表明,妊娠期高血压疾病基本发病机制为广泛的血管内皮细胞损伤。维持内皮细胞正常功能的几大因子平衡失调是该病发病的关键,主要有一氧化氮（nitric oxide,NO）和内皮素（ET）、前列环素（PGI2）、血栓素A2 （TXA2）、纤溶酶原激活抑制因子（PAI）和组织纤溶酶原激活因子（tPA）等。平衡失调的直接后果是缩血管因子（ET和TXA2）分泌增加,扩血管因子（NO和PGI2）分泌减少,导致患者出现全身小动脉痉挛,使各脏器的血流灌注减少。目前,多数学者们认为胎盘缺血缺氧是导致内皮细胞激活和损伤的更深层次原因,它在妊娠期高血压疾病的发病机制中应该更接近于起始病因。探讨胎盘缺血缺氧的有关因素,将有可能为该病的防治提供新的思路。Apelin为新近发现的一种血管活性多肽,是孤儿G蛋白偶联性受体APJ的内源性配体,具有扩张血管、增强心肌收缩力、促进NO合成的特性,在调节水盐代谢以及介导免疫调节方面也起重要作用。已确认Apelin多肽存在多种亚型,其中以Apelin-36及Apelin-13较为常见,目前对Apelin及其受体APJ的研究刚刚开始,在妊娠方面的研究报道极少。NO是血管内皮源性舒张因子,在调节胎儿胎盘循环中起重要作用。胎盘是妊娠期一氧化氮合成的主要场所,NOS是NO合成的最重要的限速步骤,以往的研究证实妊娠期NO合成减少与HDCP发病密切相关,有关Apelin与胎盘绒毛组织NO生成的关系未见报道。妊娠期高血压疾病是妊娠期特有疾病,而胎盘是妊娠期特有的器官,因此研究胎盘的生理生化改变,将有可能发现引起子宫胎盘缺血缺氧及血管内皮细胞受损的真正原因。本课题选择胎盘为研究对象,采用免疫组织化学方法和实时荧光定量聚合酶链反应（荧光定量RT-PCR）检测Apelin、APJ在绒毛及胎盘组织中的表达、硝酸还原酶法检测胎盘组织NO的水平,分光光度法测定胎盘组织中NOS的活性。探讨Apelin在妊娠期高血压疾病中的作用及其与NO之间的关系。并采用Apelin-36对体外培养的胎盘绒毛进行干预,观察Apelin对胎盘绒毛NO-NOS的影响,以期为妊娠期高血压疾病的防治提供新的思路。本研究内容包括三部分,现概述如下:第一部分Apelin及受体APJ在正常妊娠早孕绒毛和晚孕胎盘及脐血管组织中的表达及定位研究目的探讨血管活性肽Apelin及其受体APJ在早期妊娠绒毛、晚期妊娠胎盘及脐血管组织中的表达和定位。方法分别取10例妊娠7～9周妇女（早孕组）的绒毛组织和15例妊娠37～41周（晚孕组）妇女的胎盘及脐带组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法（荧光定量RT-PCR）及免疫组织化学染色分析法（SP）检测两组孕妇胎盘Apelin及其受体APJ mRNA和蛋白的表达情况,并用高清晰度彩色图文分析系统（HPIAS - 1000）对其进行定量分析。同时用免疫组织化学染色分析法观察Apelin-36及其受体APJ在正常妊娠脐带血管组织中的定位表达情况。结果（1）荧光定量RT-PCR结果显示,晚孕组胎盘绒毛组织Apelin mRNA水平显着高于早孕组绒毛组织（P<0.05）,而APJ mRNA在不同妊娠期绒毛组织中的差异无统计学意义（P >0.05）。（2）免疫组化研究结果显示,Apelin-36在早孕绒毛组织中的表达部位为绒毛合体滋养细胞及细胞滋养细胞,少数间质细胞中也可见到Apelin-36弱阳性表达;在晚孕胎盘组织中,主要表达于胎盘滋养细胞,部分血管内皮细胞及少数间质细胞也可见到Apelin-36的阳性表达,阳性染色主要位于胞浆。APJ蛋白在早孕绒毛组织及晚孕胎盘组织的表达主要位于合体滋养细胞及细胞滋养细胞,其次表达的部位为血管内皮细胞及间质细胞,少数血管平滑肌细胞中也有APJ的表达,阳性染色主要位于胞核。（3）彩色图文分析系统结果显示,Apelin-36在早孕绒毛组织中表达较弱,而在晚孕胎盘组织中阳性表达明显增强,差异有统计学意义（P < 0.01） ,受体APJ在早孕组与晚孕组间的表达差异无统计学意义（P > 0.05）。（4）免疫组化研究结果显示,Apelin-36及受体APJ蛋白在脐静脉血管内皮均有阳性表达,在脐动脉血管内皮细胞中的表达则明显减弱。在脐血管平滑肌组织中,受体APJ散在表达于内皮细胞周围的平滑肌细胞中,未发现Apelin-36的阳性表达。结论正常早孕绒毛及晚孕胎盘组织中有Apelin及其受体APJ的表达,即胎盘组织内存在Apelin- APJ体系的自分泌调节系统,晚孕期胎盘组织Apelin mRNA转录水平增高,可能与妊娠晚期胎盘血流灌注量的需求增加有关。