一、支架植入诱导平滑肌细胞凋亡在防治再狭窄中的作用（论文文献综述）
张海泉[1]（2021）在《解毒活血方促进PCI术后冠状动脉血管内皮细胞损伤修复的机制研究》文中进行了进一步梳理研究目的通过体外细胞培养观察解毒活血方对血管内皮祖细胞（Endothelial progenitor cells,EPCs）的增殖和凋亡过程的影响,模拟解毒活血方对经皮冠状动脉介入术（percutaneous coronary intervention,PCI）后患者血管内皮祖细胞增殖、活力和凋亡机制的影响,探究解毒活血中药在防治PCI术后再狭窄（in stent restenosis,ISR）方面相关作用机制,为临床防治再狭窄提供理论基础。研究方法:本实验研究通过利用血管紧张素Ⅱ-1型受体自身抗体（AngiotensinⅡ-type 1Receptor Autoantibodies,AT1-AA）诱导血管内皮祖细胞产生细胞损伤,形成PCI术后内皮损伤细胞模型。1.不同浓度的AT1-AA、解毒活血方、辛伐他汀处理细胞后用MTT法检测细胞的活力,确定药物的最佳剂量。2.根据上一步结果,将实验分组为空白组、AT1-AA组、解毒活血方组、辛伐他汀组。3.分别用解毒活血方、辛伐他汀最佳剂量对细胞进行预先处理4h后再和AT1-AA对细胞进行复合处理12h,然后用MTT法检测细胞增殖及生存活力。4.进行流式细胞术确定EPCs凋亡率。4.荧光探针检测EPCs内活性氧（reactive oxygen species,ROS）情况,分析空白组、AT1-AA组、解毒活血方组、辛伐他汀组内皮祖细胞氧化情况。5.用western blot检测解毒活血方对Bcl-2、PERK、CHOP、Caspase-3蛋白表达的影响,探究解毒活血方能否通过调节细胞内质网的应激反应,抑制细胞凋亡机制的发生。研究结果:1.AT1-AA组细胞增殖活性与空白组对比明显减低（P<0.01）。与空白组相比,AT1-AA组可使EPCs生存活力明显减低,辛伐他汀组、解毒活血方组与AT1-AA组相比,二组均可使内皮祖细胞生存活力显着上升（P<0.01）;2.AT1-AA组细胞凋亡率与空白组对比具有显着性差异（P<0.01）。与空白组对比,AT1-AA组细胞凋亡率明显上升,辛伐他汀与解毒活血方单独处理内皮祖细胞后,结果显示二者对内皮祖细胞凋亡率影响无明显差异（P>0.05）,用辛伐他汀及解毒活血方最佳剂量分别对内皮祖细胞进行预先处理4h后,继续用AT1-AA对其进行复合处理12h,与AT1-AA组相比细胞凋亡率显着减低（P<0.01）;3.AT1-AA组细胞内ROS浓度与空白组对比具有显着性差异（P<0.01）。与空白组对比,AT1-AA组细胞内活性氧浓度明显升高,（P<0.01）,以解毒活血方、辛伐他汀最佳剂量分别对内皮祖细胞进行预先处理4h之后继以AT1-AA对其进行处理12h,结果显示细胞内活性氧浓度相对于AT1-AA组显着降低（P<0.01）。4.AT1-AA组较空白组PERK、CHOP、Caspase-3蛋白表达上调,较空白组Bcl-2蛋白表达下调,解毒活血方组和辛伐他汀组都可使PERK、CHOP、Caspase-3蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调。研究结论:1.AT1-AA使EPCs的活力降低,解毒活血方可拮抗此作用;2.AT1-AA可诱导EPCs的凋亡过程,解毒活血方可抑制其诱导凋亡的作用,效果稍弱于辛伐他汀片;3.AT1-AA使EPCs内活性氧水平上升,解毒活血方可抑制其作用;4.解毒活血方可下调细胞PERK、CHOP、Caspase-3蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达,抑制内皮祖细胞的凋亡。
花儿（T.ATARTSE TSEG）[2]（2021）在《豁痰解毒通络饮对大鼠PTCA术后AS模型的干预作用及其调控自噬通路的研究》文中研究表明目的:本研究通过大鼠颈总动脉球囊损伤术模型模拟临床中PTCA术后AS形成的再狭窄,观察豁痰解毒通络饮对该模型的干预作用,并讨论豁痰解毒通络饮是否通过自噬信号通路抑制PTCA术后动脉粥样硬化的形成。方法:5周龄雄性（SPF）级SD大鼠32只,随机分为4组,每组8只,分别:为假手术组、模型组、中药组和西药组。大鼠适应性喂养3天后,建立颈总动脉球囊损伤术后AS模型;中药组大鼠予以豁痰解毒通络饮灌胃治疗,西药组则予以阿托伐他汀灌胃治疗,其余各组均予以等体积蒸馏水灌胃,并于术后4周取材。1.采用HE染色法检测损伤侧血管组织病理学改变情况;2.采用免疫组织化学法（IHC）检测各组大鼠颈总动脉中Beclin-1的表达情况;3.q PCR检测各组大鼠颈总动脉组织中自噬标志性分子Beclin-1、ULK1、Atg12的m RNA表达水平。3.蛋白免疫印记法（western-blot）检测各组大鼠颈总动脉中ULK1、Atg12、Atg5的表达情况。结果:1.HE染色结果显示:相比较于假手术组,模型组颈动脉内膜显着增生,管腔狭窄较为明显;与模型组相比较,中药组和西药组内膜增生情况均明显降低,管腔狭窄情况得以缓解。2.IHC检测结果显示:假手术组中几乎无粽黄色阳性表达颗粒,Beclin-1表达呈阴性;相比之下,模型组的内膜有较明显的增厚,并且新生内膜中含有大量的棕黄色Beclin-1阳性表达颗粒;与模型组相比,中药组和西药组Beclin-1的阳性表达则明显减弱。3.q PCR检测结果显示:相比于假手术组,模型组大鼠颈动脉组织中ULK1、Beclin-1、Atg12的m RNA表达水平均显着升高（P<0.01）;而与模型组相比较,中药组和西药组大鼠颈动脉中ULK1、Beclin-1、Atg12的m RNA表达水平均明显降低（P<0.01）。4.western-blot检测结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠颈动脉组织中ULK1、Atg12、Atg5的蛋白表达水平显着升高（P<0.01）;相比之下,中药组和西药组ULK1、Atg12、Atg5的蛋白表达水平则显着降低（P<0.01）。结论:1.通过实验成功建立了大鼠PTCA术后AS模型,研究发现其成模率高,病变情况相对恒定,因此可用于模仿人类PTCA术后再狭窄的相关实验研究;2.豁痰解毒通络饮可明显抑制颈动脉球囊损伤后内膜的增生,改善大鼠颈动脉粥样硬化的形成;3.在大鼠PTCA术后AS模型中自噬信号通路过度表达,而豁痰解毒通络饮能够有效的抑制自噬通路过度激活,这为今后中医药治疗PTCA术后AS提供了新的治疗策略和分子生物学依据。
郑毅成[3]（2021）在《中药防治冠脉支架植入术后再狭窄的Meta分析及用药规律的数据挖掘》文中指出研究目的:通过Meta分析,对中药防治冠脉支架植入术后再狭窄的临床疗效进行评价;通过频数分析、聚类分析和关联规则分析,对中药防治冠脉支架植入术后再狭窄的用药规律进行分析。研究方法:Meta分析方面,从PubMed、Embase、Cochrane Library、中国生物医学文献、中国知网、万方、维普等中、英文数据库中检索和遴选自数据库建库至2020年12月公开发表的与中药防治冠脉支架植入术后再狭窄相关的临床研究文献。通过使用Cochrane风险偏倚评估工具全面地准确评估随机对照试验的偏倚风险,以此对文献质量进行综合的评价。同时应用RevMan5.3和STATA 15.1软件对文献中相关结局指标进行Meta分析。数据挖掘方面,基于国内主流数据库检索近二十年有关中药防治冠脉支架植入术后再狭窄的中药复方,通过Excel2019软件建立中药复方数据库,并根据中国药典规范药物名称。根据Excel数据库,行频数分析归纳核心药物,然后分别运用统计软件IBM SPSS Statistics 25的系统聚类进行聚类分析,IBM SPSS Modeler 18.0软件进行关联规则分析并做出关联网络图。