聚合酶链式反应同时检测SEN病毒D和H的方法的建立

聚合酶链式反应同时检测SEN病毒D和H的方法的建立

一、同时检测SEN病毒D和H聚合酶链反应法的建立(论文文献综述)

周虹,王全立,詹林盛,许金波,章金刚,王字玲,宫锋,岳文[1](2011)在《血液安全与保障——军事医学科学院输血研究进展》文中研究表明"血液安全及保障"是个永恒的主题,军事医学科学院从建院之初到现在的60年间,开展了包括血液采集、检验,血液筛查、制备、储存、运输、输注及新型血源开辟等多个方面的研究.从20世纪50年代初的血浆代用品开始,先后在输血传播(病毒)传染病的检测、相关灭活方法与装置、临床输血安全、血液制品与代用品及其新型血液成分等方面均取得了良好的进展,形成了一系列理论、技术、产品、装置与标准,力求为形成整体、灵活、精确、高效、优质的安全血液供应链提供科技支撑.

于秋丽,淑芬,韩占英,石鹏辉,张艳波,齐顺祥[2](2007)在《河北省SEN病毒D和H亚型分离株基因序列分析》文中认为[目的]了解河北省SENV的感染情况和基因进化特征。[方法]以SENV读码框架1区(ORF1)核苷酸序列设计引物建立巢式聚合酶链反应(nested-PCR)方法,对306份来自不同人群血清标本进行SENV-D/H亚型检测,并对部分扩增产物进行序列分析。[结果]306份标本中,SENV DNA(D和H亚型)总阳性率为26.8%。健康人群、乙型肝炎、肝硬化患者、急性甲型肝炎、丙型肝炎和非甲-非戊型肝炎组SENV DNA的阳性率分别为22.9%(11/48)、26.0%、16.7%、25.8%、47.6%、40%。丙型肝炎患者和健康人群之间差异有统计学意义(2χ=4.21,P﹤0.05),其他各组与健康人群之间均差异无统计学意义(P﹥0.05),SENV-D和SENV-H DNA的检出率分别为18.6%和17.6%,两型之间差异无统计学意义(P﹥0.05)。5份来自不同人群的SENV-D亚型测序株部分核苷酸序列与标准株(AX025730)同源性≥91.6%,4份来自不同人群的SENV-H亚型测序株部分核苷酸序列与标准株(AX025838)同源性≥88.6%。[结论]在河北省健康人群和肝炎人群中SENV感染均存在,并出现河北省地方毒株。

庞栋,黄晓群,李忠,龙邕泉,黄金环,李恒聪,张翙[3](2007)在《巢式聚合酶链反应检测SEN病毒方法的建立及初步应用》文中进行了进一步梳理目的:研究建立巢式聚合酶链反应(nPCR)检测SEN病毒D和H亚型的方法,并将其应用到流行病调查。方法:选择SENV开放读码框1(ORFⅠ)核苷酸序列设计合成特异性引物,建立检测SEN病毒D和H型感染的巢式PCR方法,对216例无偿献血者、65例甲肝患者、152例乙肝患者、79例丙肝患者和83例非甲~非戊肝患者进行了SENV感染的检测。结果:该方法特异性和灵敏度均较高,检测结果显示健康献血者、甲肝、乙肝、丙肝和非甲~非戊型肝炎患者SENVD和/或H总感染率分别为29.1%、38.5%、55.3%、54.4%、38.5%。SENV D和/或H在健康献血者中总感染率显着低于乙肝和丙肝患者(P<0.01)。甲肝、乙肝、丙肝和非甲~非戊型肝炎患者总感染率无显着性差异(P>0.05)。结论:巢式PCR方法可用于检测SENV感染。我国部分地区无偿献血和肝炎等患者中存在SENV感染,其致病性有待进一步研究。