在晚期妊娠的脐静脉血管内皮细胞中,Apelin-36及受体APJ均呈阳性表达,脐动脉血管内皮细胞则表达减弱,这种表达的差异性,可能是由于妊娠晚期脐静脉较脐动脉内皮含有更丰富的活性物质,以适应胎儿生长发育的需要。第二部分Apelin与妊娠期高血压疾病发病及NO关系的研究目的检测血管活性肽Apelin及其受体APJ在正常妊娠和妊娠期高血压疾病（HDCP）患者胎盘组织中的表达,探讨Apelin在妊娠期高血压疾病发生、发展中的作用及其与一氧化氮（NO）的关系。方法选择孕周为36～41周的妊娠期高血压疾病患者36例,其中妊娠期高血压10例,轻度子痫前期11例,重度子痫前期15例;选择同期正常孕妇15例作为对照组。采用免疫组织化学染色分析法检测两组孕妇胎盘组织中Apelin-36及受体APJ的表达,荧光定量RT-PCR检测Apelin及APJmRNA的表达。硝酸还原酶法检测胎盘组织NO的水平,分光光度法测定胎盘组织中NOS的活性,结果（1）妊娠期高血压疾病组胎盘组织Apelin-36及受体APJ在表达部位上与对照组（正常晚孕组）无明显差异,主要表达的部位为绒毛合体滋养细胞及细胞滋养细胞。（2）妊娠期高血压疾病组胎盘Apelin mRNA及Apelin-36的表达量显着低于对照组（P < 0.01）,且随着病情程度的加重,各组胎盘中Apelin mRNA及Apelin-36的表达水平呈下降的趋势,轻度、重度子痫前期胎盘Apelin mRNA及Apelin-36的表达水平均显着低于妊娠期高血压组（P < 0.01,P < 0.01）,轻、重度子痫前期两组之间Apelin mRNA及Apelin-36的表达水平比较,差异也有统计学意义（P < 0.05）。（3）妊娠期高血压疾病各组胎盘组织APJmRNA及蛋白水平的表达与对照组比较差异无统计学意义（P >0.05）。（4）妊娠期高血压疾病组胎盘组织NO水平与对照组相比显着降低（P < 0.01）,且随着病情程度的加重,各组胎盘组织中NO水平呈下降的趋势,轻度、重度子痫前期组胎盘组织NO水平均低于妊娠期高血压组（P < 0.01, P < 0.01）,轻、重度子痫前期两组之间比较,差异也有统计学意义（P < 0.05）。妊娠期高血压组胎盘组织NO水平与对照组比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。（5）妊娠期高血压疾病组胎盘组织NOS水平与对照组相比显着降低（P < 0.01）,且随着病情程度的加重,各组胎盘组织中NOS水平呈下降的趋势,妊娠期高血压疾病组轻度、重度子痫前期胎盘组织NO水平均低于妊娠期高血压组（P < 0.05）,妊娠期高血压组胎盘组织NO水平与对照组比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。（6）妊娠期高血压疾病组胎盘组织NO水平及NOS活性与Apelin mRNA水平呈正相关,相关系数分别为0.823,0.901（P <0.01, P <0.01）。结论（1）血管活性肽Apelin及其受体APJ在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中均有表达,妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中Apelin mRNA及Apelin-36表达水平低下,并与病情程度相关,可能在妊娠期高血压疾病的发病中起重要作用。（2）妊娠期高血压疾病组胎盘组织NO水平及NOS活性显着降低,与胎盘组织Apelin mRNA表达水平呈正相关关系,提示胎盘组织Apelin水平下降,NOS活性低下,使NO合成下降,进一步加重胎盘缺血缺氧,促进妊娠期高血压疾病的发生发展。第三部分Apelin-36对胎盘绒毛NOS活性、NO及β-HCG分泌的影响目的探讨Apelin对胎盘绒毛NOS活性和NO生成的影响。方法体外培养正常足月胎盘绒毛,用血管紧张素（AngⅡ）及不同浓度的Apelin-36作用于胎盘绒毛,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定胎盘绒毛培养液中β-HCG水平,硝酸还原酶法检测胎盘绒毛NO的水平,分光光度法测定胎盘绒毛NOS的活性。结果Apelin-36各组绒毛培养上清液β-hCG水平与对照组比较,差异无统计学意义（P均<0.05）,即Apelin-36对足月妊娠胎盘绒毛分泌β-hCG无影响。加入Apelin培养的各组绒毛NO水平较对照组均明显升高（P <0.01）,差异有统计学意义。