从而对数据结果进行分析,探索用药规律、治则治法等。研究结果:Meta分析方面,最终共纳入15篇相关文献,只有1篇文献为低度偏倚风险,属于高质量文献,其余14篇均为中度偏倚风险,质量较低。Meta分析研究结果表明,口服中药在降低冠脉支架植入术后再狭窄发生率、提高中医证候疗效有效率、提高心电图疗效有效率、改善中医证候积分、减少联合心血管事件发生率方面均优于对照组,且均有统计学意义。同时治疗组用药具有良好的安全性。数据挖掘方面,本次研究共纳入86首处方,中药97味,所有中药总用药频次为783次,药物使用频次在前10位的依次为丹参、川芎、黄芪、当归、红花、枳壳、赤芍、三七、桃仁、甘草。在功效分类中,活血化瘀药和补虚药使用频次最高,其余高频次药物分类依次为理气药、清热药、化痰药、解表药、止血药。在四气方面,温性药物使用频次最高,其次为寒性药物,接着为平性药物,凉性药物和热性药物使用频次最少。药味中,苦味、甘味、辛味使用频次明显高于其他药味。在归经数据上,肝经出现频次最多,其余依次为脾经、心经、肺经、胃经、肾经、大肠经、胆经、心包经、膀胱经、小肠经、三焦经。通过关联规则分析,共得到21条关联信息;从复杂网络图得出,川芎、赤芍、丹参、黄芪、当归、红花、桃仁、枳壳等中药常与它药配伍出现;从聚类分析得出三组常用药物组合。研究结论:口服中药联合常规西药治疗可以有效地改善冠脉支架植入术后患者的预后,减少并发症的发生,且治疗组不良反应发生情况较少见,无严重不良反应发生,具有良好的安全性。在中药防治冠脉支架植入术后再狭窄方面,治疗以补气活血为主要治疗方法,补气药物多用黄芪、人参、党参之类,活血药物则以川芎、丹参、当归、赤芍、红花、桃仁、三七等为主。常用方剂为桃红四物汤、血府逐瘀汤、丹参饮、瓜蒌薤白半夏汤、二陈汤、保元汤等。此外,在用药选择上应注重寒温并用、辛甘苦相调,同时注重肝脾调和、心肺同治、心肾相交。
张帅[4]（2021）在《丹参化瘀汤防治下肢动脉硬化闭塞症术后再狭窄临床疗效研究》文中提出目的:通过观察比较丹参化瘀汤和硫酸氢氯吡格雷对下肢动脉硬化闭塞症术后再狭窄患者治疗3个月后与治疗前的治疗有效率比较,评估丹参化瘀汤对于下肢动脉硬化闭塞症术后再狭窄的临床疗效;通过监测客观的生理、生化、临床症状等微观指标的改变,结合中医宏观辨证论治思维,探讨丹参化瘀汤对于下肢动脉硬化闭塞症术后再狭窄防治相应机制;为中医治疗血管疾病提供依据以及临床支撑。方法:从2019年06月到2020年12月安徽中医药大学第一附属医院血管乳腺外科门诊及病房的患者中选取符合标准的40例下肢动脉硬化闭塞症术后再狭窄患者。按随机分组的原则分为实验组20例和对照组20例。治疗方法:对照组给予拜阿司匹林100mg,每日1次、硫酸氢氯吡格雷75mg,每日1次,并控制其它危险因素。实验组则在对照组基础上给予我院名老中医周玉朱教授自拟方丹参化瘀汤加减方,每日2次,早、晚各一次。通过治疗3个月后,观察并比较两组患者治疗后的ABI、经皮氧分压、激光多普勒血流监测等临床疗效指标,并与治疗前比较;以及比较两组患者治疗3个月后的治疗有效率为主要评价。运用统计学软件（SPSS 21.0）对所得数据进行统计分析。结果:1.治疗前对两组患者的一般情况即年龄、性别、患肢以及ABI、经皮氧分压、激光多普勒血流监测、症状量化评分进行比较,经t检验、卡方检验、非参数检验,差异无统计学意义（P>0.05）,具有可比性。2.疗效分析:（1）实验组治疗后ABI较治疗前有明显提升,经两样本配对t检验,P<0.05,有统计学差异。对照组治疗后ABI较治疗前有提升,经两样本配对t检验,P<0.05,有统计学差异。治疗后实验组与对照组对比,实验组ABI提升更加明显,经独立样本t检验,P<0.05,有统计学差异。（2）实验组治疗后经皮氧分压较治疗前有明显提升,经两样本配对t检验,P<0.05,有统计学差异。对照组治疗后经皮氧分压较治疗前有提升,经两样本配对t检验,P<0.05,有统计学差异。治疗后实验组与对照组对比,实验组经皮氧分压提升明显,经独立样本t检验,P<0.05,有统计学差异。（3）实验组治疗后激光多普勒血流监测较治疗前有明显提升,经两样本配对t检验,P<0.05,有统计学差异。对照组治疗后激光多普勒血流监测较治疗前有明显提升,经两样本配对t检验,P<0.05,有统计学差异。治疗后实验组与对照组对比,实验组经皮氧分压提升明显,经独立样本t检验,P<0.05,有统计学差异。（4）实验组与对照组治疗前后症状量化评分对比中,疼痛、皮肤色泽、间跛、皮温、经皮氧分压、ABI、多普勒彩超等评分,经非参数检验检验,P<0.05,有统计学差异。治疗后实验组与对照组对比,间跛、经皮氧分压、ABI等评分,经非参数检验,P<0.05,有统计学差异;疼痛、皮肤色泽、皮温、多普勒彩超等评分,经非参数检验检验,P>0.05,无统计学差异。结论:（1）两组治疗方式对于下肢动脉硬化闭塞症术后再狭窄中ABI、经皮氧分压、激光多普勒血流灌注等临床疗效指标方面均有改善好转的作用,丹参化瘀汤疗效更为显着。（2）两组治疗方式对于下肢动脉硬化闭塞症术后再狭窄症状量化评分各方面均有改善好转,其中丹参化瘀汤对于间歇跛行方面疗效较单纯西医治疗明显。
王凯[5]（2020）在《从NLRP3炎性小体探讨络风宁0号对HCAEC的保护作用及机制》文中研究说明背景支架内再狭窄（ISR）和支架内血栓形成（ST）是经皮冠脉介入领域的两大难题,二者发生的机制复杂,目前认为二者的发生均与支架对血管的机械性损伤、血管内皮损伤、血管舒缩功能障碍、金属异物和表面涂层聚合物导致的局部炎症等有关,各种因素共同导致的以人冠脉平滑肌细胞（HCASMC）病理性增生为核心的新生内膜形成是ISR的关键机制,而抗增殖药物导致的再内皮化延迟则是ST发生的重要原因。因此,为减少金属支架植入对血管的影响,“介入无植入”理念的产物——药物涂层球囊（DCB）逐渐受到介入医师青睐;另一方面,目前临床应用的药物洗脱支架（DES）和DCB表面所载药物皆为单一的抗细胞增殖药物,对细胞增殖活性的抑制无特异选择性,为减少药物对人冠脉内皮细胞（HCAEC）的损伤,制备出“内皮友好型”支架和球囊,新型涂层药物的研发也成为热点。但目前由于缺乏大规模的随机对照试验,除ISR病变外,其他类型冠脉病变应用DCB治疗仍需要更多循证医学证据支持;同时单一组分药物的研发目前处于一个瓶颈期,中医方剂中多药物合理配伍具有“增效减毒”的优点,或可为新型涂药物的研发提供思路。导师王显教授基于心脉病症络风内动理论将红豆杉和水蛭的单体有效成分——紫杉醇、比伐卢定（重组水蛭素）组成络风宁0号方,用于支架和球囊所载药物的研发。前期研究中已经证实络风宁0号中药单体复合物可通过抑制炎症反应降低HCASMC的炎性增殖水平,但其对HCAEC的保护作用的机制尚未进一步研究,而HCAEC的损伤和死亡是局部炎症反应和血管再内皮化延迟的重要因素,因此我们以HCAEC为研究载体,探索络风宁0号对HCAEC的保护作用及对损伤过程中NLRP3炎性小体的影响,为进一步研究络风宁0号涂层球囊的研发提供细胞层面的理论依据。目的本课题一方面通过对现有文献进行荟萃分析,探讨DCB在小冠状动脉（SCV）原发病变中的有效性和安全性;另一方面筛选络风宁0号中两种单体成分——紫杉醇和比伐卢定的最佳浓度配比,并对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的HCAEC损伤模型进行干预,观察络风宁0号对HCAEC的保护作用及对损伤过程中NLRP3炎性小体的影响,从炎症和细胞焦亡的角度探讨络风宁0号对HCAEC的保护作用,为研发新一代内皮友好型球囊提供理论依据。方法第一部分DCB和DES治疗SCV原发病变的疗效和安全性比较通过对9个医学数据库进行检索,筛选出符合标准的随机对照试验进行meta分析。第二部分络风宁0号对AngⅡ诱导的HCAEC损伤的保护作用及机制实验一筛选络风宁0号中紫杉醇和比伐卢定最佳浓度配比选用第4～6代HCASMC和HCAEC作为研究载体。