蔡衍珊,钟柳英,黄盛昌,蒋力云,刘远[4](2007)在《广州市生育期妇女乙型肝炎病毒和SEN病毒感染状况调查》文中指出目的了解广州市生育期妇女乙型肝炎病毒和SEN病毒感染状况。方法对2006年在广州市某三甲医院妇产科就诊的年龄介于18~47岁的3208名生育期妇女的血清标本用酶联免疫法检测乙肝两对半,并随机抽取其中200份标本用聚合酶链反应法检测SEN病毒D和H亚型。结果HBsAg阳性率为14.3%(459/3208),其中HBsAg、HBeAg、抗-HBc三项阳性占3.2%(103/3208),HBsAg、抗-HBe、抗-HBc三项阳性占8.4%(269/3208),未检出SENV-D和H。结论广州市生育期妇女乙肝病毒携带率高,必须强化乙肝疫苗预防接种,确保新生儿及时、全程接种乙肝疫苗,杜绝乙肝病毒经血传播。SEN病毒感染状况有待进一步研究。

帅金志[5](2007)在《新疆部分人群SEN病毒的感染状况及亚型分析》文中研究指明目的:1.建立聚合酶链式反应(PCR)筛查SENV的反应体系和流程;2.检测SENV-D和SENV-H在新疆地区部分人群中的流行情况;3.对SENV-D和H亚型进行进化地位分析。方法:1.对象:选取98例健康供血员作为对照组,113例HBV阳性、57例抗-HCV阳性、27例ALT升高者作为病例组;2.用Ready PCR血清病毒DNA纯化系统提取样本血浆中的病毒DNA,针对SENV ORF1部分区域设计、合成引物,采用巢式聚合酶链反应(nested-PCR)扩增SENV-D和SENV-H亚型;3.运用SPSS10.0进行数据分析;用DNASTAR软件分析SENV的系统进化情况。结果:1.建立的巢式聚合酶链式反应(nPCR)具有较高的特异性和重复性;2. SENV在对照组、HBV阳性组、抗-HCV阳性组、ALT升高组检出率分别为35.7%、51.3%、36.8%和14.8%,其中HBV阳性组的检出率与对照组有显着差异(P <0.05);3. SENV在汉族、维吾尔族和回族中的检出率分别为41.9%、38.9%和15.8%;4.系统进化树分析,SENV-D和H亚型在进化过程中无地域差别。结论:1.建立了同时检测SEN病毒D和H型的巢式聚合酶链检测方法(nPCR);2.获得了3个SENV D型片段和2个SENV H型片段;3.在新疆汉族、维吾尔族和回族中都存在SENV D和H亚型感染;4. SENV与HBV有相似的传播途径,但可能更多依赖非输血传播;5.系统发育分析显示新疆分离株(SENV-D-XJ6、XJ-58和XJ-111以及SENV-H-X-J5和XJ-172)分别与己发表的SENV-D(AB059352)和SENV-H(AB059353)日本分离株同属一个亚型;新疆分离株属于TTV超家族。

许东,田德英,黄元成,张振纲,皮斌,陈红云,宋佩辉[6](2006)在《SEN病毒ORF2基因序列和抗原性的初步分析》文中提出目的对SEN病毒(SENV)开放阅读框(ORF)2基因进行序列测定分析和原核表达,并对表达蛋白进行抗原性分析。方法用聚合酶链反应(PCR)方法扩增SENVORF2基因,对该基因进行序列测定、系统进化分析,双酶切扩增产物与原核表达载体pRSETB构建成重组质粒,诱导表达后进行SDSPAGE和免疫印迹分析。结果该株SENVORF2与北京株(AY072045)核苷酸同源性为97%,氨基酸同源性为59%;与日本株(AB059352)同源性分别为90%和56%。含有SENVORF2质粒的菌株表达相对分子质量约为19×103的融合蛋白,免疫印迹证明该融合蛋白能与SENVDNA阳性血清发生特异反应。结论表达了158个氨基酸的SENVORF2原核表达蛋白具有一定的抗原活性。

庞栋,李恒聪,黄晓群[7](2006)在《输血与SEN病毒的研究进展》文中研究指明SEN病毒广泛存在于人群中,输血是其重要传播途径之一,目前发现该病毒与非甲戊型肝炎有较强相关性,但尚无足够证据表明SEN病毒就是非甲-非戊型肝炎的病原体。此文就SEN病毒的分子生物学特征、实验室检测、流行概况及传播、肝损害、输血后非甲-非戊型肝炎进展作一综述。