与10ng/ml Apelin组比较,50ng/ml及250ng/ml Apelin两组的NO水平明显升高,差异有统计学意义（P <0.01）。50ng/ml及250ng/ml Apelin两组之间的NO水平差异无统计学意义（P >0.05）。加入Apelin培养的各组绒毛总NOS （ tNOS）活性较对照组均明显升高（P <0.01）,其中主要是内皮型NOS （eNOS）活性的升高,各浓度组均有升高,差异有统计学意义（P <0.01）,而诱导型NOS （iNOS） )活性无明显改变（P >0.05）。与对照组比较,AngⅡ可显着减少胎盘绒毛NO水平（P<0.01）,差异有统计学意义。在AngⅡ作用基础上,分别加入10ng/ml Apelin,250ng/ml Apelin后,可见Apelin促进NO释放,其中250ng/ml Apelin抑制AngⅡ的作用更明显（P < 0.01）。结论Apelin-36对足月妊娠胎盘绒毛分泌β-hCG无影响。Apelin-36可能通过增强胎盘绒毛内皮型NOS的活性,增加NO的生成。AngⅡ可使胎盘绒毛的NOS活性及NO生成显着下降,而加用Apelin后,可使NOS活性逐渐恢复,NO生成增加,从而发挥其可能的生物学作用。
李红,马海燕,王云英,王教辰,徐风森,谭金山[9]（2006）在《不同孕期大鼠铅暴露胎盘一氧化氮/一氧化氮合酶系统与其超微结构改变的相关性》文中研究说明目的探讨不同孕期大鼠血铅水平与胎盘一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶（NOS）与胎盘绒毛超微结构的关系。方法用硝酸还原酶法、NOS测定试剂盒测定46例（分为A、B、C组）不同孕期铅暴露和17例对照组孕鼠胎盘匀浆NO、NOS水平,并对受试胎盘组织切片进行电镜检查。结果A、B组NO及NOS高于正常对照组（P均<0.01）;C组NO及NOS与正常对照组比较差异无显着性（P>0.05）。阶段铅暴露组,电镜显示胎盘结构代偿增生或轻度损伤表现。全程铅暴露组血铅水平最高,胎盘结构呈现失代偿改变。结论孕期铅暴露血铅水平、胎盘局部NO/NOS水平变化与胎盘发生病理改变间关系密切,可能在围生期铅毒性发生发展中起重要作用。
周娜[10]（2005）在《正常妊娠及妊高征孕晚期胎盘组织肝素结合性表皮生长因子免疫组化分析》文中进行了进一步梳理目的:研究肝素结合性表皮生长因子（heparin-binding EGF-like growth factor,HB-EGF）在正常妊娠及妊娠高血压综合征（pregnancy-induced hypertension,PIH,简称妊高征）胎盘中的表达是否存在差异,并进一步探讨HB-EGF 在妊高征病因学中的作用。方法:选取2004 年7 月至2005 年3 月在吉林大学第一医院本部及长春市妇产医院分娩的正常孕晚期及妊高征孕妇胎盘共28 例,采用免疫组化链霉菌抗生物素—过氧化物酶（SP）连接法检测正常孕晚期妇女及各种程度妊高征患者胎盘组织中HB-EGF 的表达,以PBS 液代替一抗作阴性对照。显色后由一名病理科医师光镜下观察,事先不知道分组结果,以镜下观察到细胞浆内淡黄至棕黄色颗粒,且其着色强度高于背景非特异性染色者为阳性,采取综合计分法,半定量分析,结果中所有数据均以平均值±标准差（X±s）表示,以Excel 软件分析工具进行方差分析及t 检验。结果:正常妊娠组与妊高征组胎盘组织内均有HB-EGF 表达,各组HB-EGF 均表达于母体面绒毛间质细胞的胞质中,与对照组比较,妊高征组胎盘组织HB-EGF 表达明显减弱（t=2.26,P=0.03）,重度妊高征组HB-EGF 表达显着减弱（t=2.54,P=0.02）。结论:胎盘产生的HB-EGF 在正常孕晚期及妊高征孕妇胎盘的表达有明显差异,妊高征胎盘组织内HB-EGF 表达水平显着低于正常妊娠,HB-EGF 在妊高征的发病及病理生理过程中有重要的作用,胎盘组织内HB-EGF 的减少有可能是发生妊高征的原因之一。
二、妊娠高血压综合征患者胎盘局部NO水平与胎盘病理改变的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、妊娠高血压综合征患者胎盘局部NO水平与胎盘病理改变的研究（论文提纲范文）