通过设立一系列不同的紫杉醇和比伐卢定的浓度配比,对两种细胞进行干预,采用MTT法对干预后的细胞增殖活性进行检测,筛选出可明显抑制HCASMC活性但对HCAEC无影响（以细胞相对活性90%作为判断阈值）的配比浓度。实验二络风宁0号对AngⅡ诱导的HCAEC损伤的保护作用及机制选用第4～6代HCAEC作为研究载体。通过设立一系列不同的AngⅡ浓度,对HCAEC进行干预,采用MTT法对干预后的细胞增殖活性进行检测,筛选出可明显抑制HCAEC活性（以细胞相对活性70%作为判断阈值）的AngⅡ浓度。实验三络风宁0号对AngⅡ诱导的HCAEC损伤的保护作用采用确定的络风宁0号最佳药物配比浓度对AngⅡ诱导的HCAEC损伤模型进行干预,LDH释放法检测各组细胞活性,并采用HO-PI免疫荧光染色对细胞死亡情况进行检测。实验四基于NLRP3炎性小体探讨络风宁0号对AngⅡ诱导的HCAEC损伤的保护作用的机制采用确定的络风宁0号最佳药物配比浓度对AngⅡ诱导的HCAEC损伤模型进行干预,LDH释放法检测各组细胞活性,ELISA、RT-qPCR、Western Blot检测NLRP3炎性小体通路中主要信息传递位点、下游炎症产物的基因和蛋白表达水平的影响,并采用HO-PI免疫荧光染色对细胞死亡情况进行检测。结果第一部分DCB和DES治疗小冠状动脉原发病变的疗效和安全性比较通过对所检索的文献进行meta分析,结果提示在治疗SCV原发病变方面,单独应用DCB和DES具有类似的疗效和安全性,二者之间心血管事件（MACEs、TLR、MI和死亡）发生率相当。此外,单独应用DCB,在随访中血管造影结果如晚期血管丢失（LLL）和最小血管直径（MLD）方面表现较好。因此,单独应用DCB可能是治疗SCV原发病变的新选择。第二部分络风宁0号对AngⅡ诱导的HCAEC损伤的保护作用及机制实验一筛选络风宁0号中紫杉醇和比伐卢定最佳浓度配比络风宁0号中紫杉醇的浓度为固定的1μmol/L,随着比伐卢定浓度的增高,对HCASMC和HCAEC活性的抑制程度加重与对照组相比差异明显（p<0.05）,抑制呈浓度依赖性,但对HCAEC的抑制程度明显低于HCASMC,当两种药物以紫杉醇1μmol/L+比伐卢定0.625mg/ml进行配比时,HCAEC的相对活性约为92%,HCASMC相对活性约为63%。实验二络风宁0号对AngⅡ诱导的HCAEC损伤的保护作用及机制随着AngⅡ浓度的增高,对HCAEC活性的抑制程度加重,与对照组相比差异明显（p<0.05）,抑制呈浓度依赖关系,当AngⅡ浓度为10-5mol/L时,HCAEC的相对活性约为71.9%。实验三络风宁0号对AngⅡ诱导的HCAEC损伤的保护作用1)LDH释放试验结果显示与对照组相比,模型组中LDH释放水平明显升高（p<0.05）,紫杉醇组和络风宁0号组LDH释放水平较模型组明显降低,且络风宁0号组降低更为明显（p<0.05）。2)HO-PI免疫荧光染色结果提示与对照组相比,模型组呈现强红色荧光,紫杉醇组和络风宁0号组中红色荧光较模型组明显减弱,络风宁0号组细胞存活数量优于紫杉醇组。实验四基于NLRP3炎性小体探讨络风宁0号对AngⅡ诱导的HCAEC损伤的保护作用的机制1)ELISA结果显示与对照组相比,模型组中IL-1β和IL-18水平明显升高（p<0.05）,紫杉醇组和络风宁0号组IL-1β和IL-18释放水平较模型组明显降低,且络风宁0号组降低更为明显（p<0.05）。2)RT-qPCR结果显示与对照组相比,模型组中NF-κB、NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18基因表达水平明显升高（p<0.05）,紫杉醇组和络风宁0号组基因表达的水平较模型组明显降低,且络风宁0号组降低更为明显（p<0.05）。3)Western Blot结果显示与对照组相比,模型组中NF-κB、NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD蛋白表达水平明显升高（p<0.05）,紫杉醇组和络风宁0号组蛋白水平较模型组明显降低,且络风宁0号组降低更为明显（p<0.05）。结论1.在治疗冠脉小血管原发病变方面,单独应用DCB和DES具有相似的疗效性和安全性,而且DCB血管造影随访结果表现较好。因此,单独应用DCB可能是治疗SCV原发病变的较好选择。2.当紫杉醇1μmol/L配伍比伐卢定0.0625mg/ml做为络风宁0号最终药物浓度配比时,可达到不影响HCAEC活性的同时又能明显抑制HCASMC增殖的目的。3.络风宁0号通过对NLRP3炎性小体途径的抑制作用,减轻Ang Ⅱ诱导HCAEC产生的炎症损伤和细胞焦亡,对HCAEC产生保护作用,并且结果优于单独应用紫杉醇,可为新型DCB所载药物的研发提供了理论依据。
陈乙菲[6]（2020）在《基于CaN/NFAT信号途径探讨血府逐瘀汤治疗血管损伤后内皮增生的作用机制研究》文中研究表明目的:基于CaN/NFAT信号通路,探讨血府逐瘀汤对人脐静脉内皮细胞损伤后的影响,探讨血府逐瘀汤对大鼠颈动脉损伤模型病理变化的影响、该信号通路标志因子和炎症因子的相关影响,明确血府逐瘀汤治疗血管内膜损伤可能的作用机制,丰富血府逐瘀汤的治疗范围和药理机制。方法:1.血府逐瘀汤通过CaN/NFAT信号通路对人脐静脉内皮细胞损伤后的影响用BEGM培养基培养人脐静脉内皮细胞。实验用药为血府逐瘀汤冻干粉用无血清培养基BEGM配制成100mg/ml含药培养基,在涡旋仪上充分混匀后,用0.22μm滤膜除菌过滤后,高压灭菌分装保存,4℃冷藏备用。MTS实验检测不同浓度血府逐瘀汤对HUVECs细胞增殖的影响,分为正常对照组（加等体积不含药培养基）、含药培养基组（浓度为6.25μg/ml、12.5μg/ml、25μg/ml、37.5μg/ml、50μg/ml）,培养24h和48h,分别检测OD值。细胞划痕实验检测血府逐瘀汤对HUVECs细胞迁移和修复的影响,分为对照组（无血清培养基）,血府逐瘀汤12.5μg/ml组、血府逐瘀汤25μg/ml组、血府逐瘀汤50μg/ml组。将6孔板封好,放入37℃,5%CO2培养箱,分别于0h、24h、48h镜下拍照（×10）。Real-time PCR检测HUVECs细胞物理损伤后24h和48hCaN/NFAT标志因子的表达量。2.血府逐瘀汤通过CaN/NFAT信号通路调控大鼠颈总动脉球囊损伤术后血管内膜增生的体内实验研究实验一:健康SD大鼠72只,分为6组,假手术组、模型组、他克莫司组、血府逐瘀汤高剂量组、血府逐瘀汤中剂量组、血府逐瘀汤低剂量组。假手术组只结扎颈外动脉,不做球囊扩张损伤,其余各组大鼠行球囊损伤术对大鼠颈动脉造成损伤,给药28天后取材。大鼠颈动脉做HE染色看各组病理形态变化情况,采各组大鼠血清用ELISA法检测血清MCP-1。实验二:取大鼠颈动脉组织,用免疫组化方法检测CaN含量,用Real-time PCR检测各组大鼠颈动脉中CaN、NFATc2、NFATc3、IL-2、TNF-α、COX2、S100A4 mRNA和蛋白表达水平。结果:1.血府逐瘀汤通过CaN/NFAT信号通路对人脐静脉内皮细胞损伤后的影响MTS细胞增殖实验结果示:24h、48h时血府逐瘀汤6.25μg/ml、12.5μg/ml、25μg/ml浓度有促进细胞增殖的作用,到48h时血府逐瘀汤50μg/ml组表现出抑制细胞增殖的作用。细胞划痕实验结果示:24h、48h时血府逐瘀汤12.5μg/ml、25μg/ml浓度有促进细胞迁移和修复的作用,48h血府逐瘀汤50μg/ml组体现抑制细胞迁移的作用。Real-time PCR结果显示:血府逐瘀汤给药24h,12.5μg/ml、25μg/ml血府逐瘀汤组可显着上调CaN、NFATc1、NFATc2、NFATc3 mRNA的表达量（*P<0.05,#P<0.01）;到给药48h时CaN/NFAT信号通路标志因子有表达量下调的趋势,但无统计学差异。