高文军,卫敏,蔡仲华,冯建华,魏环,高齐明,杨凤萍,彭晓谋[8](2006)在《中山地区不同类型肝炎患者SEN病毒的感染状况》文中研究指明目的了解中山地区不同类型的病毒性肝炎患者SEN病毒的感染情况。方法设计合成SEN病毒D型和H型的型特异性引物,对乙肝病毒携带者73例、慢性乙肝124例、重症乙型肝炎58例、乙肝肝硬化63例、非甲-戊型肝炎患者57例和对照组健康体检者60人的血清进行套式PCR扩增。结果通过基因克隆和测序证实了基因扩增产物的特异性。非甲-戊型肝炎SEN病毒阳性率(66.67%)明显高于健康献血者(26.67%)(P<0.01)。慢性乙型肝炎患者(52.42%)、重症乙型肝炎患者(53.97%)、乙肝肝硬化患者(56.90%)和非甲-戊型肝炎患者(66.67%)SEN病毒阳性率之间无明显差异(P>0.05),但均显着高于乙肝病毒携带者(27.39%)和健康献血者(P<0.01)。乙肝病毒携带者SEN病毒阳性率与健康献血者之间无明显差异(P>0.05)。结论SEN病毒感染与非甲-戊型肝炎发病有一定的关系。SEN病毒感染可能与乙肝病毒感染的活动和加重有一定的关系。

杨军,卢瑞玲,梁之祥[9](2006)在《SEN病毒的研究进展》文中指出

张振纲,许东,田德英,宋佩辉[10](2005)在《聚合酶链反应检测SEN病毒的方法学探讨》文中提出目的 探讨聚合酶链反应 (PCR)扩增SEN病毒 (SENV)核酸的优化条件。方法 将标本分别以AcupureDNA/RNA提取法(方法 1)、SDS 蛋白酶K方法 (方法 2 )及裂解液提取TTV核酸法(方法 3)抽提SENVDNA模板,并用 3组针对SENVDNA不同区的引物进行扩增,比较不同模板提取方法、不同扩增引物及不同体积标本对SENVDNA检出率的影响。结果 在 191份血清中,方法 1、方法 2和方法 3提取核酸后可分别检测出 15份、9份和 7份。采用方法 1提取SENVDNA的基础上,采用 2组套式引物分别扩增出 15份和 11份,一次PCR引物仅检出 2份SENVDNA阳性标本;应用引物 2扩增至少需要 50μl血清。结论 不同引物扩增方法和不同模板提取方法可能是影响SENVDNA检出率重要因素。

二、同时检测SEN病毒D和H聚合酶链反应法的建立(论文开题报告)

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、同时检测SEN病毒D和H聚合酶链反应法的建立(论文提纲范文)

(1)血液安全与保障——军事医学科学院输血研究进展(论文提纲范文)

1 输血传播疾病研究
    1.1 输血相关SEN病毒研究
    1.2 输血相关病毒快速检测方法研究
    1.3 血液筛查试剂的评估
    1.4 HBV, HCV细胞和实验动物模型研究
2 新型成分血研究
    2.1 输血相关病毒灭活方法与装置研究
    2.2 低白细胞残留量血浆分离方法的建立
    2.3 全血采集后过滤时间和悬浮红细胞有效保存期的确定
    2.4 通用型红细胞研究
3 血液制品代用品研究
    3.1 血液制品
    3.2 血液代用品
    3.3 干细胞定向诱导分化为红细胞研究
4 临床输血安全研究
    4.1 血小板输注无效的机制研究
    4.2 输血相关免疫调节机制研究
5 结语

(2)河北省SEN病毒D和H亚型分离株基因序列分析(论文提纲范文)

1 材料与方法
    1.1 标本来源
    1.2 引物设计
    1.3 SENV DNA提取
    1.4 巢式PCR扩增
    1.5 产物检测
    1.6 PCR产物测序和序列分析
    1.7 统计学方法
2 结果
    2.1 SENV感染的检测
    2.2 SENV-D和SENV-H DNA的检测
    2.3 PCR产物电泳结果
    2.4 不同人群SENV分离株部分核苷酸序列的分析比较
3 讨论

(3)巢式聚合酶链反应检测SEN病毒方法的建立及初步应用(论文提纲范文)

1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 引物的设计和合成
    1.3 SENV DNA提取
    1.4 nPCR检测
    1.5 产物的的克隆和测序
    1.6 统计分析
2 结果
    2.1 nPCR产物电泳结果
    2.2 PCR产物的测序结果
    2.3 SENV DNA的感染率
3 讨论