（1）川芎嗪注射液对子痫前期患者TNF-α和NO的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 川芎嗪注射液治疗子痫前期研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）当归芍药散对妊娠高血压大鼠的药效学及作用机制的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 1 妊娠高血压 |
| 1.1 妊娠高血压的病因及发病机制 |
| 1.2 妊娠高血压的临床治疗 |
| 1.3 中医药对妊娠高血压的治疗 |
| 1.4 当归芍药散与妊娠高血压 |
| 2 研究思路 |
| 参考文献 |
| 第一章 妊娠高血压模型大鼠的建立 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 L-NAME溶液的配制 |
| 2.2 复制妊娠高血压动物模型 |
| 2.3 成模标准 |
| 3 考察指标 |
| 3.1 大鼠一般状态的观察 |
| 3.2 血压 |
| 3.3 24h尿蛋白的测定 |
| 3.4 胎盘组织HE染色 |
| 4 数据处理 |
| 5 实验结果 |
| 5.1 大鼠一般状态的观察 |
| 5.2 血压 |
| 5.3 24h尿蛋白的测定 |
| 5.4 胎盘组织HE染色 |
| 6 讨论 |
| 7 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第二章 当归芍药散对妊娠高血压大鼠的药效学研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 药物 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 复制妊娠高血压动物模型 |
| 2.2 分组及给药 |
| 3 考察指标 |
| 3.1 大鼠一般状态的观察 |
| 3.2 对血压的影响 |
| 3.3 对 24h尿蛋白含量的影响 |
| 3.4 对肝功能的影响 |
| 3.5 对肾功能的影响 |
| 3.6 对血清电解质的影响 |
| 3.7 对胎盘组织的影响 |
| 3.8 ELISA法检测血浆PGI2、TXA2、β-HCG、E |
| 4 数据处理 |
| 5 实验结果 |
| 5.1 大鼠一般状态的观察 |
| 5.2 DSS对血压的影响 |
| 5.3 DSS对 24h尿蛋白含量的影响 |
| 5.4 DSS对肝、肾功能的影响 |
| 5.5 DSS对电解质的影响 |
| 5.6 胎盘组织病理 |
| 5.7 DSS对妊娠高血压大鼠血浆PGI2、TXA2、β-HCG、E的影响 |
| 6 讨论 |
| 6.1 DSS对妊娠高血压大鼠血压值及 24h尿蛋白含量的影响 |
| 6.2 DSS对妊娠高血压大鼠肝肾功能的影响 |
| 6.3 DSS对妊娠高血压大鼠电解质功能的影响 |
| 6.4 DSS对妊娠高血压大鼠胎盘病理进程的影响 |
| 6.5 DSS对妊娠高血压大鼠血浆TXA2/PGI2的影响 |
| 6.6 DSS对妊娠高血压大鼠血浆β-HCG、E的影响 |
| 7 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 当归芍药散对妊娠高血压大鼠作用机制的研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 药物 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 复制妊娠高血压动物模型 |
| 2.2 分组及给药 |
| 3 考察指标 |
| 3.1 ELISA法检测血浆AVP、AngⅡ、ET-1 含量 |
| 3.2 蛋白印迹法（Western Blotting）法测定肾脏AVP（V2R)、eNOS的表达，胎盘VEGF的表达 |
| 4 实验结果分析 |
| 5 实验结果 |
| 5.1 DSS对高血压大鼠血浆AVP、AngⅡ、ET-1 的影响 |
| 5.2 DSS对妊娠高血压大鼠肾脏AVP（V2R)、eNOS蛋白表达的影响 |
| 5.3 DSS对妊娠高血压大鼠胎盘VEGF蛋白表达的影响 |
| 6 讨论 |
| 6.1 DSS对妊娠高血压大鼠血浆AVP、AngⅡ、ET-1 的影响 |
| 6.2 DSS对妊娠高血压大鼠肾脏AVP、NO蛋白表达的影响 |
| 6.3 DSS对妊娠高血压大鼠胎盘VEGF蛋白表达的影响 |
| 7 本章小结 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）妊娠高血压胎盘组织中sFlt-1mRNA表达和血浆NO水平的关系与意义（论文提纲范文）