2.血府逐瘀汤通过CaN/NFAT信号通路调控大鼠颈总动脉球囊损伤术后血管内膜增生的体内实验研究实验一:颈动脉HE染色结果示:与模型组相比,血府逐瘀汤高剂量组有极少量血管新生内膜,极薄,有少量炎性细胞浸润,平滑肌细胞排列紊乱,弹力纤维板不平整比模型组要有明显改善减轻。血清MCP-1结果示:与假手术组相比各组大鼠血清MCP-1含量具有极显着差异(**P<0.01)。他克莫司组与中剂量中药组血清含量比较未见明显差异（P>0.05）,高剂量中药组与他克莫司组比较含量降低,有极显着差异(&&P<0.01)。实验二:免疫组化检测大鼠颈总动脉组织切片CaN的表达结果示:假手术组很少见棕黄色颗粒,模型组有内膜明显增厚,CaN表达呈阳性,可见数个棕黄色颗粒;他克莫司组、低剂量中药组、中剂量中药组、高剂量中药组棕黄色颗粒与模型组比较明显减少,提示药物干预后大鼠颈总动脉组织中CaN表达下降。血府逐瘀汤对大鼠颈总动脉组织中CaN/NFAT信号通路标志因子的影响:与假手术组相比,模型组CaN/NFAT信号通路标志因子CaN、NFATc2、NFATc3的基因和蛋白表达水平显着上调(**P<0.01),与模型组相比,血府逐瘀汤高剂量组能显着下调标志因子的基因和蛋白表达水平(##P<0.01)。血府逐瘀汤对球囊损伤后的大鼠颈总动脉中炎症因子的影响:与假手术组相比,模型组炎症因子IL-2、TNF-α、COX2的基因和蛋白表达水平显着上调(**P<0.01),与模型组相比,血府逐瘀汤高剂量组能显着下调三者的基因和蛋白表达水平(##P<0.01)。结论:1.血府逐瘀汤对HUVECs细胞的增殖和迁移在一定浓度剂量有促进作用,而随着浓度的升高有抑制作用,且这种抑制作用会随药物作用时间延长而体现出来。2.血府逐瘀汤对HUVECs损伤后CaN/NFAT信号通路标志因子在初期有促进作用,随药物作用时间延长会体现抑制趋势。3.血府逐瘀汤能有效改善球囊损伤后大鼠颈总动脉内膜增生的病变情况,为研究再狭窄提供基础。4.血府逐瘀汤可以降低大鼠颈总动脉组织中IL-2、TNF-α、COX2含量,能降低血清中MCP-1的含量,具拮抗炎症的作用。5.血府逐瘀汤能抑制大鼠颈总动脉组织中CaN、NFATc2、NFATc3的基因和蛋白表达量,提示血府逐瘀汤可通过CaN/NFAT信号通路抑制内膜过度增生,发挥防治再狭窄的作用。
路芳芳[7]（2020）在《阿苯达唑在血管再狭窄中的作用机制研究》文中研究表明第一部分小鼠血管内膜增生模型的的构建目的:构建小鼠血管内膜增生模型,探讨其引起内膜增生和管腔狭窄的相关机制。方法:根据文献报道的方法[1],使用硅胶管嵌套小鼠单侧股动脉以诱导血管内膜增生,对照侧实行假手术,分离股动脉后不进行套管。手术后进行体重连续监测,取血管进行组织形态分析前用小动物超声仪检测小鼠双侧股动脉内血流的变化,作为再狭窄形成的辅助诊断指标。通过对实验处股动脉切片进行苏木素-伊红染色（Hematoxylin-eosin staining,HE staining）来判断血管内新生内膜的面积和管腔狭窄的程度,分别对内膜面积,中膜面积,内膜与中膜的比例（I/M）用ImageJ软件处理后进行定量。结果:经测定,与假手术侧相比,小鼠股动脉手术侧的血流速度[（126.2334±21.43199）vs（70.97854±4.646153）,P=0.002]显着加快,差异有统计学意义,即手术侧管腔的横截面积小于对照侧。取小鼠股动脉切片后进行HE染色,可见血管内膜显着增生和管壁增厚及管腔狭窄。内膜中可见大量的血管平滑肌细胞（Vascular smooth muscle cells,VSMCs）增生,血管周可见炎性细胞浸润。血管狭窄参数的定量结果显示,手术侧的内膜面积[（2563.67±398.31）vs（7974.67±1491.69）,P=0.004],中膜面积[（6939.67±570.507）vs（12227.67±1487.02）,P=0.005],I/M 比值[（0.37±0.04）vs.（0.66±0.13）,P=0.019]都明显高于对照侧（图3D）,差异有统计学意义。结论:成功构建了简单实用的通过血管外膜损伤诱导小鼠股动脉内膜增生的模型。第二部分体外评价阿苯达唑对平滑肌细胞生物学功能的影响目的:利用体外实验评价阿苯达唑（Albendazole,ABZ）对VSMCs生物学功能的影响并简要探讨其作用机制。方法:体外各实验均用与实验组等体积的DMSO作为对照,且DMSO在培养基中的浓度≤0.2%。MTT法检测ABZ对VSMCs和内皮细胞（endothelial cell,ECs）增殖的影响,3-D细胞迁移实验和Annexin V-PI染色分别评估ABZ对VSMCs迁移和凋亡的影响。细胞划痕实验用来评估ABZ对ECs迁移的影响。在VSMCs体外迁移的过程中,使用特异性鬼笔环肽荧光染料标记丝状肌动蛋白（F-actin）,用来反映ABZ对细胞骨架结构变化的影响。免疫印迹法（Western blotting）检测肌球蛋白磷酸酶1（MYPT1）和肌球蛋白轻链2（MLC）磷酸化水平的变化。结果:MTT实验检测结果显示,与对照组相比,ABZ以0.5μM[（0.60±0.03）vs（0.50±0.04）,P<0.001]1μM[（0.60±0.03）vs（0.33±0.03）,P<0.001]浓度作用 48h后,均能显着抑制VSMCs的增殖,最小起效浓度为0.5μM。细胞迁移实验结果显示,与对照组相比,ABZ 以 0.5μM[（118.55±3.39）vs（81.00±4.00）,P<0.001]和1μM[（118.55±3.39）vs 78.875±3.01),P<0.001]浓度作用 48h 时后对 VSMCs 迁移具有抑制作用,穿过胶原贴附到Transwell小室膜外侧的细胞数显着减少。流式细胞术检测结果表明,ABZ作用48h后,0.5μM浓度对细胞凋亡没有显着影响[（18.29±2.79）vs（20.02±2.23）,P=0.420],但在 1.0μM时可以促进细胞凋亡[（18.29±2.79）vs（25.13+1.35）,P=0.002]。本实验室之前的实验研究表明,ABZ将VSMCs的细胞周期阻滞在G2/M期。使用MTT细胞增殖试剂盒对ECs的检测结果表明,与对照组相比,ABZ处理48h,0.5μM[（0.34±0.11）vs.（0.42±0.09）,P=0.146]和 1μM[（0.34±0.11）vs.（0.40±0.10）,P=0.427]浓度对ECs的增殖作用均未见显着的抑制作用。细胞划痕实验用来体外模拟ABZ对ECs损伤愈合的影响,ImageJ软件分别对Oh和24h划痕愈合的面积进行定量。愈合面积用Oh划痕面积与24h划痕面积之差表示。相较于对照,ECs 经过 0.5μM[（85423.89±29521.03）vs（18211.33±4985.28）,P<0.01]和 1μM[（85423.89±29521.03）vs（21810.00±17750.62）,P<0.001]ABZ 处理 24h 后,创面愈合面积都具有明显差异。Western blot检测结果显示,与对照相比,0.5μM[（0.64±0.12）vs（0.37±0.12）,P=0.04]和1.0μM[（0.64±0.12）vs（0.24±0.07）,P=0.007]ABZ 分别作用24h后,MYPT1磷酸化水平显着降低。MLC磷酸化水平在0.5μM[（0.89±0.06）vs（0.56±0.13）,P=0.01]和 1μM[（0.89±0.06）vs（0.34±0.08）,P<0.001]ABZ 处理后也显着降低。结论:ABZ能够在体外抑制VSMCs增殖和迁移,对细胞凋亡影响较小,并且不会影响ECs的增殖作用。ABZ对VSMCs迁移的影响与细胞骨架中F-actin的拆解有关,能够显着抑制F-actin的拆解,其机制可能与ABZ对MLC和MYPT1磷酸化水平的调节有关。