(5)新疆部分人群SEN病毒的感染状况及亚型分析(论文提纲范文)

摘要
Abstract
英文缩略词表
前言
材料与方法
    1 材料
    2 方法
结果
    1. PCR 扩增产物电泳结果
    2. PCR 扩增产物的测序
    3. 测序结果与GenBank 主要分离株之间的同源性分析
    4. 巢式PCR 方法重复性的评定
    5. SENV D 和H 型在健康供血员、HBV 和抗-HCV 阳性及ALT 升高中的检出状况
    6. SENV D 型及H 型在汉族、维吾尔族、回族中的检出状况
    7. 健康供血员SENV 感染的年龄、性别及献血次数的分布
    8. SENV D 亚型核苷酸序列分析
    9. SENV H 亚型序列核苷酸同源性分析
    10. SEN病毒,TTV原型株和变异株的进化树分析
    11. 不同地域SENV D亚型分离株进化关系分析
    12. 不同地域SENV H 亚型分离株进化关系分析
讨论
    1. SEN 病毒检测方法
    2. 新疆部分人群SEN 病毒检出状况
    3. SEN 病毒系统进化分析
结论
参考文献
附录1
附录2
附录3
附录4
文献综述
致谢
作者简介
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表

(7)输血与SEN病毒的研究进展(论文提纲范文)

1 分子生物学特征与实验室检查
2 流行概况及传播
    2.1 SENV的传播方式
    2.2 SENV与输血
3 SENV与肝脏疾病
    3.1 SENV 与非甲-非戊型肝炎的联系 SENV
    3.2 SENV 的单独感染、混合感染及与肝癌的联系
4 未来趋势

(10)聚合酶链反应检测SEN病毒的方法学探讨(论文提纲范文)

材料和方法
    1. 材料:
    2. 方法:
    3.PCR反应 :
结果
    1 .核酸提取方法结果比较
    2 .不同引物扩增效率比较
    3. PCR 检测SEN DNA灵敏度试验结果 :
讨论

四、同时检测SEN病毒D和H聚合酶链反应法的建立(论文参考文献)

  • [1]血液安全与保障——军事医学科学院输血研究进展[J]. 周虹,王全立,詹林盛,许金波,章金刚,王字玲,宫锋,岳文. 中国科学:生命科学, 2011(10)
  • [2]河北省SEN病毒D和H亚型分离株基因序列分析[J]. 于秋丽,淑芬,韩占英,石鹏辉,张艳波,齐顺祥. 现代预防医学, 2007(23)
  • [3]巢式聚合酶链反应检测SEN病毒方法的建立及初步应用[J]. 庞栋,黄晓群,李忠,龙邕泉,黄金环,李恒聪,张翙. 中国卫生检验杂志, 2007(10)
  • [4]广州市生育期妇女乙型肝炎病毒和SEN病毒感染状况调查[J]. 蔡衍珊,钟柳英,黄盛昌,蒋力云,刘远. 热带医学杂志, 2007(06)
  • [5]新疆部分人群SEN病毒的感染状况及亚型分析[D]. 帅金志. 石河子大学, 2007(06)
  • [6]SEN病毒ORF2基因序列和抗原性的初步分析[J]. 许东,田德英,黄元成,张振纲,皮斌,陈红云,宋佩辉. 中华实验和临床病毒学杂志, 2006(04)
  • [7]输血与SEN病毒的研究进展[J]. 庞栋,李恒聪,黄晓群. 内科, 2006(02)
  • [8]中山地区不同类型肝炎患者SEN病毒的感染状况[J]. 高文军,卫敏,蔡仲华,冯建华,魏环,高齐明,杨凤萍,彭晓谋. 新乡医学院学报, 2006(02)
  • [9]SEN病毒的研究进展[J]. 杨军,卢瑞玲,梁之祥. 实用医药杂志, 2006(03)
  • [10]聚合酶链反应检测SEN病毒的方法学探讨[J]. 张振纲,许东,田德英,宋佩辉. 中华检验医学杂志, 2005(03)

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聚合酶链式反应同时检测SEN病毒D和H的方法的建立
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