| 1 对象和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
（4）Syncytin在妊娠期高血压疾病胎盘组织中的表达及与围生结局的相关性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 材料与方法 |
| 第二章 结果 |
| 第三章 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 实验图片 |
| 中英文名词对照缩写 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 在读期间论文发表情况 |
| 致谢 |
（5）ApoE和iNOS敲除小鼠子痫前期动物模型的建立和胎盘功能异常的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 第一部分 ApoE基因和子痈前期发病的关系 |
| 第二部分 iNOS基因与子痫前期发病的关系 |
| 第三部分 ApoE和iNOS基因的相互作用及与子痫前期发病的关系 |
| Abstract |
| SECTION 1:The Relationship between ApoE and Preeclampsia |
| SECTION 2:The Relationship between iNOS and Preeclampsia |
| SECTION 3:Interaction between iNOS and ApoE and the Relationship with Preeclampsia |
| 缩写词 |
| 前言 |
| 第一部分 ApoE基因和子痫前期发病的关系 |
| 第一节 ApoE基因敲除小鼠子痫前期动物模型的建立 |
| 1. 研究背景 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5.结论 |
| 第二节 ApoE敲除小鼠胎盘炎症及凋亡相关蛋白表达的变化 |
| 1. 研究背景 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 结论 |
| 第二部分 iNOS基因和子痫前期发病的关系 |
| 1 研究背景 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 结论 |
| 第三部分 ApoE和iNOS基因的相互作用及与子痫前期发病的关系 |
| 1. 研究背景 |
| 2. 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 结论 |
| 总结和展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述1：NOS和NO与子痫前期关系的研究 |
| 参考文献 |
| 文献综述2：ApoE和子痫前期的关系的研究 |
| 参考文献 |
| 学习期间撰写的论文 |
| 致谢 |
（6）Ghrelin对VEGF、Flt-1在正常妊娠和妊高症胎盘中的表达调节研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 关于Ghrelin |
| 1.1.1 Ghrelin研究概述 |
| 1.1.2 Ghrelin对心血管作用及机制 |
| 1.1.3 Ghrelin对生殖的作用及机制 |
| 1.2 关于VEGF |
| 1.2.1 VEGF研究概述 |
| 1.2.2 VEGF对生殖的作用与机制 |
| 1.2.3 VEGF与妇科疾病 |
| 1.2.4 VEGF研究展望 |
| 1.3 关于一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS) |
| 1.3.1 NO和NOS的生物学作用 |
| 1.3.2 NO和NOS与妊娠 |
| 1.4 本课题目的和意义 |
| 1.5 技术路线 |
| 2 实验一 正常妊娠早期绒毛和中晚期胎盘组织中Ghrelin与VEGF、Flt-1蛋白的表达研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 主要仪器和试剂 |
| 2.1.3 实验方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 Ghrelin、VEGF及其受体Flt-1 RT-PCR检测结果 |