第三部分阿苯达唑对小鼠股动脉内膜增生和管壁重塑的影响目的:利用小鼠血管内膜增生模型评价ABZ在体内对小鼠股动脉损伤后再狭窄形成的影响,探讨ABZ成为血管再狭窄潜在预防药物的可能。方法:取10周龄野生型雄性C57BL/6小鼠,硅胶管嵌套小鼠单侧股动脉以诱导血管内膜增生模型,对侧实行假手术。术后将小鼠随机分为实验组和对照组,两组小鼠同时用高脂饲料喂养。期间实验组将ABZ以1.5 mg/天的剂量进行灌胃,对照组以同体积的芝麻油灌胃。4周后用小动物超声仪评价血管内膜增生的严重程度。HE染色后观察血管组织的形态学变化,ImageJ软件处理后对内膜面积,中膜面积及内膜与中膜的比例（I/M）进行定量。通过免疫组织化学染色评价平滑肌细胞表型转换分子（α-SMA）,内皮细胞标记（CD31）,巨噬细胞标记（Mac-3）,以及平滑肌细胞核增殖抗原（PCNA）表达的变化。结果:与对照组相比,实验组小鼠双侧股动脉内血流速度的差值[（40.37±2.88）vs（25.08±7.37）,P=0.008]减低,差异有统计学意义,即ABZ作用后股动脉血管腔的横截面积大于对照侧,狭窄程度得到改善。HE染色结果表明,相较于对照组小鼠,ABZ 能够显着抑制内膜[（5605.79±1246.96）vs（2988.66±365.58）,P=0.017]增生及I/M的比例[（1.12±0.20）vs（0.76±0.15）,P=0.005],对中膜的面积并无显着效应[（4114.46±970.57）vs（3913.79±528.51）,P=0.661]。免疫组化染色结果显示,α-SMA阳性细胞显着减少[（0.35±0.02）vs（0.21±0.04）,P=0.008]。CD31染色结果表明,ABZ不会影响再内皮化。PCNA染色结果显示ABZ处理后,PCNA阳性细胞数明显减少[（0.32±0.03）vs（0.20±0.04）,P=0.007]。与对照组相比,巨噬细胞阳性数也减少[（0.08±0.02）vs（0.04±0.01）,P=0.03]。结论:ABZ通过作用于VSMCs和炎症细胞,有效的改善了动脉内膜增生和血管壁重塑,对术后血管再狭窄的形成具有较好的预防作用。
彭建[8]（2020）在《DAXX过表达抑制大鼠腹主动脉球囊损伤后VSMC增殖的机制研究》文中提出目的:通过构建SD大鼠腹主动脉球囊损伤模型,研究DAXX过表达可能通过PTEN/AKT/NF-κB信号通路抑制大鼠腹主动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞的增殖。方法:48只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、慢病毒空载体（pCDH-EGFP）组、重组慢病毒（pCDH-Daxx-EGFP）组,每组12只。假手术组及模型组每次尾静脉注射生理盐水100ul,给药两次,每次间隔2天;慢病毒空载体（pCDH-EGFP）组、重组慢病毒（pCDH-Daxx-EGFP）组分别每次尾静脉注射pCDH-EGFP病毒液100ul（慢病毒滴度1×109TU/ml）、pCDH-Daxx-EGFP病毒液100ul;给药2次,每次间隔2天。术后第14天取大鼠肾下腹主动脉行HE染色观察血管内膜增生情况及统计内膜、中膜厚度比值;免疫荧光染色检测大鼠腹主动脉平滑肌细胞中DAXX及α-SMA的表达;蛋白免疫印迹法检测大鼠腹主动脉平滑肌细胞中Daxx、PTEN、p-AKT、NF-κB的表达。结果:1、HE染色显示:手术组动脉血管均出现不同程度狭窄,内膜增厚;其中模型组及慢病毒空载体（pCDH-EGFP）组血管内膜增厚最明显,重组慢病毒（pCDH-Daxx-EGFP）组血管内膜、中膜厚度比值低于模型组和慢病毒空载体（pCDH-EGFP）组（P<0.05）;2、免疫荧光染色显示:假手术组平滑肌细胞中Daxx/α-SMA蛋白的表达均低于手术组,重组慢病毒（pCDH-Daxx-EGFP）组标本中Daxx表达高于模型组、慢病毒空载体（pCDH-EGFP）组,而α-SMA蛋白表达低于模型组、慢病毒空载体（pCDH-EGFP）组;3、蛋白免疫印迹法显示:手术组平滑肌细胞中Daxx、PTEN、p-AKT、NF-κB表达均高于假手术组（P<0.05）;重组慢病毒（pCDH-Daxx-EGFP）组平滑肌细胞中Daxx、PTEN蛋白表达高于模型组、慢病毒空载体（pCDH-EGFP）组（P<0.05）,而p-AKT、NF-κB蛋白表达低于模型组、慢病毒空载体（pCDH-EGFP）组（P<0.05）,以上数据均具有统计学意义。结论:1、DAXX过表达可以抑制大鼠腹主动脉球囊损伤术后VSMC的增殖;2、DAXX过表达抑制大鼠腹主动脉球囊损伤术后VSMC增殖的机制可能与下调PTEN/AKT/NF-κB信号通路有关。
夏晓东[9]（2020）在《温控射频消融血管成形术对动脉粥样硬化的影响》文中研究说明目的:1.使用温控射频消融球囊对兔正常动脉血管进行纵向线性消融,探讨不同温度射频对兔正常动脉的损伤情况,观察温控射频球囊及单纯球囊对正常血管内膜损伤,增生及纤维组织增生情况,并测量动脉管腔面积,探索射频消融动脉血管合适温度。2.使用温控射频球囊对兔动脉粥样硬化血管进行纵向线性消融,探讨温控射频消融球囊对动脉粥样硬化斑块的影响,并了解其对动脉粥样硬化斑块血管管腔面积影响,测量炎性因子,凋亡因子及TGF-β通路,探索温控射频球囊线性消融动脉粥样硬化血管后血管组织学变化,并探索温控射频球囊消融动脉粥样硬化血管后,促炎细胞因子,抑炎细胞因子,凋亡因子及TGF-β/Smad-2炎症通路变化情况,为临床治疗动脉粥样硬化提供新思路。方法:1.将正常健康家兔分为4组,即单纯球囊扩张对照组,45℃温控射频球囊扩张组,50℃温控射频球囊扩张组,55℃温控射频球囊扩张组。温控射频球囊在扩张后1h,3d,7d留取兔动脉标本,甲醛固定,并进行HE,Masson染色,观察血管增生,胶原纤维变化情况并测量血管腔面积。2.动脉硬化建模:球囊拉伤兔腹主动脉内膜,并联合高脂饮食喂养,建立动脉粥样硬化模型,并在12w时随机处死2只大兔以检验动脉粥样硬化造模是否成功。3.将造模成功的大兔随机分为2组,即使用55℃射频消融扩张及单纯球囊扩张兔动脉粥样硬化血管,在1小时,7天,14天以及28天留取动脉标本,行HE及MASSON染色,进行病理组织学切片观察,了解温控射频球囊及单纯球囊扩张对动脉粥样硬化血管影响。并应用免疫组化,western blot及荧光定量PCR等方法,检测组织中促炎因子,抑炎因子,凋亡因子及TGF-β/Smad-2通路蛋白水平及组织中m RNA水平的变化。结果:1.与单纯球囊扩张组及对照组比较,应用45℃,50℃,55℃线性消融正常兔动脉血管时,血管管腔面积各统计组之间无统计学差异。2.使用55℃射频扩张粥样硬化血管,在相同时间点,温控射频球囊组血管管腔面积大于单纯球囊扩张组,而随时间延长温控射频消融球囊组及单纯球囊扩张组两组组内血管管腔面积变化不大。温控射频球囊组各组之间管壁厚度无统计学差异。3.组织水平上,在1小时,7天,14天,28天的时间点,温控射频球囊扩张组IL-1β,IL-17,Bax,IFN-γ,TGF-β,Smad-2以及Caspase3表达明显高于单纯球囊扩张组。温控射频消融球囊扩张组表达IL-10及Bcl-2少于单纯球囊扩张组。4.转录水平与蛋白水平,在1小时,7天,14天,28天的时间点,温控球囊扩张组兔子动脉血管中Bcl-2的整体表达量要明显低于单纯球囊扩张组。但是,温控射频球囊扩张组兔子动脉血管中Bax,TGF-β,Smad-2以及Caspase3的整体表达量要明显高于单纯球囊扩张组。结论:1.使用温控射频消融球囊消融兔正常血管时,45℃,50℃,55℃均可对正常血管造成损伤,但与单纯扩张组比较,血管管腔面积变化不大。虽然随温度升高,血管壁损伤范围也相应扩大,但即使是使用55℃对正常血管进行30s消融,仍然是安全的。2.使用55℃射频消融球囊扩张兔动脉粥样硬化血管,可使动脉粥样硬化血管管腔面积增大,可能与球囊挤压斑块,射频能量对血管造成线性损伤,血管顺应性增加,在动脉血压的作用下,扩张动脉粥样硬化血管。3.射频消融动脉粥样硬化血管时,消融部位动脉粥样硬化斑块可发生纤维化,可有助于动脉粥样硬化斑块稳定。4.射频消融可使消融部位促炎症细胞因子表达增加,抑炎细胞因子表达减少,凋亡受到抑制,同时TGF-β/smad2通路被激活。这也提示,虽然射频消融能增加血管面积,但同时炎症通路也被激活,如应用于临床,应同时应用抑制炎症反应药物。维持射频消融球囊扩张远期效果。
李友乾[10]（2020）在《黄芪甲苷通过PI3K/Akt/mTOR通路抑制大鼠颈总动脉球囊损伤后血管内膜增生》文中研究说明目的:本研究旨在通过建立颈总动脉损伤的大鼠模型,明确不同剂量黄芪甲苷（astragalosides iv,ASIV）对血管内膜增生的抑制效果,并探讨黄芪甲苷通过磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein dinase B,Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammlian target of rapamycin,mTOR）（PI3K/Akt/mTOR）对自噬的影响机制。方法:选用SPF级健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠24只,4-6周龄,约280g-300g,适应性喂养3天,随机选取6只作为假手术组。其余使用球囊损伤法建立大鼠颈总动脉球囊损血管模型,实验共分为四组,假手术组、模型组、低剂量黄芪甲苷组、高剂量黄芪甲苷组。低剂量黄芪甲苷组给于60mg·kg-1·d-1的黄芪甲苷,高剂量黄芪甲苷组给于120mg·kg-1·d-1的黄芪甲苷灌胃治疗,假手术组及模型组给予相同体积的1%羧甲基纤维素钠灌胃。4周后取大鼠损伤处颈总动脉做石蜡切片,光镜下观察血管腔形态,通过图像分析软件评估管腔面积、内膜增生程度、内膜中膜比值;免疫组化法测定血管组织中增殖指数（Ki67）、分化簇3（CD3）、分化簇68（CD68）表达,western blot检测血管组织中磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（phosphated phosphatidylinositol-3-kinase,p-PI3K）、PI3K、磷酸化蛋白激酶B（phosphated protein dinase B,p-Akt）、protein dinase B,Akt、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（phosphated-mammlian target of rapamycin,p-mTOR）、mTOR、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen;PCNA）、α-平滑肌肌动蛋白（α-Smooth muscle actin,α-SMA）、细胞间黏附分子-1（intercellular cell adhesion molecule-1;ICAM-1）、微管相关蛋白1轻链3B（Microtuble-associated protein 1 light chain 3B,LC3B）、P62的蛋白表达情况。明确不同剂量的ASIV对颈总动脉球囊损伤大鼠血管内膜增生的抑制效果及PI3K/Akt/mTOR信号通路磷酸化蛋白及总蛋白的表达情况。结果:1.与假手术组相比,模型组内膜增生程度明显升高（P<0.05）,血管腔面积较前减少（P<0.05）,中膜变化无统计学差异（P>0.05）;与模型组相比,ASIV组内膜增生被抑制（P<0.05）,血管腔面积增大（P<0.05）,且呈剂量依赖性,中膜面积无明显改变（P>0.05）。2.与假手术组相比,模型组CD3、CD68表达明显升高（P<0.05）,经ASIV治疗后CD3、CD68表达降低（P<0.05）,且呈剂量依赖性。3.与假手术组相比,模型组大鼠血清IL-6、TGF-β1、TGF-β2、TNF-α、IL-1β等炎症因子表达显着上调,经ASIV干预后相关炎性细胞因子表达被抑制。4.与假手术组相比,模型组PCNA、Ki67、Clo-1、β-catenin等因子明显升高（P<0.05）;与模型组相比,ASIV干预后相关因子表达被抑制（P<0.05）,且呈剂量依赖性。5.与假手术组相比,模型组大鼠颈总动脉组织中PCNA、ICAM-1蛋白表达增加,α-SMA蛋白表达减少（P<0.05）;与模型组相比,ASIV干预后PCNA、ICAM-1蛋白表达减少,α-SMA蛋白表达增加（P<0.05）。6.与假手术组相比,模型组大鼠颈总动脉组织中P-PI3K/T-PI3K、P-Akt/T-Akt、P-mTOR/T-mTOR蛋白表达降低（P<0.05）,与模型组相比,P-PI3K/T-PI3K、P-Akt/T-Akt、P-mTOR/T-mTOR蛋白表达蛋白水平升高（P<0.05）。7.与假手术组相比,模型组大鼠颈总动脉组织中P62蛋白表达降低（P<0.05）,与模型组相比,ASIV组P62水平升高（P<0.05）;与假手术组相比,模型组LC3B蛋白表达升高（P<0.05）,与模型组相比,ASIV组LC3B表达降低（P<0.05）。结论:1.ASIV可抑制大鼠颈总动脉球囊损伤术后内膜的增生,主要是通过抑制血管平滑肌细胞的增殖、迁移及表型转换。2.ASIV可通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制自噬发挥抗血管再狭窄的作用。
二、支架植入诱导平滑肌细胞凋亡在防治再狭窄中的作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、支架植入诱导平滑肌细胞凋亡在防治再狭窄中的作用（论文提纲范文）
（1）解毒活血方促进PCI术后冠状动脉血管内皮细胞损伤修复的机制研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1 西医学对PCI术后再狭窄的研究 |
| 2 中医学对PCI术后再狭窄的认识 |
| 3 中医药对于PCI术后再狭窄的治疗进展 |
| 4 毒瘀理论探析 |
| 5 毒瘀互结是血管再狭窄的病理机制 |
| 6 解毒活血法防治血管内再狭窄的理论依据 |
| 第二部分 解毒活血方抑制AT1-AA影响EPCs凋亡的机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 2 方法和步骤 |
| 2.1 内皮祖细胞复苏、传代及冻存 |
| 2.2 MTT法检测内皮祖细胞增殖及生存活力 |
| 2.3 流式细胞术测定内皮祖细胞的凋亡状况 |
| 2.4 内皮祖细胞细胞内ROS水平检测 |
| 2.5 蛋白印迹 |
| 3 统计学处理 |
| 4 结果 |
| 4.1 内皮祖细胞镜下形状及生长特点 |
| 4.2 AT1-AA降低EPCs生存活力,解毒活血方可拮抗该效应 |
| 4.3 AT1-AA诱导EPCs凋亡,解毒活血方可抑制其效应 |
| 4.4 AT1-AA诱导EPCs活性氧浓度增加,解毒活血方可抑制此效应 |
| 4.5 AT1-AA调控EPC凋亡相关蛋白表达,解毒活血方可抑制此效应 |
| 5 讨论 |
| 5.1 PCI术后再狭窄西医治疗的现状 |
| 5.2 PCI术后再狭窄中医治疗的特点 |
| 5.3 PCI术后再狭窄内皮损伤模型的建立 |
| 5.4 内皮祖细胞在PCI术后再狭窄过程中的作用 |
| 5.5 内皮祖细胞在再狭窄过程中的细胞凋亡机制 |
| 5.6 解毒活血方方药分析 |
| 5.7 解毒活血方对内皮祖细胞生存活力的影响 |
| 5.8 解毒活血方对内皮祖细胞细胞凋亡率的影响 |