| 2.2.2 Ghrelin、VEGF及其受体Flt-1免疫组化结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 3 实验二 正常妊娠早期绒毛和中晚期胎盘组织中Ghrelin、VEGF、Flt-1 mRNA、的相对定量表达研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 早期绒毛和中晚期胎盘组织 |
| 3.1.2 主要仪器和试剂 |
| 3.1.3 实时荧光定量PCR引物的设计及合成 |
| 3.1.4 实时荧光定量PCR实验方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 总RNA检测 |
| 3.2.2 荧光定量PCR产物电泳检测结果 |
| 3.2.3 Ghrelin、VEGF、Flt-1和GAPDH荧光定量PCR检测相关曲线 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 4 实验三 正常妊娠不同时期绒毛胎盘组织匀浆中NOS、NO水平的变化研究 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 主要仪器和试剂 |
| 4.1.3 工作原理和方法 |
| 4.1.4 统计学处理 |
| 4.2 结果 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 5 实验四 反义抑制Ghrelin对体外HUVEC中VEGF、Flt-1表达和NOS、NO水平变化的影响 |
| 5.1 人脐静脉内皮细胞HUVEC的培养 |
| 5.1.1 实验材料 |
| 5.1.2 主要仪器和试剂 |
| 5.1.3 人脐静脉内皮细胞HUVEC的培养 |
| 5.2 反义技术对人脐静脉内皮细胞HUVEC Ghrelin抑制最佳条件的确定 |
| 5.2.1 材料和方法 |
| 5.3 反义抑制Ghrelin对培养的HUVEC中VEGF及其受体Flt-1表达的影响 |
| 5.3.1 材料和方法 |
| 5.3.2 实验数据处理 |
| 5.4 反义抑制Ghrelin对HUVEC培养上清NOS、NO水平变化的影响 |
| 5.4.1 材料和方法 |
| 5.4.2 统计学处理 |
| 5.5 结果 |
| 5.5.1 人脐静脉内皮细胞HUVEC的培养结果 |
| 5.5.2 不同时间、不同浓度反义抑制Ghrelin的结果 |
| 5.5.3 反义抑制Ghrelin后VEGF及其受体Flt-1表达结果 |
| 5.5.4 反义抑制Ghrelin后NO含量、NOS活力结果 |
| 5.6 讨论 |
| 5.7 小结 |
| 6 实验五 Ghrelin、VEGF、Flt-1及NO、NOS在妊高症发病机制中的探索性研究 |
| 6.1 材料和方法 |
| 6.1.1 材料 |
| 6.1.2 方法 |
| 6.1.3 统计学方法 |
| 6.2 结果 |
| 6.2.1 Ghrelin、VEGF、Ft-1蛋白在正常孕妇与妊高症孕妇胎盘中的分布和定位 |
| 6.2.2 Ghrelin、VEGF、Flt-1 mRNA在正常孕妇与妊高症患者胎盘中表达 |
| 6.2.3 正常孕妇与妊高症患者胎盘中NO含量、NOS活力结果 |
| 6.3 讨论 |
| 6.4 小结 |
| 7 全文总结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 作者简介 |
（7）内源性哇巴因在妊娠期高血压疾病发病机理中的作用研究（论文提纲范文）
| 英文缩写一览表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 抗哇巴因多克隆抗体的制备 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 内源性哇巴因与妊娠期高血压疾病的相关性研究 |
| 实验一 内源性哇巴因在妊娠期高血压疾病患者产前、产后外周血新生儿脐血水平的测定 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 实验二 内源性哇巴因在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 内源性哇巴因在妊娠期高血压疾病发生发展中的病理调控机制研究 |