| 5.9 解毒活血方对EPCs氧化应激及凋亡的影响 |
| 不足与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（2）豁痰解毒通络饮对大鼠PTCA术后AS模型的干预作用及其调控自噬通路的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 一、现代医学对于PTCA术后再狭窄的研究进展 |
| 二、传统中医学对PTCA术后再狭窄的研究进展 |
| 实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 道谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简介 |
（3）中药防治冠脉支架植入术后再狭窄的Meta分析及用药规律的数据挖掘（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 冠脉支架植入术后再狭窄的研究进展 |
| 1 概述 |
| 2 中医研究现状 |
| 2.1 病因病机 |
| 2.2 治疗与方法 |
| 3 西医研究现状 |
| 3.1 冠脉支架内再狭窄与危险因素 |
| 3.2 冠脉支架内再狭窄的发病机制 |
| 3.3 处理与对策 |
| 4 总结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第一章 中药防治冠脉支架植入术后再狭窄的Meta分析 |
| 第一节 资料与方法 |
| 1 纳入及排除标准 |
| 2 文献检索方法 |
| 3 文献筛选 |
| 4 方法学评估 |
| 5 数据提取 |
| 6 数据分析 |
| 第二节 研究结果 |
| 1 文献检索结果 |
| 2 纳入文献基本特征 |
| 3 文献质量的方法学评估 |
| 4 Meta分析结果 |
| 第三节 讨论与总结 |
| 1 结果分析 |
| 2 小结 |
| 第二章 中药防治冠脉支架植入术后再狭窄的数据挖掘 |
| 第一节 资料与方法 |
| 1 处方来源 |
| 2 文献筛选 |
| 3 建立原始资料数据库 |
| 4 数据分析 |
| 第二节 研究结果 |
| 1 频数分析结果 |
| 2 关联规则分析 |
| 3 聚类分析 |
| 第三节 讨论与总结 |
| 1 结果分析 |
| 2 小结 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（4）丹参化瘀汤防治下肢动脉硬化闭塞症术后再狭窄临床疗效研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词对照 |
| 前言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1 现代医学对ISR的认识 |
| 1.1 ISR的概念 |
| 1.2 ISR临床分型及分期 |
| 1.3 ISR病因病理 |
| 1.4 ISR危险因素 |
| 1.5 ISR西医治疗 |
| 2 传统医学对ISR的认识 |
| 2.1 病因病机 |
| 2.2 治法治则 |
| 第二部分 临床研究 |
| 1.病例来源 |
| 2.病例选择 |
| 2.1 西医诊断标准 |
| 2.2 中医辨证标准 |
| 2.3 纳入标准 |
| 2.4 排除标准 |
| 2.5 病例终止 |
| 3.研究方案 |
| 3.1 研究对象 |
| 3.2 研究材料 |
| 3.3 治疗方法 |
| 3.4 治疗疗程、随访及观察时点 |
| 3.5 临床疗效指标监测 |
| 3.6 症状量化评分标准 |
| 3.7 疗效参照标准 |
| 3.8 安全监测 |
| 3.9 统计学分析 |
| 第三部分:研究结果 |
| 1.一般资料 |
| 1.1 性别以及年龄比较 |
| 1.2 两组符合入组左右肢比较 |
| 2.临床疗效指标对比 |
| 2.1 踝肱指数 |
| 2.2 经皮氧分压 |
| 2.3 激光多普勒血流监测 |
| 2.4 症状量化评分 |
| 3 疗效分析 |
| 3.1 踝肱指数 |
| 3.2 经皮氧分压 |
| 3.3 激光多普勒血流监测 |
| 3.4 症状量化评分 |
| 3.5 治疗后有效率 |
| 3.6 安全监测 |
| 第四部分:讨论分析及研究 |
| 1.下肢动脉硬化闭塞症术后再狭窄的中医渊源 |
| 2.丹参化瘀汤单味药古籍记载及现代药理研究 |
| 3.丹参化瘀汤对于ISR临床疗效评价 |
| 3.1 一般资料评价 |
| 3.2 踝肱指数评价 |
| 3.3 经皮氧分压评价 |
| 3.4 激光多普勒血流监测评价 |
| 3.5 症状量化评分评价 |
| 第五部分:结论与展望 |
| 1.结论 |
| 2.不足与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 下肢动脉硬化闭塞症术后再狭窄中医防治研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 |
（5）从NLRP3炎性小体探讨络风宁0号对HCAEC的保护作用及机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 从“络风内动”学说到中药复合单体涂层支架/球囊研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 药物涂层球囊在经皮冠状动脉介入治疗中的应用研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述三 NLRP3炎性小体在冠心病发生发展中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第一部分 DCB治疗小冠状动脉原发病变疗效性研究: 一项随机对照试验的meta分析 |
| 第一节 资料与方法 |
| 第二节 结果 |
| 第三节 讨论 |
| 第四节 局限性 |
| 第五节 结论 |
| 第六节 参考文献 |
| 第二部分 络风宁0号对AngⅡ诱导的HCAEC损伤的保护作用及机制 |
| 实验一 络风宁0号对体外培养HCASMC和HCAEC增殖的影响 |
| 第一节 实验材料 |
| 第二节 实验方案 |
| 第三节 实验结果 |
| 第四节 讨论 |
| 第五节 结论 |
| 第六节 参考文献 |
| 实验二 建立血管紧张素Ⅱ诱导的人冠状动脉内皮细胞损伤模型 |
| 第一节 实验材料 |
| 第二节 实验方案 |
| 第三节 实验结果 |
| 第四节 讨论 |
| 第五节 结论 |
| 第六节 参考文献 |
| 实验三 络风宁0号对AngⅡ诱导的HCAEC损伤的保护作用 |
| 第一节 实验材料 |
| 第二节 实验方案 |
| 第三节 实验结果 |
| 第四节 讨论 |
| 第五节 结论 |
| 第六节 参考文献 |
| 实验四 基于NLRP3炎性小体探讨络风宁0号对AngⅡ诱导的HCAEC损伤的保护作用的机制 |
| 第一节 实验材料 |
| 第二节 实验方案 |
| 第三节 实验结果 |
| 第四节 讨论 |
| 第五节 结论 |
| 第六节 参考文献 |
| 结语 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（6）基于CaN/NFAT信号途径探讨血府逐瘀汤治疗血管损伤后内皮增生的作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 第一部分 文献综述 |
| 一、中医学对冠心病介入术后再狭窄的认识 |
| 二、现代医学对冠心病介入术后再狭窄的认识 |
| 三、血府逐瘀汤治疗心血管疾病药理机制的研究进展 |
| 第二部分 实验研究 |
| 第一章 血府逐瘀汤通过CaN/NFAT信号通路对人脐静脉内皮细胞损伤后的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二章 血府逐瘀汤通过CaN/NFAT信号通路调控大鼠颈总动脉球囊损伤术后血管内膜增生的体内实验研究 |
| 实验一 血府逐瘀汤对球囊损伤大鼠颈总动脉病理形态及MCP-1 的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 实验二 血府逐瘀汤对球囊损伤大鼠颈总动脉CaN/NFAT信号通路干预作用的研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 结论 |
| 本文创新点 |
| 不足和展望 |
| 参考文献 |
（7）阿苯达唑在血管再狭窄中的作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 血管再狭窄模型的构建 |
| 材料与方法 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 4. 统计学处理 |
| 结果 |
| 1. 建立小鼠股动脉狭窄模型 |
| 2. 小鼠体重变化 |
| 3. 血管周套囊性狭窄小鼠模型中血流改变和管壁重塑 |
| 讨论 |
| 第二部分 阿苯达唑对VSMCs体外生物学功能的影响及其作用机制 |
| 材料与方法 |
| 1. 细胞 |
| 2. 材料 |
| 3. 方法 |
| 结果 |
| 1. 体外用药浓度确定 |
| 2. ABZ抑制VSMCs的增殖和迁移 |
| 3. ABZ对ECs增殖和迁移的作用 |
| 4. ABZ通过调节MLC和MYPT磷酸化抑制F-actin分解,从而抑制细胞迁移. |
| 讨论 |
| 第三部分 阿苯达唑对小鼠血管再狭窄的影响 |
| 材料与方法 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 结果 |
| 1. ABZ治疗后股动脉血流的变化 |
| 2. ABZ在再狭窄小鼠模型中抑制新生内膜的增生 |
| 3. ABZ在对组织抗原表达的影响 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 预防动脉支架内再狭窄药物的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的论文及基金参与情况 |
| 致谢 |
（8）DAXX过表达抑制大鼠腹主动脉球囊损伤后VSMC增殖的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 主要中英文缩略词检索 |
| 第1章 绪论 |
| 第2章 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要实验仪器 |
| 2.3 实验试剂及抗体 |
| 2.4 主要试剂的配制 |
| 第3章 实验方法 |
| 3.1 实验分组及给药方法 |
| 3.2 建立SD大鼠腹主动脉球囊损伤模型 |
| 3.3 实验流程图 |
| 3.4 取材并进行相关病理学检测 |
| 3.5 统计分析 |
| 第4章 实验结果 |
| 第5章 讨论 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（9）温控射频消融血管成形术对动脉粥样硬化的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 1. 对象和方法 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.1.1 实验动物与饲料 |
| 1.1.2 实验仪器 |
| 1.1.3 实验试剂 |
| 1.1.4 试剂配制 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 射频温控球囊消融对家兔正常血管的影响 |
| 1.2.2 射频温控球囊消融动脉粥样硬化血管情况 |
| 1.2.3 样本采集 |
| 1.2.4 测量指标 |
| 1.2.5 HE染色 |
| 1.2.6 Masson染色 |
| 1.2.7 Realtime PCR方法 |
| 1.2.8 western blot方法 |
| 1.3 统计学分析 |
| 2. 结果 |
| 2.1 射频温控球囊消融对家兔正常血管的影响 |
| 2.1.1 温控球囊对血管影响 |
| 2.1.2 比较温控射频球囊组与单纯球囊扩增组对兔主动脉作用 |
| 2.1.3 温控射频球囊组与单纯球囊扩增组对兔主动脉纤维化情况 |
| 2.2 射频温控球囊对家兔动脉粥样硬化血管的影响 |
| 2.2.1 组织病理学改变 |
| 2.2.2 比较温控射频球囊组与单纯球囊扩增组对兔粥状动脉硬化主动脉作用 |
| 2.2.3 免疫组化结果 |
| 2.3 射频温控球囊对家兔动脉血管的细胞因子转录水平的影响 |
| 2.4 射频温控球囊对家兔动脉血管的细胞因子蛋白水平的影响 |
| 3. 讨论 |
| 3.1 PCI与动脉粥样硬化 |
| 3.2 射频消融(RFA) |
| 3.3 温控球囊血管成形术(RFPB) |
| 3.4 温控射频球囊成形术的安全性 |
| 3.5 温控射频球囊对血管壁成分以及血管内径的影响 |
| 3.5.1 温控射频球囊对血管内斑块内成分的影响 |
| 3.5.2 温控射频球囊对血管扩张维持的影响 |
| 3.5.3 凋亡和内膜增生 |
| 3.6 细胞因子在动脉粥样硬化发展中的作用 |
| 3.7 温控射频球囊对凋亡通路影响 |
| 3.8 研究不足之处 |
| 全文结论 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 综述 动脉粥样硬化与炎症因子及炎症通路 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）黄芪甲苷通过PI3K/Akt/mTOR通路抑制大鼠颈总动脉球囊损伤后血管内膜增生（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
四、支架植入诱导平滑肌细胞凋亡在防治再狭窄中的作用（论文参考文献）
- [1]解毒活血方促进PCI术后冠状动脉血管内皮细胞损伤修复的机制研究[D]. 张海泉. 江西中医药大学, 2021(01)
- [2]豁痰解毒通络饮对大鼠PTCA术后AS模型的干预作用及其调控自噬通路的研究[D]. 花儿（T.ATARTSE TSEG）. 长春中医药大学, 2021(01)
- [3]中药防治冠脉支架植入术后再狭窄的Meta分析及用药规律的数据挖掘[D]. 郑毅成. 北京中医药大学, 2021(08)
- [4]丹参化瘀汤防治下肢动脉硬化闭塞症术后再狭窄临床疗效研究[D]. 张帅. 安徽中医药大学, 2021(01)
- [5]从NLRP3炎性小体探讨络风宁0号对HCAEC的保护作用及机制[D]. 王凯. 北京中医药大学, 2020(04)
- [6]基于CaN/NFAT信号途径探讨血府逐瘀汤治疗血管损伤后内皮增生的作用机制研究[D]. 陈乙菲. 长春中医药大学, 2020(08)
- [7]阿苯达唑在血管再狭窄中的作用机制研究[D]. 路芳芳. 苏州大学, 2020(02)
- [8]DAXX过表达抑制大鼠腹主动脉球囊损伤后VSMC增殖的机制研究[D]. 彭建. 南华大学, 2020(01)
- [9]温控射频消融血管成形术对动脉粥样硬化的影响[D]. 夏晓东. 天津医科大学, 2020(06)
- [10]黄芪甲苷通过PI3K/Akt/mTOR通路抑制大鼠颈总动脉球囊损伤后血管内膜增生[D]. 李友乾. 济宁医学院, 2020(01)