| 实验一 Na~+/K~+-ATPase-α1 亚基在胎盘组织中的表达以及孕妇外周血红细胞膜Na~+/K~+-ATPase活性的测定 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 实验二 HDCP 患者外周血、新生儿脐血ET-1、NO 水平的测定 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 实验小结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 致谢 |
（8）Apelin在正常妊娠及妊娠期高血压疾病胎盘组织中的表达及其与一氧化氮关系的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 论文正文 Apelin 在正常妊娠及妊娠期高血压疾病胎盘组织中的表达及其与一氧化氮关系的研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 主要仪器设备 |
| 主要试剂来源及配置 |
| 第一部分 Apelin 及受体APJ 在正常妊娠早孕绒毛和晚孕胎盘及脐血管组织中的表达及定位研究 |
| 参考文献 |
| 第二部分Apelin 与妊娠期高血压疾病发病及NO 关系的研究 |
| 参考文献 |
| 第三部分Apelin-36 对胎盘绒毛NOS 活性、NO 及β-HCG 分泌的影响 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 附图 |
| 综述一 Apelin 的分子生物学特征及研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 胎盘一氧化氮合成调节与妊娠期高血压疾病 |
| 参考文献 |
| 附录 学习期间论文发表情况 |
| 致谢 |
（9）不同孕期大鼠铅暴露胎盘一氧化氮/一氧化氮合酶系统与其超微结构改变的相关性（论文提纲范文）
| 材料与方法 |
| 一、动物模型建立 |
| 二、分组及模型制备 |
| 三、检测方法 |
| 四、统计学处理 |
| 结 果 |
| 讨论 |
| 一、孕末期血铅水平特点 |
| 二、孕末期胎盘NO、NOS改变 |
| 三、NO/NOS与胎盘病理变化相关性 |
（10）正常妊娠及妊高征孕晚期胎盘组织肝素结合性表皮生长因子免疫组化分析（论文提纲范文）
| 文献综述 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 试验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 致谢 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
四、妊娠高血压综合征患者胎盘局部NO水平与胎盘病理改变的研究（论文参考文献）
- [1]川芎嗪注射液对子痫前期患者TNF-α和NO的影响[D]. 陈亚南. 新乡医学院, 2019(02)
- [2]当归芍药散对妊娠高血压大鼠的药效学及作用机制的研究[D]. 姚瑶. 安徽中医药大学, 2016(03)
- [3]妊娠高血压胎盘组织中sFlt-1mRNA表达和血浆NO水平的关系与意义[J]. 胡慧敏,马勇. 中国妇幼保健, 2014(09)
- [4]Syncytin在妊娠期高血压疾病胎盘组织中的表达及与围生结局的相关性研究[D]. 邬俏璇. 南方医科大学, 2011(05)
- [5]ApoE和iNOS敲除小鼠子痫前期动物模型的建立和胎盘功能异常的研究[D]. 毛路一. 复旦大学, 2011(03)
- [6]Ghrelin对VEGF、Flt-1在正常妊娠和妊高症胎盘中的表达调节研究[D]. 姜丽萍. 内蒙古农业大学, 2009(10)
- [7]内源性哇巴因在妊娠期高血压疾病发病机理中的作用研究[D]. 吴黎. 华中科技大学, 2008(05)
- [8]Apelin在正常妊娠及妊娠期高血压疾病胎盘组织中的表达及其与一氧化氮关系的研究[D]. 廖予妹. 华中科技大学, 2007(05)
- [9]不同孕期大鼠铅暴露胎盘一氧化氮/一氧化氮合酶系统与其超微结构改变的相关性[J]. 李红,马海燕,王云英,王教辰,徐风森,谭金山. 实用儿科临床杂志, 2006(18)
- [10]正常妊娠及妊高征孕晚期胎盘组织肝素结合性表皮生长因子免疫组化分析[D]. 周娜. 吉林大学, 2005(06)